Thales Quedi Furian,
1Leonardo Moreira Lima,
1Karen
Apellanis Borges,
1Silvio Luis da Silveira Rocha,
1Felipe
Oliveira Salle,
1Carlos Tadeu Pippi Salle
1Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul – Av.
Bento Gonçalves, 8824. CEP: 91540-000. Porto Alegre/RS
RESUMO: Escherichia coli é uma bactéria constituinte da flora
intestinal dos animais e dos seres humanos. Entretanto, alguns sorogrupos de E. coli estão associados a diversas patologias, inclusive em aves, destacando-se a Doença Crônica Respiratória, a celulite, além da relação do agente com toxinfecções alimentares. O tratamento com antimicrobianos consiste em uma medida comum para o controle da colibacilose. Contudo, o uso intenso destes medicamentos, associado com as subdosagens terapêuticas, acelera o desenvolvimento de resistência aos antibióticos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a susceptibilidade de 40 amostras de E.
coli, divididas em patogênicas e apatogênicas, frente a quatorze
antimicrobianos através do teste de difusão em ágar. Os resultados demonstraram uma alta resistência das amostras analisadas à tetraciclina e à sulfametoxazole-trimetoprim. A resistência a duas ou mais drogas foi encontrada em 75% das amostras patogênicas e em 65% das amostras apatogênicas de E. coli. Todos os isolados testados foram sensíveis aos antimicrobianos ceftiofur, cefuroxima, amicacina e amoxicilina/ácido clavulânico. Não se constatou diferença significativa entre os resultados comparando-se os dois grupos de E. coli.
Palavras-Chave: colibacilose, susceptibilidade antimicrobiana,
INTRODUÇÃO
A bactériaEscherichia coli está amplamente distribuída na natureza e na microbiota entérica de animais e de seres humanos. Em aves, a infecção causada por E. coli é geralmente secundária a outros agentes e a manifestação da doença ocorre de maneira extra-intestinal (FILHO, 2007). Atualmente a colibacilose é considerada uma das principais doenças da avicultura industrial e o tratamento com antibióticos é uma das formas de diminuir o seu impacto (FERREIRA & KNÖBL, 2009). As drogas antimicrobianas são utilizadas extensivamente na indústria avícola, desde a introdução do uso de antibióticos em meados da década de 50 (BARNES et al., 2008). Em paralelo ao intenso emprego dos agentes quimioterápicos, ocorreu um progressivo desenvolvimento de resistência antimicrobiana associado com as subdosagens terapêuticas, a qual foi inicialmente identificada no uso das tetraciclinas (BARBOSA & LEVY, 2000; BARNES et al., 2008). Em diferentes situações, o desenvolvimento de resistência por certas bactérias patogênicas é mais rápido do que a capacidade da indústria farmacêutica em produzir novas drogas (MOTA et al., 2005).
Algumas formas de resistência são propriedades inerentes de todos os microorganismos, pois se trata de um mecanismo próprio de sobrevivência. Este fato justifica a origem de genes codificadores de resistência a antibióticos, os quais podem disseminar-se entre os microorganismos a partir de transferência horizontal (MADIGAN et al., 2010). Em geral, as atividades essenciais de uma bactéria são codificadas por genes cromossomais e as não-essenciais, como a resistência antimicrobiana são codificadas por elementos genéticos móveis extra-cromossomais (MOTA et al., 2005). O conjunto destes elementos, formado por plasmídeos, transposons e integrons, interage entre si, facilitando a transferência horizontal de genes de resistência entre bactérias de grupos filogenéticos distantes.
Em virtude da ampla resistência aos antibióticos, bactérias isoladas devem ser submetidas aos testes de sensibilidade
patogênicas e apatogênicas de origem aviária frente a quatorze antimicrobianos através do teste de susceptibilidade de disco difusão em ágar.
MATERIAL E MÉTODOS
As amostras de E. coli utilizadas neste experimento foram anteriormente isoladas e identificadas no Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (CDPA-UFRGS). Selecionaram-se 20 amostras de E.
coli patogênicas e 20 amostras apatogênicas anteriormente
classificadas por Souza (2006), e oriundas de lesões cutâneas, de quadros respiratórios e de fezes coletadas em cama de aviário. O teste de susceptibilidade por disco difusão em ágar foi realizado conforme as normas do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)(CLSI, 2008).Os seguintes antimicrobianos (Biorad®) foram utilizados: amicacina (30µg), amoxiclina + ácido clavulânico (20µg/10µg), ampicilina (10µg), cefalexina (30µg), cefuroxima (30µg), ceftiofur (30µg), ciprofloxacina (5µg), clindamicina (2µg), enrofloxacina (5µg), gentamicina (10µg), norfloxacina (10µg), ofloxacina (5µg), tetraciclina (30µg), sulfametoxazol-trimetoprim (23,75µg /1,25µg). As cepas Escherichia coli (ATCC 25922) e
Staphylococcus aureus (ATCC 25923) foram selecionadas para o
controle de qualidade do teste de susceptibilidade. O diâmetro de cada halo de inibição foi comparado com os padrões propostos e cada cepa classificada como sensível, resistente ou intermediário frente aos quatorze antimicrobianos (CLSI, 2008). Para a análise estatística (Fisher’s test) foi utilizado o programa SPSSStatistic 21.0 em um nível de significância de 5% (p<0,05).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Muitos trabalhos recentes que estudaram a susceptibilidade de cepas de E. coli aos antibióticos em diferentes espécies apresentam algum nível de resistência antimicrobiana, ocorrendo algumas variações de acordo com a região geográfica avaliada (BARNES et al, 2008). Os resultados obtidos neste experimento são semelhantes aos recentemente citados na literatura (Tabela 1).
Tabela 1. Resistência antimicrobiana das 40 amostras de E. coli analisadas
frente aos quatorze antimicrobianos selecionados
Antimicrobianos Patogênicas Apatogênicas Total % Total % Ceftiofur 0 0 0 0 Ciprofloxacina 1 5 1 5 Cefuroxime 0 0 0 0 Gentamicina 4 20 0 0 Ampicilina 2 10 2 10 Clindamicina 20 100 20 100 Norfloxacina 0 0 1 5 Amicacina 0 0 0 0 Amoxicilina + Ác. Clav. 0 0 0 0 Ofloxacina 3 15 1 5 Tetraciclina 12 60 11 55 Cefalexina 0 0 1 5 Trimetropim + Sulfa. 11 55 8 40 Enrofloxacina 5 25 3 15
As maiores resistências aos antimicrobianos foram encontradas entre a tetraciclina (60% entre patogênicas e 55% entre apatogênicas) e sulfametoxazol-trimetoprim (55% entre patogênicas e 40% entre apatogênicas). A alta freqüência de resistência à tetraciclina está de acordo com outros trabalhos publicados (ZAKERI & KASHEFI, 2012; ZHAO et al., 2005; VAN DEN BOGAARD et al., 2001) e têm sido atribuída, em parte, a sua utilização generalizada e prolongada na indústria avícola. A resistência a esta droga geralmente é associada com plasmídeos R e mediada por genes de efluxo tetB e tetD (ALEKSHUN & LEVY, 2007).Entre todos os
As 20 amostras patogênicas e as 20 amostras apatogênicas de E. coli testadas neste experimento foram 100% sensíveis aos antimicrobianos ceftiofur, cefuroxima, amicacina, amoxicilina + ácido clavulânico. Também se observou que as amostras estudadas não apresentaram diferença significativa relacionando-se os seus índices de patogenicidade com a susceptibilidade aos antimicrobianos.
Todas as cepas de E. coli testadas apresentaram resistência frente a uma ou mais antimicrobianos. Os dois grupos de amostras não apresentaram diferença significativa entre os resultados de resistência antimicrobiana, desta forma a patogenicidade de uma amostra não pode ser considerada um fator primordial para a resistência a uma determinada droga nas condições deste experimento.
REFERÊNCIAS
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