La présence du récepteur pour le fragment Fc des IgG (γFcR) a fait suggérer initialement une origine monocytoïde du tricholeucocyte. Les tricholeucocytes sont des cellules B matures, exprimant fortement les immunoglobulines de surface (IgG3), CD19, CD20 (expression modérée à forte), CD22 (expression forte), FMC7 (qui identifie un épitope du complexe multimérique CD20) mais, en revanche, n’expriment ni la molécule CD5 ni les molécules CD23 et CD24. L’expression protéique du CD27, un marqueur des cellules B mémoire, est négative. L’expression du CD79B, qui reconnaît un épitope de la chaîne β du récepteur du lymphocyte B est faible ou absente. L’expression du CD10 est positive dans 10 % des cas. L’expression du CD11c est très forte et celle du CD25 modérée à intense [138]. Les tricholeucocytes n’expriment pas BCL6, un marqueur du centre germinatif ni le CD38 [139]. Quatre marqueurs sont utiles pour identifier les tricholeucocytes : le CD103, le DBA44, le CD123 et l’annexine A1. Le CD103 est une αE-intégrine liée de façon non covalente à l’intégrine β7. Considérée comme spécifique de la HCL, son expression est néanmoins positive dans certains cas de lymphome splénique de la zone marginale (SMZL). Le DBA44, utilisé sur coupes en paraffine [140] ou sur cellules en suspension [141], est aussi exprimé dans environ 80 % des cas de lymphome splénique de la zone marginale (SMZL). Les tricholeucocytes expriment la molécule CD123 [142] reconnaissant la chaîne α du récepteur de l’IL3. L’annexine A1, médiateur de l’action des glucocorticoïdes dans l’inflammation, a été impliquée dans le cycle cellulaire et la prolifération et pourrait être très spécifique de la HCL [143].
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Un score immunologique, comme le score de Matutes utilisé dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC), a été développé pour le diagnostic de HCL. Ce score est fondé sur l’expression de quatre marqueurs : CD103, CD11c, CD25 et HC2. Ce dernier, peu utilisé, est souvent remplacé par l’expression du CD123. Un point est attribué pour une expression positive et 0 point pour une expression négative. Quatre-vingt-dix-huit pour cent des cas de HCL ont un score à 3 ou 4, contrairement à la HCL-V ou au SLVL où le score est habituellement de 0 ou 1[144]. L’expression d’autres marqueurs a été observée, en particulier l’expression de TIA1 dans environ 50 % des cas (habituellement observée à la surface d’un sous-groupe de lymphocytes T cytotoxiques CD8 positifs) et du CD52 avec une forte intensité [144].
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Au terme de ce bilan de six années d'étude, ayant porté sur 101 cas de syndromes lymphoprolifératifs chroniques, nous pouvons conclure que ces hémopathies malignes touchent surtout les sujets âgés plus de 40 ans pour le myélome multiple et la leucémie lymphoïde chronique, et plus de 65 ans pour le syndrome de Sézary, touchant les deux sexes avec une nette prédominance masculine sauf pour la leucémie prolymphocytaire B et la leucémie à tricholeucocytes.
La similitude dans la présentation clinique et cytologique des différents SLPC rend parfois le diagnostic positif difficile, d'où l'intérêt de rassembler ses syndromes pour une démarche diagnostique pluridisciplinaire.
Le diagnostic doit être évoqué devant une hyperlymphocytose sanguine excédant 5x109/l
et persistante plus de trois mois. Cette hyperlymphocytose doit inciter le biologiste à réaliser un frottis sanguin à la recherche d'anomalies cellulaires. Ceci peut conduire au diagnostic dans les cas faciles qui ne posent pas le problème de diagnostics différentiels. Dans la plupart des cas c'est l'immunophénotypage qui apporte la certitude du diagnostic.
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Annexe 1
Annexe 1
Annexe 1
Annexe 1
L'hémogramme [145] L'hémogramme [145] L'hémogramme [145] L'hémogramme [145]En pratique, cet examen est réalisé sur sang veineux, prélevé sur anticoagulant EDTA. Lors du prélèvement, le tube doit être agité pour éviter la formation de microcaillots. De plus, pour avoir une analyse cytologique correcte et une numération plaquettaire exacte, l’examen doit être réalisé rapidement (<2h) après le prélèvement.
La numération et la formule sanguine sont réalisées sur des automates de façon suffisamment fiable. En conséquence, en cas d’anomalie quantitative ou qualitative détectée par l’automate, une étude morphologique du frottis de sang est indispensable.
Annexe 2
Annexe 2 Annexe 2
Annexe 2
Les fiches techniques du frottis sanguins [145] Les fiches techniques du frottis sanguins [145] Les fiches techniques du frottis sanguins [145] Les fiches techniques du frottis sanguins [145]
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Etalement:Etalement: Etalement:Etalement:
Principe : Principe :Principe :
Principe : Obtenir sur une lame de verre une couche unicellulaire d'éléments figurés du sang répartis sur tout le frottis et fixés dans l'aspect le plus proche de leur état physiologique.
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Étalement ou frottis sanguin
Principe : Obtenir sur une lame de verre une couche unicellulaire d'éléments figurés du sang répartis sur tout le frottis et fixés dans l'aspect le plus proche de leur état physiologique.
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Préparer le matériel nécessaire :
lames dégraissées référencées, pastette, spatule, gants, sang*, conteneur pour déchets contaminés.
Prélever le sang à l'aide de la pastette après l'avoir homogénéisé.
Déposer une petite goutte à l'une des extrémités de la lame.
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Positionner la spatule de façon à prendre la totalité de la goutte. La laisser se répartir de façon homogène le long du biseau.
Appliquer un mouvement de translation horizontale en maintenant la spatule d’un angle de 45° environ sans appuyer tout au long de la lame.
Sécher par agitation pour fixer temporairement les cellules. Éliminer les déchets contaminés.
*afin que les cellules aient l’aspect le plus proche possible de leur état physiologique, il est bon que le délai de contact avec l’anticoagulant ne dépasse pas ½ heure car ensuite les cellules gonflent (macroplaquettes voire plaquettes géantes), certaines se vacuolisent (monocytes et grand lymphocytes) d’autres montrent des images de noyaux en picnose ; l’idéal serait de réaliser les frottis sur un sang recueilli sans anticoagulant (au bout du doigt ou sur les dernières gouttes de l’aiguille).