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Chapitre II : Résultats et discussion

II.5. Analyse qualitatif par chromatographie gazeuse

II.7.1. Contrôle de qualité de pommade formulé

7.2. Etude de l’effet anti inflammatoire et cicatrisant

Les effets de la pommade sont illustrés dans la figure n°21. Le traitement a montré une rétraction de la zone enflammée et résorption de la lésion laissant apparaitre la dépigmentation de la peau qui est une conséquence de la lésion et cicatrisation de la peau ne laissant aucune trace de la lésion sauf une dépigmentation. La peau reperdra sa couleur après exposition à l’UV.

Chapitre II Résultats et discussion

Figure n° 21 : Résultats de d’effet anti inflammatoire et cicatrisant de la pommade formulée

Disparition de la lésion

Résorption de la lésion

Conclusion

Conclusion et Perspectives

Au terme de ce travail, nous avons mis en évidence cetaines caractériqtiques physicochimiques de l’huile essentielles de Rosmarinus officinalis extraite par hydrodistillation. D’autre part nous avons montré quelques effets biologiques notament l’effet antibactérien, anti parasitaire et quelques effets pharmacologiques tels que l’évaluation de pouvoir anti inflamatoire de cette huile .

Au regard global de nos résultats, nous pouvons noté avec interet que le screening phytochimique de la plante a montré que les feuilles de Rosmarinus officinalis est riche en anthocyanes, tanins, glucosides, coumarines, mucillages, terpanoide. Toutefois cette plante est pauvre en irridoides, en sucres réducteurs, et en anthraquinones.

Le rendement d’extraction des huiles essentielles de la plante sèche par hydrodistillation est très faible (0,05) en comparaison avec celui trouvé dans les normes AFNOR. Cette différence peut être due à la méthode d’extraction utilisée.

Le contrôle physicochimique des huiles essentielles a permis d’évaluer la qualité de ces dernières en determinant l’indice d’acide, le pouvoir rotatoire et la densité relative. Nos résultats ont montré que les propriétés physicochimiques des huiles essentielles de Rosmarinus officinalis extraites par hydrodistillation sont conformes aux normes AFNOR.

L’analyse effectuée par chromatographie en phase gazeuse a montré l’existence de trois composés chimiques majoritaires.

L’étude du quelques activités biologiques des huiles essentielles de romarin a montré une action antibactérienne sur Klebsiella pneumoniae d’une part, d’autre part un effet antiparasitaire particulièrement anti hydatique très marqué.

Au cours de notre travail, nous avons formulé une pommade à base des huile essentielles et qui a montré un affet anti-inflammatoire sur la peau.

En perspective, il est nécessaire d’effectuer d’autres études complémentaires pour améliorer les méthodes d’extraction des huiles essentielles dans le but d’assurer un meilleur rendement et d’identifier les métabolites doués d’activités biologiques importantes pour le développement de thérapies altérnatives dans plusieurs pathologies. Il est également important d’évaluer l’effet toxique à moyen et à long terme de différents dérivés de l’huile de Rosmarinus officinalis.

Une recherche sérieuse d’une meilleure exploitation de ces huiles dans les domaines pharmaceutiques, nutritionnels et technologie agro-alimentaire.

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Annexes

Annexes I : Matériels et Equipements

Verrerie et le petit matériel Appareillage et dispositifs. Réactifs -Tubes à essai -Béchers - Pipettes graduées - Eprouvettes graduées - Ballon à fond rond - Verres à montre - Spatule - Barreaux magnétiques - Ampoule à décanter - Papier filtre - Micropipettes - Embouts -Chauffe ballon -Chambre UV -Bain-marie - Etuve - Agitateur magnétique - Balance analytique - Réfrigérateur - Dessiccateur - Appareil CPG - Broyeur électrique - Eau distillée - Ethanol - HCL - Ammoniaque. - FeCl3 - H2SO4 - KOH - Acide gallique -Acide sulfurique -Réactif e Fehling -Alcool éthylique -Chloroforme

Les formules chimiques des réactifs

Réactifs Formule chimique

Acide chlorohydrique

Hcl

Ammoniaque

NH

3

chlorure de fer anhydrique

FeCl

3

Chloroformes

CHCl

3

Ethanol

C

2

H

5

O

Ether diethylique

C

4

H

10

O

Hydroxyde de potassium

KOH

Annexe II : les milieux utilisés

Gélose aux peptones de caséine et de soja (TSA) :

- Peptone pancréatique de caséine (15g). - Peptone papaïne de soja (5g).

- Chlorure de sodium (5g). - Gélose (15mg).

- Eau purifiée (1000ml).

Milieu Mueller Hinton :

-Extrait de viande 4g. -Amidon 1.5g. -Tryptone (caséine). -Agar 15 g.

L’eau physiologique stérile :

-0.9 mg de Nacl. -100 ml d’eau distillé.

Milieu Sabouraud :

Peptone de viande et de caséine (10 g).

Gélose (15g).

L’eau purifiée (1000 ml). Glucose monohydraté (40g).

Annexes

Annexe III

Matériels biologiques

• Les souches bactériennes Staphylococcus aureus

Ce sont des cocci Gram positif avec un diamètre de 0.5 à 1.5µm, elles sont habituellement non capsulée, ou possédant des capsules limitées, elles sont anaérobies facultatives.

C’est l’agent commun des infections postopératoires de blessures endocardite aigue, intoxications alimentaires (Dworkin et Falkow, 2006)

Escherichia coli

C’est une bactérie à Gram négatif, commensal du tube digestif de l’homme et de l’animal (kaper et al, 2004), de forme non sporulée, de type aérobie facultative, géneralement mobile grâce au flagelle

Cette bactérie est impliquée dans les infections aigues d’appareil urinaire, elle provoque également des diarrhées d’été ,des intoxications alimentaires (Percival,2004).

officinalis, mettre en évidence ses activités biologiques et l’essai de formulation d’un pommade à partir

de ces huiles. D’après les résultats obtenus on a remarqué un rendement en huiles essentielles de l’ordre de 0,05 %, ce résultat est conforme aux standards internationaux. L’étude phytochimique a preuvé la richesse de cette plante en anthocyanes, tanins glucosides, coumarines, mucilages, terpanoides. L’étude organoleptique a permis de constater que cette huile est un liquide de couleur jaune clair avec une odeur camphrée. Les résultats des indices physicochimiques a montré un indice d’acide de 1,4025g NaOH/g, pH de 6,7 ; pouvoir rotatoire égal à 0 et une densité relative de 0,91g /cm3. L’analyse par CPG a révélée la richesse de l’huile essentielle en cinéole et pinène avec des grandes quantités. L’évaluation de l’activité antibactérienne a montré une action et degré de sensibilité variable vis à vis les souches testés. L’activité antiparasitaire a donné une action positive provoquant le détachement de la paroi du kyste hydatique. Le contrôle de qualité du pommade a montré que cette dernière est caractérisé par une couleur marron, odeur caractéristique, consistance pâteuse, pH égal à 6 et qui ne présente aucune contamination bactérienne.

Mots clés : Rosmarinus officinalis, activité biologique, pommade, rendement, étude phytochimique,

indices physicochimiques, pouvoir rotatoire, CPG, activité antibactérienne, activité antiparasitaire, kyste hydatique.

Summary

The aim of our work is to characterize and identify the essential oils of Rosmarinus officinalis, to demonstrate their biological activities and to test the formulation of an ointment from these oils. The yield of essential oils is 0.05%. The phytochemical study showed the richness of this plant in anthocyanins, tannins, glucosides, coumarins, mucilages and terpanoides. The organoleptic study showed that this oil is of light yellow liquid with a camphorous odor. Physicochemical analysis showed an acid number of 1.4025 g NaOH/g, pH of 6.77, rotatory power equal to 0 and a relative density of 0.91g/cm3. The analysis by GC revealed the richness of the essential oil in cineole and pinene with large quantities. The evaluation of the antibacterial activity showed an action and a degree of sensitivity variable with respect to the strains tested. The antiparasitic activity gave a positive action causing detachment of the hydrated wall. The quality control of the ointment showed that the latter is characterized by a brown color, characteristic odor, pasty consistency, pH equal to 6 and which does not present any bacterial contamination.

Key words: Rosmarinus officinalis, biological activity, ointment, yield, phytochemical study, physicochemical index, rotatory power, GPC, antibacterial activity, antiparasitic activity, hydatic cyst.

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