Chapitre II: Résultats et discussions
II.3 Etude des activités du matière grasse
42
Le taux LDL de nos échantillons inférieur160 mg/dL, donc les résultats obtenus indiquent que les matières grasses de dromadaires sont considéré comme un aliment sécurisé pour consommation humaine selon Recommandations AFSSAPS Mars 2005 : Chez un patient sans facteurs de risque, le bilan lipidique sera considéré comme normal si : LDL inférieur 160m g/dL(SELAS, 2016).
II.3.Etude des activités du matière grasse
Dans cette partie, on vise à explorer les différentes activités biologiques de la matière grasse de dromadaire; à savoir: l'activité antioxydante et antimicrobienne (Tableau 07).
Tableau07: Résultats relatifs à la détermination de l'activité antioxydante et antimicrobienne de graisses de dromadaire.
Activité Echantillon1±moy.e crt Echantillon2±moy.e crt Echantillon3±moy.e crt AntioxydanteIC50(m g/mL) 8.16±3.599 6.98±0.387427 7.94±0.014142 Antimicrobienne(m m) 0±0 0±0 0±0
43
II.3.1. Activité antioxydant
Selon nos résultats (Figure 23), on remarque que les matières grasses de bosse de dromadaires possèdent un IC50 très supérieur par rapport tocophérol (Vit E:0.017mg/ml) (comme référence) , aussi on remarque que les valeurs de IC50 sont différentes d'un échantillon à l'autre
Figure 23: Valeurs D'IC50 de matières grasses de dromadaire par rapport tocophérol(VitE)
les valeurs d'IC50 de nos échantillons sont: l'échantillon1: 8.16mg/ml , l'échantillon2: 6.98mg/ml l'échantillon 3:7.94mg/ml .
La capacité antioxydant d'un composé est d'autant plus élevée que sa CE50 est petite(POPOVICI et al., 2009).
La graisse de l'Hachi(dromadaire) contenait une faible quantité d'insaponifiable en raison de l'absence de tocophérols L'absence des composés antioxydants tels que les tocophérols, peut accélérer la l'oxydation des acides gras mono insaturés lors du stockage des graisses Hachi (dromadaire)(SBIHI et al, 2013).Donc on peut expliquer la faible capacité antioxydant de cette matière par l'oxydation de lipides.
L'oxydation des lipides peut se produire a n'importe quel moment dans une matière grasse ou une huile alimentaire donc on utilise les antioxydants pour stabiliser les matières grasses(JOHN et HILTON, 1989). 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 E1 E2 E3 VE IC 50 e n m g/ m l VE et l'échantillons
Chapitre II Résultats et discussion
44
Donc les graisses de bosse de dromadaires ayant une antioxydant très faible dans leurs compositions, il est donc nécessaire de conserve ces matières dans des conditions favorables pour évite leur oxydation
II.3.2. Activité antimicrobienne
On a étudié l'activité antimicrobienne de graisses de dromadaires sur 5 souches, en utilisant des antibiotiques comme références. Les résultats obtenus sont résumés dans le Tableau 08
Selon nos résultats, les graisses de dromadaires ne représentent aucune activité antimicrobienne contre Bacillus subtilis ,Salmonella entericaserovarTyphi, E.coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa par rapport à l'antibiotique: Gentamycine, Vancomycine, Penicillinne.
Tableau 08 : Résultats relatifs à la détermination de l'activité antimicrobienne de graisses de dromadaire.
E1 E2 E3 Gentamycine Vancomycine Penicillinne
BS / / / 27.33 21.66 6
Sa / / / 28.66 20.66 10.33
E.coli / / / 29.33 19.33 6
Styph / / / 26 9.6 8
Pa / / / 31 20.66 6
D’après nos résultats, on remarque que nos échantillons ne présentent aucune activité antimicrobienne vis-à-vis des souches testées, ceci est confirmé par les résultats obtenus par
GUSSOUM et SAYEH, 2019.
Certains acides gras et sphingoïde sont une activité antibactérienne et joueraient un rôle plus direct qu'on ne le pensait auparavant dans la défense immunitaire innée contre les infections bactériennes ils comprennent les sphingosines libres, les dihydro sphingosines,
45
l'acide laurique et l'acide sapieniqueetles monoglycérides (Fischeret al;2011).D'autre part le matière grasse de dromadaire contient un faible quantité d'acide laurique; de 0.66%(SBIHI et al,2013).
Cela explique l'effet antimicrobien négatif de matières graisses de dromadaire par la faible concentration des acides gras libres plus spécifiquement l'acides laurique et des monoglycérides ; car selon les résultats obtenues de paramètres physico-chimique des graisses de dromadaires; notre échantillons sont bien conservés, donc l'hydrolyse de triglycérides est faible et les acides gras reste sous forme triglycérides.
Conclusion générale
Conclusion
Le chameau s'appelle le bateau du désert, et c'est l'un des rares animaux à pouvoir s'adapter et vivre dans le désert pendant de longues périodes sans avoir besoin d'eau ni de nourriture. Il convient de noter que l'utilisation de la graisse de bosse est apparue en médecine populaire pour traiter de nombreux problèmes .Par conséquent, dans notre étude, nous avons examiné l'extraction et l'évaluation de la matière grasse présente dans la bosse de chameau (dromadaire), l'étude physicochimique et l'évaluation de la teneur en graisse, à dose de la concentration de cholestérol, Triglycéride , HDL el LDL tissulaire, et l'étude des quelques activités biologiques des ces matières.
La détermination des indices relatifs à la matière grasse, montre que nos échantillons présente une activité de saponification entre (171.13mg/g - 199.19mg/g), une indice de peroxyde entre (1 mequiv.O2/kg - 7 mequiv.O2/kg), une indice d'acide entre (1.12 mg de KOH/g - 3.36 mg de KOH/g.)Les matières grasses de dromadaire possède une bon qualité puisque leur indice de saponification indique la richesse de ces matières en acides gras à longues chaines et l'indice de peroxyde et acide dans le norme.
Ainsi que la teneur en lipide , cholestérol entre (128.92mg/dL-142.43mg/dL.), et triglycérides entre (31.34 mg/dL-34.37mg/dL.), HDL entre (44.61mg/dl-50.34 mg/dL) et LDL entre (93.2 mg/dL-114 mg/dL) dans la norme, ce qui indique que la matière grasse de dromadaire est sans danger pour le consommateur .
Le graisse de bosse Cela n'a aucun effet contre les bactéries sur les souches suivants: Bacillus subtilis ,Salmonella enterica serovar Typhi, E.coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa avec une faible effet contre l'oxydation (6.98mg/ml- 8.16mg/ml). On conclue que n'y a pas de différences remarquables entre les graisses de bosse dromadaire des 3 échantillons étudiés en ce qui concerne l'indice de peroxyde , indice d'acide et expression d'acidité, aussi triglycérides tissulaire , HDL ,LDL et les activités; aussi aucune différence de mêmes paramètres pour les tissus.
Conclusion général
Tous ces résultats ouvrent des nouvelles perspectives et recommandations qui doivent être accomplis pour : Elargir l'ampleur de l'études en augmentant le nombre des paramètres et les populations étudiés
Etudier de l'intérêt nutritionnel et thérapeutique de cette matière.
Approfondir la caractérisation biochimique de la matière grasse en utilisant des techniques plus sophistiquées (CPG).
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100) YAGIL.G,1982: camels milk _ in revue animal production_ edition FAO, 1982- pp82.
Annexe 01:Matériel, verreries et réactifs 1. Matériel et verreries
Agitateur Autoclave
Bain-marie de 37°à 50°C
Balance analytique de type KERAN. Balance analytique de type RADWAG Bec benzène Boites Pétri Bucher 100 ml ; 25 ml Burette + support Centrifugeuse Chronomètre Congélateur Couteau Cuves
Disques de 6 mm (papier Wattman ) Écouvillons Entonnoir Eprouvette 5ml ;25 ml; 50ml;100ml Erlenmeyer Etuve Fiole jaugée Flacons en plastique
Flacons pour le conservation Gants
Micropipette 5 à 50 µL , 200 µl ,1000µL , Mortier et pilon
Pansement (pour la filtration) Papier d'aluminium
Papier filtre
Papiers d’absorbance de l’eau (Serviettes pour la séchage) Bavettes
Annexes
Pince Pipettes graduées de 1ml ; 2 ml; 10 ml; 25 ml Plaque chauffante Réfrigérant à reflux Spatule Spectrophotomètre
Auto analyseur de type (BIOLIS24j) Tubes à essai
Tubes en verre à visse 5 ml Tubes pour centrifugation le Kit de réactif 2. Produits Acide acétique 99% Acide chlorhydrique ; 0.5 N ; 4 N Chloroforme Eau distillée Eau physiologique Ethanol 95 % Gélose Muller-Hinton Iodure de potassium KIO3 KOH Méthanol NaCl Phénolphtaléine 1% Thiosulfate de sodium 0.01
L'acide phosphotungstique (PTA). Chlorure de magnésium
Tocophérol
DPPH
Annexe 02: Matériel biologique et milieux de culture
). 2020 Figure 2.1 : Matière grasse utilisée durant notre étude (photo originale
Annexes
Figure 2.3: Différents souches utilisées pour détermination l'activité antibactérienne et l'absence de l'activité pour nos échantillons (photo originale 2020).
Annexe 03 :
1.Expression en acidité
L’acidité peut être calculée à partir des résultats obtenus pour la détermination de l’indice d’acide.
L’acidité exprimée en pourcentage en masse est égale à : (V x C x M)/( 10 . m)
Où :
V : est le volume, en millilitres, de la solution titrée d’hydroxyde de potassium utilisée.
C : est la concentration exacte en moles par litre, de la solution titrée d’hydroxyde de potassium utilisé.
M : est la masse molaire, en grammes par mole, de l’acide adopté pour l’expression du résultat (282 acide oléique ).
m : est la masse en grammes de la prise d’essai. Prendre comme résultat la moyenne arithmétique des deux déterminations (JORA,2012).
2.Préparation de solution d'Hydroxyde de potassium, solution c (KOH) = 0,5 mol/l dans
l’éthanol à 95 % (fraction volumique). Cette solution doit être incolore ou jaune paille. Une solution peut être obtenue selon la mode opératoire suivant :
Faire bouillir à reflux 0.5 litre d’éthanol avec 4g d’hydroxyde de potassium durant 1 h, puis distiller immédiatement. Dissoudre dans le distillat la quantité requise d’hydroxyde de potassium (à peu près 17.5g). Laisser reposer pendant plusieurs jours, puis décanter le liquide