Diversité des impacts des options de production de fourrage

O IM foi sensível à deterioração das sementes soja e cevada, distinguindo os lotes de sementes em diferentes estágios de deterioração, inclusive os três primeiros tempos de envelhecimento da soja cv 7980 (6 h a 24 h) em relação ao controle, os quais foram iguais pelo teste de germinação.

A frequência de ACs teve correlação diretamente proporcional com o tempo de envelhecimento, aumentando à medida que aumentou o tempo de envelhecimento.

Os dados indicam que a citogenética pode ser utilizada como ferramenta auxiliar na avaliação da viabilidade de sementes e pode ser um bom meio de se estimar indiretamente a perda de integridade e a queda na eficiência do sistema de reparo do DNA, além de ser um método rápido e barato, o que é muito interessante para bancos de germoplasma com coleções muito grandes.

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CONCLUSÃO GERAL

Apesar de ser uma metodologia barata, a avaliação da integridade e eficiência do sistema de reparo do DNA, como também a avaliação da integridade do RNA, ambos por gel de agarose corado com brometo de etídio, não foram auxiliares na avaliação da integridade das sementes, tanto para as sementes de soja como para as sementes de cevada. Essa metodologia teve pouca reprodutibilidade e necessitou de uma grande quantidade de DNA.

O RAPD, apesar das limitações da técnica como a baixa reprodutibilidade, foi auxiliar na avaliação das sementes de soja, pois diferenciou os lotes de sementes e ainda possibilitou avaliar o sistema de reparo do DNA nas sementes envelhecidas. Além disso, foi uma técnica que necessitou de pouco DNA e é uma técnica barata. Uma recomendação para diminuir a baixa reprodutibilidade da técnica seria aumentar o número de repetições.

Dentre todas as metodologias moleculares avaliadas o qPCR foi a melhor para avaliar a integridade das sementes de soja, pois foi capaz de diferenciar os lotes das sementes mais envelhecidas das menos envelhecidas, foi mais objetiva do que as demais metodologias e necessitou de uma pequena quantidade de DNA, apenas 6 ng. O que é muito importante para um banco de germoplasma que nem sempre possui coleções com muitas sementes ou muitas vezes as sementes de algumas espécies são bastante pequenas. Uma forma de diminuir os custos do uso dessa técnica, seria usar primers de regiões conservadas que serviriam para mais de uma espécie, como também utilizar essa técnica mais para as coleções com poucas amostras e espécies com sementes pequenas.

A avaliação do IM e da frequência de ACs foram auxiliares na avaliação da integridade das sementes, tanto de soja quanto de cevada, pois permitiram a distinção entre os lotes de sementes em diferentes estágios de deterioração, além de ser uma metodologia barata. Todas as metodologias avaliadas devem ser aprimoradas, como também devem ser avaliadas outras metodologias para avaliação da integridade e sistema de reparo do DNA, como por exemplo, o ensaio cometa e a citometria de fluxo.