Le développement par les centres germinatifs (T FH dépendant)

Après l'interaction avec les TFH, des LB matures peuvent se développer vers une seconde

voie et initier à la formation de centres germinatifs [223]. En fonction des antigènes, leur formation s'initie entre 7 et 14 jours après immunisation/infection. Les centres germinatifs sont des zones localisées dans le follicule B dans lesquelles les LB prolifèrent. Ceux dont le BCR présente une meilleure affinité pour l'antigène se développent en plasmocytes à longue durée de vie. L'interaction entre les LB et les TFH à

la frontière T/B induit l'expression des facteurs de transcription réprimant leur différenciation en plasmocytes. BCL6 est un facteur obligatoire pour la formation du centre germinatif qui est fortement exprimé par les LB du centre germinatif [224]. Les souris dont le gène Bcl6 est inactivé dans la population de LB ne forment pas de centre germinatif et ne génèrent pas de plasmocytes à longue durée de vie [225]. BCL6 agit principalement sur la répression de l'expression de BLIMP1, ce qui permet aux LB de continuer à se développer avant de se transformer en plasmocytes [226]. MTA3 est également impliqué dans la formation des centres germinatifs en interagissant

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physiquement avec BCL6 pour augmenter son activité répressive. Lorsque l'expression de MTA3 est réduite, le niveau d'expression de BCL-6 n'est pas modifié, cependant, l'expression de BLIMP1 augmente. À l'opposé, lorsque BCL6 et MTA3 sont surexprimés artificiellement dans des plasmocytes, BLIMP1 et XBP1 sont inhibés, et CD19 et MHCII sont ré-exprimés [227]. MITF est également un facteur de transcription impliqué dans l'inhibition du développement des plasmocytes, et en son absence, BLIMP1 et IRF4 sont spontanément transcrits [228]. Pour finir, PAX5 est quant à lui impliqué dans l'inhibition du développement des plasmocytes, et nécessaire dans le maintien du phénotype des LB [229]. La caractéristique la plus importante de PAX5 est d'activer AID, une enzyme cruciale pour l'hypermutation somatique ainsi que la commutation de classe des immunoglobulines.

L'une des caractéristiques des plasmocytes différenciés dans les centres germinatifs est l'augmentation de l’affinité pour l'antigène par le mécanisme d'hypermutation somatique. Ce mécanisme permet un ré-agencement des gênes de la chaîne variable (le plus souvent la substitution d'une base) qui aboutit à la formation de variants légèrement différents du BCR initial. Durant la prolifération rapide des LB du centre germinatif, le mécanisme d'hypermutation somatique va entrainer une diversité importante de variants de BCR, dont seuls les plus affins vers l'antigène seront conservés. L'enzyme AID joue un rôle majeur dans ce mécanisme en échangeant ponctuellement l’acide aminée cytosine en uracile, à l'origine des mutations. La sélection des BCR les plus affins pour l'antigène requière la présence de l'antigène non dégradé, qui est principalement fourni par les FDC ou les DC présents dans les centres germinatifs. Récemment, les techniques d'imagerie in vivo ont permis de comprendre l'organisation des centres germinatifs [230]. Le centre germinatif est divisé en 2 zones : une zone sombre, dans laquelle a lieu la prolifération des LB du centre germinatif et l'hypermutation somatique et une zone claire, dans laquelle les LB de forte affinité pour l'antigène sont sélectionnés et leurs survies stimulées par la population de TFH. La

sélection des LB du centre germinatif ayant une forte affinité semble être dépendante de la quantité d'antigènes présente ainsi que de la population de TFH [231, 232].

À la fin de ce processus, les LB sélectionnés vont se différencier en plasmocytes. Cependant, les éléments moléculaires qui initient la phase de développement en plasmocytes sont peu connus. In vitro, la signalisation par CD40 semble être fortement impliquée dans ce phénomène, en agissant sur la diminution de la quantité d'ARNm de

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sa dégradation [234]. Cependant, les signaux et les mécanismes responsables de cette régulation restent à démontrer in vivo. L'activation du BCR uniquement n'induit pas l'expression de BLIMP1. Son expression nécessite l'activation par des cytokines telles que IL-2 et IL-5 [235]. Les cytokines jouent donc un rôle extrêmement important pour le développement en plasmocytes. Dans des lignées cellulaires, la combinaison d'IL-2 et IL- 5 [236] ou la présence d'IL-6 seule [237] sont suffisantes pour initier la transcription de BLIMP1. IL-21 induit également l'expression de BLIMP1 en présence d'IgM spécifiques et augmente le nombre de plasmocytes [238]. Cependant, IL-21 induit aussi l'expression de BCL6, ce qui semble montrer que de nombreux facteurs doivent être coordonnés pour initier la différenciation des LB du centre germinatif en plasmocytes. La population de TFH joue un rôle important dans ce processus en modifiant ses interactions avec les LB,

dont OX40, CD40L et en sécrétant IL-21. Cependant, les mécanismes précis ne sont pas connus (figure 19). Les centres germinatifs ont donc un rôle primordial dans la génération de la réponse humorale car ils permettent le développement des plasmocytes à longue durée de vie et des LB mémoires. La population de TFH étant la seule a induire

la génération des centres germinatifs, il est essentiel de privilégier sa polarisation lors de la vaccination.

Les 3 points essentiels :

(1) La réponse inflammatoire au niveau de la peau joue un rôle essentiel dans l'activation cellulaire.

(2) La migration des APC de la peau vers les ganglions drainants permet de présenter les antigènes vaccinaux aux LT CD4+ (3) La formation des centres germinatifs dans lesquels se développent les plasmocytes à longue durée de vie et à forte affinité pour l'antigène est dépendante des TFH

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