CONCLUSION-PERSPECTIVES

O OH O H OH O O OH O H O O OH OH O O OH O OH O H OH (6b)

O H N O H ^OH n n

104

3.1CONCLUSION

Au cours de notre recherche de nouvelles molécules capables de moduler la

mélanogenèse, notre attention s’est portée sur trois familles de molécules naturelles : les

aurones, les chromones et les dérivés des acides caféique (3,4-dihydroxycinnamique) et

férulique (4-hydroxy-3-méthoxycinnamique).

Les aurones et plus particulièrement les 4,6-dihydroxyaurones ont été obtenues en un

procédé divisé en 5 étapes. La méthode de synthèse développée pour ces molécules, nous a

également permis de synthétiser des 6-hydroxyaurones. Seules quelques difficultés persistent

au niveau de la synthèse des 4-hydroxy-6-méthoxyaurones, pendant la déméthylation

sélective en 4, difficultés liées aux conditions strictes d’utilisation du réactif de déprotection

le tribromure de bore.

La synthèse des deux chromones analogues structuraux de l’acide kojique a été

réalisée en quatre étapes à partir de la 2’,6’-dihydroxyacétophénone commerciale. Ce même

composé traité avec un chlorure d’acide, a permis d’accéder en une réaction aux

alkylchromones, réaction à l’issue de laquelle nous avons isolé pour la première fois les

2-alkyl-3-alcoylchromones.

Quant aux dérivés de l’acide caféique et de l’acide férulique, ils ont été obtenus par

une réaction de couplage peptidique, après activation de la fonction acide par le BOP.

En terme de dérivés finaux, au total une trentaine d’aurones, une dizaine de chromones

et 18 dérivés des acides caféique et férulique ont été synthétisés et leur activité biologique

évaluée.

Leur évaluation sur notre cible, la tyrosinase humaine a été réalisée sur une culture de

mélanocytes humains normaux. Les résultats obtenus ont permis de conclure à un réel

potentiel pour quelques molécules dont trois aurones, deux dérivés de l’acide férulique, un

dérivé de l’acide caféique, deux dérivés de l’acide p-dihydrocoumarique et quelques dérivés

structuralement proche du tyrosol et de la tyramine.

Les trois aurones ayant montré une inhibition très significative de la tyrosinase sont :

la 4,6,4’-trihydroxyaurone (6b), l’hispidol (7b) et la 4,4’-dihydroxyaurone (11). L’inhibition

semble liée à la présence simultanée de deux hydroxyles, l’un en 4 ou 6 et l’autre en 4’.

L’activité de ces aurones a été mise en évidence pour la première fois au cours de ce projet.

Cette famille de molécules a fait l’objet d’une demande de dépôt de brevet et d’une

105

Concernant les dérivés des acides caféique et férulique, les taux d’inhibition observés

sur la tyrosinase humaine sont importants et leur efficacité dans le modèle utilisé est

supérieure à celle de certaines références de la littérature (Vit C, acide kojique). Ces résultats

sont très prometteurs et nous permettent d’envisager une exploitation industrielle. Une

structure active (39) semble posséder les éléments structuraux requis pour l’activité

c'est-à-dire une fonction amide qui peut être remplacée par une fonction ester, séparée par deux

carbones de part et d’autre des deux noyaux phényl hydroxylés en para.

Les chromones n’ont révélé aucune activité significative sur notre cible la tyrosinase

humaine.

La phosphatation et la sulfatation des molécules actives ont permis d’améliorer leur

solubilité aqueuse. Malheureusement, les molécules obtenues n’ont montré aucune activité.

Leur activité pourrait être restituée en partie après des réactions de déphosphatation et de

désulfatation enzymatiques, qui sont en cours d’optimisation.

3.2PERSPECTIVES

Notre étude a abouti à l’identification de quelques molécules actives in vitro, et des

éléments structuraux impliqués dans l’efficacité de ces molécules. Cependant d’autres pistes

de modifications structurales peuvent être explorées afin de confirmer les relations

structure-activité que nous avons établies.

La synthèse de molécules supplémentaires (voir ci-dessous), de structure proche de la

4,6,4’-trihydroxyaurone (6b) pourrait être envisagée pour conclure sur l’importance du

positionnement des hydroxyles sur la structure aurone avec certitude.

Il serait aussi intéressant de voir si l’augmentation du nombre d’hydroxyle sur le

noyau B, entraîne un gain ou une perte d’activité. Dans le but d’identifier les caractéristiques

physico-chimiques de l’hydroxyle favorables à cette activité, celui-ci pourra être remplacé par

des groupements équivalents. L’implication du caractère donneur de liaison hydrogène par

106

exemple pourra être vérifiée en remplaçant l’hydroxyle par un autre groupement donneur de

liaison hydrogène.

Dans le cadre de l’étude des dérivés des acides caféique et férulique, nous avons

découvert que la modification de la structure du tyrosol a permis de conserver voire

d’augmenter l’activité dans certains cas. Il serait judicieux d’évaluer l’impact sur l’activité de

l’augmentation du nombre de carbones de part et d’autre de la liaison amide (voir formule

ci-dessous).

avec n >2

Pour toutes ces molécules, une étude de quantification des relations-structure-activité

pourrait être intéressante dans le but d’appuyer les relations structure activité définies et de

proposer un pharmacophore. Une meilleure sélection d’actifs pourrait être réalisée après une

étude de l’affinité des meilleures molécules pour le site actif de la tyrosinase.

Malheureusement, une telle étude n’est pas réalisable dans un proche avenir, car la structure

de la tyrosinase humaine n’est pas encore parfaitement connue.

Les molécules les plus actives issues de cette étude vont devoir subir d’autres tests

comme par exemple des tests d’innocuité, de stabilité ou de formulation avant une éventuelle

mise sur le marché. Ces produits étant destinés à une application cutanée, des études

d’absorption percutanée peuvent présenter un intérêt dans un argumentaire d’efficacité. Ces

études peuvent être réalisées in vitro sur des biopsies de peau ou des modèles de peau

reconstruite, à l’aide de dispositifs de diffusion appropriés comme les cellules de Franz. Ces