4.4 Résultats et discussions des différentes approches
4.4.2 Comparaison des différentes approches selon les modalités ex-
A ligação entre o genótipo vacAs1 e a presença do cag-PAI já foi descrita, (BLASER, ATHERTON, 2004). Cepas de H. pylori que têm as cag-PAI íntegra e o vacAs1m1 genótipos estão envolvidos no desenvolvimento de graves doenças gastroduodenais, como úlcera péptica (ATHERTON et al., 1997; BLASER et al.,2004). A presença da integridade da ilha cag-PAI possibilita a expressão simultânea da maquinaria do sistema de secreção do tipo IV (T4SS), com a consequente injeção de cagA, a qual, associada à presença de vacA, poderia provocar uma forte resposta inflamatória na mucosa gastroduodenal humana, resultando em dano tecidual e ulceração. A constatação de que muitas cepas com deleções de algum dos genes de cag indicaram que a cag-PAI, em algumas das cepas analisadas aqui, tinha uma estrutura em mosaico, como também relatado em outros estudos (MAEDA et al., 1999; PACHECO et al., 2008).
Os genótipos de H. pylori foram agrupados e avaliados em cada tipo de lesão gástrica diagnosticada na população estudada em relação aos agrupamentos formados, os grupos em letras maiúsculas (A, B, C) considerando os genes da ilha cag- PAI e as regiões “s” e “m” de vacA e os grupos em números romano (I, II), onde foi considerado o alelo vacAs1. As análises dos grupos A, B e C mostraram que, dentre as gastrites o grupo A1, foi o mais frequente na GCA, enquanto o grupo A4 foi mais frequente na GCI, mostrando uma relação entre a virulência da cepa e essas lesões de diferentes gravidades. A GCI é considerada uma lesão com menor potencial de evolução clínica e teve em maior frequência de cepas pertencentes ao grupo A4 que possui a ilha cag-PAI totalmente deletada, tendo apenas o gene vacAs1m1. Por outro lado, na GCA, o maior número de casos apresentoucepas do grupo A1, que possuíam a ilha cag-PAI intacta e a presença de vacAs1m1. De modo geral pode se observar uma diminuição dos casos de GCA de acordo com virulência. Essa relação entre a
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distribuição das cepas pertencentes a grupos de diferentes virulências é melhor vista no segundo agrupamento proposto, grupos I e II. Nesse agrupamento, também foi observado nesse grupamento uma maior frequência de cepas mais virulentas na gastrite crônica ativa grupo Ia (cag-PAI intacta + vacAs1) em relação a gastrite crônica inativa (GCI), se observou uma maior frequência de cepas menos virulentas Id (cag-PAI deletada + vacAs1).
Devido a mais baixa frequência dos genes de virulência nas metaplasia em relação às gastrites ativas, onde as metaplasias foram subdivididas em completas e incompletas. Essa subdivisão possibilitou a observação de que nas metaplasias o grupo A2 ocorreu somente na metaplasia incompleta, enquanto que na metaplasia completa houve maior frequência de casos infectados com cepas do grupos A3 (cag-PAI parcialmente deletada + vacAs1m1) e A4 (cag-PAI deletada + vacAs1m1). Essa associação ficou melhor caracterizada quando os casos foram agrupados apenas pelo alelo s1 de vacA, onde uma maior frequência (59%) de cepas mais virulentas, pertencentes aos grupos Ia (vacAs1+cagA+cagE+virB11) e Ib (cagA ou cagE +, virB11+ vacAs1), foi observada na metaplasia intestinal incompleta, enquanto que na metaplasia intestinal completa maior frequência de cepas menos virulentas pertencentes aos grupos Ic (apenas um dos genes da ilha + vacAs1) + Id (cag-PAI deletada + vacAs1), como ocorre com o grupo A3 e o grupo Id tem um número maior de deleções de cag.
Como já tinha se discutido anteriormente, o fato dos casos de úlcera terem ocorrido em cepas com cag deletada, nos agrupamentos foi visto que esses pertenciam a grupos considerados menos virulentos A4 e Id, o único caso de displasia pertencia ao grupo Ia, de alta virulência.
Os casos de gastrite atrófica eram dos grupos A2 e Ib, de virulência intermediária. É interessante observar que quando essas lesões foram categorizadas tendo com base apenas o alelo s1, nenhum dos casos, GA estavam nos grupos que não eram vacAs1, apontando a importância dessa variação alélica na virulência das cepas.
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6.1.6 Análises das gastrites crônicas considerando a graduação e os genótipos de H. pylori agrupados.
A proteína VacA, além de induzir a vacuolização de células eucarióticas (ATHERTON et al., 1995), imita a atividade de drogas imunossupressoras, explicando assim, a cronicidade da doença através do bloqueio da proliferação de células T (GEBERT et al., 2003) e, portanto, tem relação com a progressão das lesões para lesões mais graves.
A comparação das gastrites ativas e não ativa tem a sua importância devido ao fato de a primeira poder evoluir para uma lesão mais grave, ou tornar-se inativa. Quando estas foram analisadas considerando o genótipo das cepas, observou-se que os pacientes portadores de gastrites crônicas ativas eram infectados por cepas do grupo mais virulento, A1/Ia, independente da graduação. Por outro lado na gastrite crônica inativa leve os pacientes eram infectados por cepas menos virulentas, A4/Id, sugerindo que a associação do genótipo bacteriano como um possível marcador de prognóstico das gastrites.
6.1.7 Análise dos fragmentos do sítio oposto da lesão.
Uma vez que tem sido demonstrado que H. pylori transporta apenas uma única cópia do gene vacA, a detecção de genótipos múltiplos implica a presença de múltiplas cepas em uma amostra clínica. O risco de coinfecção ou superinfecção com múltiplas cepas podem ser maiores em países com alta prevalência de infecção por H. pylori, do que naqueles com baixa prevalência (VAN DOORN et al., 1998). Discriminação entre os isolados estreitamente relacionados do H. pylori é necessária para fins epidemiológicos e clínicos, métodos precisos de caracterização da estirpe são necessáriospara controlar infecções por H. pylori. Estudos sobre a presença de infecção mista têm sido descrito por vários autores usando várias metodologias. (OWEN et al., 1994; SUERBAUM et al. 1998; VAN DOORN et al., 1998; SARIBASAK et al., 2004). No presente estudo, foi possível avaliar se havia infecção mista em um número razoável de pacientes (151), nos quais foi possível a coleta de amostra de ambos os sítios (corpo e antro). A presença de infecção mista por H. pylori foi verificada através da detecção da bactéria e seu genótipo em ambas regiões gástricas, independente
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do local da lesão. Nas análises foi observada uma taxa de infecção mista, que nos casos com lesões em ambos os sítios apenas 21% das cepas foram coincidentes,e nos casos em que a lesão estava localizada em apenas um dos sítios, a coincidência foi de 38,8%. notou-se uma alta taxa de infecção mista (79% e 61,2 %). Frequências de 30 % e 50%, nas taxas de infecção mista foram reportadas por outros autores (TOMASINI et al., 2003; SICINSCHI et al., 2003), que utilizaram a análise de mais de um gene para avaliar a presença de infecção mista como: cag-PAI (cagA, cagE e virB11) e cagA, ES para cag-PAI e vacA. Por outro lado, Módena e colaboradores (2007) encontraram uma frequência de 18,8% de infecção mista, analisando a presença das combinações alélicas de vacA e também uma frequência maior que variou de 63,8 a 83,3%, foi encontrada quando se baseou na análise de ES para cag-PAI, para determinar a taxa de infecção mista em pacientes com úlcera péptica, frequência semelhante as encontradas neste estudo. No entanto o estudo
demonstrou que não houve correlação entre a coexistência de tipos de H. Pylori cag-PAI positivos e cag- PAI negativos com doenças gástricas. (MÓDENA et al., 2007). Van Doorn e colaboradores (1998) encontraram a presença de infecção mista numa frequência menor (20,2%), entretanto, esse estudo analisou a presença das combinações alélicas do gene vacA sozinho para determinar a presença de infecção mista. Assim, quando frequências menores de infecção mista são encontradas em outros estudos, quando comparadas com as desse estudo, acredita-se que isso se deva a um menor número de genes analisados neste estudo e a alta taxa de infecção da população estudada.
Um dado interessante é que nos casos em que a lesão era em apenas um dos sítios verificou-se que uma fração significativa dos casos foi infectada com cepas pertencentes a grupos de menor virulência no sítio oposto ao da lesão, o que indica a importância dos genes estudados como fatores de virulência no desenvolvimento da lesão. Cellini e colaboradores (1996) relataram a presença de cepas diferentes infectando o corpo e o antro em um mesmo paciente, entretanto, não citama frequência. Estudos de resistência bacteriana com H. pylori revelaram altas taxas de infecção mista (WONG et al., 2001; CELLINI et al., 2006).
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7 Conclusão
• Na população do Ceará a infecção por H. pylori, foi observada em alta frequência em todas as lesões;
• As lesões gástricas foram predominantemente localizadas no antro;
• A gastrite crônica foi uma lesão característica de pacientes mais jovens, enquanto que a metaplasia intestinal está associada com o aumento da idade dos pacientes estudados;
• Os genes vacAs1m1, cagA, cagE e virB11 de H. pylori são potencialmente bons marcadores de valor prognóstico, para manutenção da gastrite ativa e/ou progressão para lesões mais graves;
• O desenvolvimento de lesão gástrica mais grave foi associado à infecção por cepas com genótipos mais virulentos, considerando os genes estudados;
• O alelo vacAs1 mostrou-se marcador mais acurado para a determinação da virulência e associação com gravidade da lesão que a combinação vacAs1m1;
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76
8 Referências Bibliográficas
ALVES, M. K.; LIMA, V. P.; FERRASI, A. C.; RODRIGUES, M. A.; DE MOURA CAMPOS PARDINI, M. I.; RABENHORST, S. H. CDKN2A promoter methylation is related to the tumor location and histological subtype and associated with Helicobacter pylori flaA(+) strains in gastric adenocarcinomas. APMIS. v.4, n. 118, p.297-307, 2010. AMIEVA, M. R.; EL-OMAR, E. M. Host-bacterial interactions in Helicobacter pylori infection. Gastroenterol. v.1, n. 134, p. 306-323, 2008.
ARRUDA,S. M. B.; FORONES, N. M.; JUCÁ, N. T.; BARROS, K. S. C. Could gastric histology be a useful marker for making decision on Helicobacter pylori eradication therapy in patients with dyspepsia? Arq Gastroenterol. v. 46, n.3, p. 209-13, 2009. ASAHI, M.; AZUMA, T.; ITO, S.; ITO, Y.; SUTO, H.; NAGAI, Y.; TSUBOKAWA, M.; TOHYAMA, Y.; MAEDA, S.; OMATA, M.; SUZUKI, T.; SASAKAWA, C. Helicobacter pylori CagA protein can be tyrosine phosphorylated in gastric epithelial cells. J Exp Med. v. 4, n. 191, p. 593-602, 2000.
ATHERTON, J. C.; CAO, P.; PEEK, R. M.; TUMMURU, M. K.; BLASER, M. J.; COVER, T. L. Mosaicism in vacuolating cytotoxin alleles of Helicobacter pylori. Association of specific vacA types with cytotoxin production and peptic ulceration. J Biol Chem. v. 30, n. 270, p. 17771-17777, 1995.
ATHERTON, J. C.; BLASER, M. J. Coadaptation of Helicobacter pylori and humans: ancient history, modern implications. J. Clin. Invest. n. 199, p. 2475–2487, 2009. AUDIBERT, C.; BURUCOA, C.; JANVIER, B.; FAUCHERE, J. L. Implication of the structure of the Helicobacter pylori cag pathogenicity island in induction of interleukin- 8 secretion. Infect Immun. v. 3, n. 69, p.1625-1629, 2001.
AZUMA, T.; YAMAKAWA, A.; YAMAZAKI, S.; OHTANI, M.; ITO, Y.; MURAMATSU, A.; SUTO, H.; YAMAZAKI, Y.; KEIDA, Y.; HIGASHI, H.; HATEKAYAMA, M. Distinct diversity of the cag Pathogenicity Island among Helicobacter pylori Strains in Japan. J Clin Microbiol. v. 6, n. 42, p. 2508-2517, 2004. BACKERT S, ZISKA E, BRINKMANN V, ZIMNY-ARNDT U, FAUCONNIER A, JUNGBLUT PR, NAUMANN M, MEYER TF. Translocation of the Helicobacter pylori CagA protein in gastric epithelial cells by a type IV secretion apparatus. Cell Microbiol. v. 2, n. 2, p. 155-64, 2000.
BARBOSA, H. P. M.; MARTINS, L. C.; SANTOS, S. E. B.; DEMACHKI, S.; ASSUMPÇÃO,M. B.; ARAGÃO, C. D.; CORVELO, T. C. O. Interleukin-1 and TNF-
!
77
polymorphisms and Helicobacter pylori in a Brazilian Amazon population. World J Gastroenterol. v. 15, n. 12, p. 1465-71, 2009.
BARTCHEWSKY, W. JR.; MARTINI, M. R.; SQUASSONI, A. C.; ALVAREZ, M. C.; LADEIRA, M. S. P.; SALVATORE, D. M. F.; TREVISAN, M. A.; PEDRAZZOLI, J JR; RIBEIRO, M. L. Effects of Helicobacter pylori Infection on the Expressions of Bax and Bcl-2 in Patients with Chronic Gastritis and Gastric Cancer. Dig Dis Sci, n. 55, p. 111–116, 2010.
BLASER, M. J.; BERG, D. E. Helicobacter pylori genetic diversity and risk of human disease. J. Clin. Invest. v.7, n. 107, p. 767-773, 2001.
BLASER, M. J.; ATHERTON, J. C. Helicobacter pylori persistence: biology and disease. J Clin Invest. n. 113, p. 321–333, 2004.
CABRAL, M. M. D. A.; MENDES,C. M. C.; CASTRO, L. P. F.; CARTELLE, C. T.; GUERRA, J.; QUEIROZ, D. M. M.; Nogueira, A. M. M. F. Apoptosis in Helicobacter pylori Gastritis is Related to cagA Status. Helicobacter, n. 11, p. 469–476, 2006.
CARNEIRO, F.; DAVID, L.; SERUCA, R.; CASTEDO, S.; NESLAND, J. M.; SOBRINHO-SIMÕES, M. Hyperplastic polyposis and diffuse carcinoma of the stomach. A study of a family. Cancer. v. 2, n. 72, p. 323–329, 1993.
CARTÁGENES, V. D.; MARTINS, L. C.; CARNEIRO, L. M.; BARILE, K. A. S.; CORVELO, T. C. Helicobacter pylori em crianças e associação de cepas cagA na transmissão mãe-filho na Amazônia brasileira. Rev. Soc. Bras. Med. Tropic. n. 42, p. 298-302, 2009.
CAVA, F.; COBAS, G. Dos décadas de Helicobacter pylori. VacciMonitor. v. 12, n. 1, p. 1-10 ,2003.
CELLINI L, ALLOCATI N, CAMPLI ED, MASULLI M, DIBARTOLOMEO S, DAINELLI B. Helicobacter pylori isolated from stomach corpus and antrum: comparison of DNA patterns. J Infect. v. 3, n. 32, p. 219-21, 1996.
CELLINI, L.; GRANDE, R.; DI CAMPLI, E.; DI BARTOLOMEO, S.; CAPODICASA, S.; MARZIO, L. Analysis of genetic variability, antimicrobial susceptibility and virulence markers in Helicobacter pylori identified in Central Italy. Scand J Gastroenterol n. 41 p. 280–287, 2006.
CENSINI, S.; LANGE, C.; XIANG, Z.; et al. Cag, a pathogenicity island of Helicobacter pylori, encodes type I-specific and disease associated virulence factors. Proc Natl Acad Sci USA.v.25, n. 93, p. 14648–53, 1996.
!
78
CEREZO,S. G.; PONCE, M. C.; GUTIÉRREZ, G. R. A. Diagnóstico microbiológico, serológico, genotipificación de Helicobacter pylori aislado de biopsias de niños y adultos. Detección molecular de la isla de patogenicidad cag de Helicobacter pylori. Rev Latino Am Microbiol. n. 48, p. 99-104, 2006.
CESAR, A. C. G.; SILVA, A. E.; TAJARA, E. H. Fatores genéticos e ambientais envolvidos na carcinogênese gástrica, Arq Gastroenterol v. 39, n.4, 2002.
CHAN, F. K. L.; TO, K. F.; WU, J. C. Y.; YUNG, M. Y.; LEUNG, W. K.; KWOK, T.; HUI, Y.; CHAN, H. L. Y.; CHAN, C. S. Y.; HUI, E.; WOO, J.; SUNG, J. J. Y. Eradication of Helicobacter pylori and risk of peptic ulcers in patients starting long- term treatment with non-steroidal anti-inflammatory drugs: a randomised trial. Lancet. n. 359, p. 9-13, 2002.
CHEN, A.; LI, C. N.; HSU, I.; LAI, K. H.; TSENG, H. H.; HSU, P. N.; LO, G. H. LO, C.C.; LIN, C. K.; HWANG, I. R.; YAMAOKA, Y.; CHEN, H. C. Risks of interleukin-1 genetic polymorphisms and Helicobacter pylori infection in the development of gastric cancer. Aliment Pharmacol Ther. n. 20, p. 203-211, 2004.
CHIURILLO, M. A.; MORAN, Y. H.; CAÑAS, M.; VALDERRAMA, E. J.; ARMANIE, E. Infection with specific Helicobacter pylori- cag pathogenicity island strains is associated with interleukin-1B gene polymorphisms in Venezuelan chronic gastritis patients. Dig Dis Sci. v. 2, n. 56, p. 449-56, 2011.
CHRISTIE, P. J.; ATMAKURI, K.; KRISHNAMOORTHY, V.; JAKUBOWSKI, S.; CASCALES, E. Biogenesis, Architecture and Function of Bacterial Type IV Secretion Systems. Annu. Rev. Microbiol. n. 59, p. 451-485, 2005.
CHRISTIE, P. J.; CASCALES, E. The versatile bacterial type IV secretion systems. Nat Rev Microbiol. n. 1, p. 137-148, 2003.
CHUANG, C. H.; YANG, H. B.; SHEU, S. M.; HUNG, K. H.; WU, J. J.; CHENG, H. C.; CHANG, W. L.; SHEU, B. S. Helicobacter pylori with stronger intensity of cagA phosphorylation lead to an increased risk of gastric intestinal metaplasia and cancer. BMC Microbiol. v. 11, n. 121, p. 1-7, 2011
COELHO, L. G. V.; ZATERKA, S. II Consenso Brasileiro sobre Helicobacter pylori. Arq Gastroenterol. v. 2 n. 42, p. 128-132, 2005.
CORREA, P. Human gastric carcinogenesis: a multistep and multifactoriaI process - First American Society Award Lecture on Cancer Epidemiology and Prevention. Cancer Res. n. 52, p. 6735-6740, 1992.
!
79
COVACCI, A.; RAPPUOLI, R. Tyrosine-phosphorylated bacterial proteins: Trojan horses for the host cell. J. Exp. Med. n. 191, p. 587-592, 2000.
COVACCI, A.; RAPPUOLI, R. Helicobacter pylori: after the genomes, back to biology. J Exp Med. v. 7, n. 197, p. 807-811, 2003.
COVER TL, BLANKE SR. Helicobacter pylori VacA, a paradigm for toxin multifunctionality. Nat Rev Microbiol. v. 4, n. 3, p.320-32, 2005.
DABIRI, H.; MALEKNEJAD, P.; YAMAOKA, Y.; FEIZABADI, M. M.; JAFARI, F.; REZADEHBASHI, M.; NAKHJAVANI, F. A.; MIRSALEHIAN, A.; ZALI, M. R. Distribution of Helicobacter pylori cagA, cagE, oipA and vacA in different major ethnic groups in Tehran, Iran. J Gastroenterol Hepatol. v. 8, n. 24, p. 1380-6, 2009. DAY, A. S.; JONES, N. L.; LYNETT, J. T.; JENNINGS, H. A.; FALLONE, C. A.; BEECH, R.; SHERMAN, P. M. cagE is a Virulence Factor Associated with Helicobacter pylori – Indeced Duodenal Ulceration in Children. J infect Dis. n. 181, p. 1370-1375, 2000.
DE FRANCESCO, V.; MARGIOTTA, M.; ZULLO, A.; HASSAN, C.; GIORGIO, F.; ZOTTI, M.; STOPPINO, G.; BASTIANELLI, A.; DITERLIZZI, F.; VERDEROSA, G.; MORINI, S.; PANELLA, C.; IERARDI, E. Helicobacter pylori vacA Arrangement and Related Diseases: A retrospective Study Over a Period of 15 years. Dig Dis Sci. v. 1, n. 54, p. 97-102, 2009.
DELANEY, B.; MOAYYEDI, P.; FORMAN, D. Helicobacter pylori infection. Clin Evid. n. 7, p. 414-428, 2002.
DÍAZ M, I.; VALDIVIA, A.; MARTÍNEZ, P.; PALACIOS, J. L.; HARRIS, P.; NOVALES, J.; GARRIDO, E.; VALDERRAMA, D.; SHILLING, C.; KIRBERG, A.; HEBEL, E.; FIERRO, J.; BRAVO, R.; SIEGEL, F.; LEON, G.; KLAPP, G.; VENEGAS, A. Helicobacter pylori vacA s1a and s1b alleles from clinical isolates from different regions of Chile show a distinct geographic distribuition. World J Gastroenterol. v.11, n. 40, p. 6366-6372, 2005.
DIXON, M. F.; PATH, F.R.C.; GENTA, R. M.; YARDLEY, J. H.; CORREA, P. Classification and grading of gastritis. The updated Sydney System. International Workshop on the Histopathology of Gastritis, Houston; 1994. Am J Surg Pathol. v. 10, n. 20, p. 1161-1181, 1996.
DOMINIQUE, V.; MICHETTI, P.; Immunology of Helicobacter pylori infection – review. Digestion. n. 73, p. 116-123, 2006.
!
80
DOMINGO, D.; ALARCON, T.; PIETRO, N.; SANCHEZ, I.; LOPEZ-BREA, M. cagA and vacA status of Spanish Helicobacter pylori clinical isolates. J Clin Microbiol. v. 6, n. 37, p. 2113-2114, 1999.
DO CARMO AP, RABENHORST SH. Importance of vacAs1 gene in gastric cancer patients infected with cagA-negative Helicobacter pylori. APMIS. v. 7, n. 119, p. 485- 6, 2011
DUNN B. E.; COHEN H.; BLASER M.J. Helicobacter pylori. Clin. Microbiol. Rev. v.10, n.4, p. 720-741, 1997.
EL-OMAR, E. M.; PENMAN, I. D.; ARDILL, J. E. CHITTAJALLU RS, HOWIE C, MCCOLL KE. Helicobacter pylori infection and abnormalities of acid secretion in patients with duodenal ulcer disease. Gastroenterol. v. 3, n. 109, p. 681–691, 1995.
EL-ZIMAITY, H. M. T. Gastric atrophy, diagnosing and staging. World J Gastroenterol. v. 36, n. 12, p. 5757-5762, 2006.
ERZIN, Y.; KOKSAL, V.; ALTUN, S.; DOBRUCALI, A.; ASLAN, M.;. ERDAMAR, S.; DIRICAN, A.; KOCAZEYBEK, B. Prevalence of Helicobacter pylori vacA, cagA,
cagE, iceA e babA2 , Genotypes and Correlation with Clinical Outcome in Turkish
Patients with Dyspepsia. Helicobact. n. 1, p. 574–580, 2006.
ESLICK, G. D.; LIM, L. L. Y.; BYLES, J. E.; XIA, H. H. X.; TALLEY, N. J. Association of Helicobacter pylori infection with gastric carcinoma: a meta-analysis. Am. J. Gastroenterol.; n.94, p. 2373–2379, 1999.
FRANCISCO-JÚNIOR, A.; PAYÃO, S. L. M.; QUEIROZ, V. F.; ELLINGER, F.; SILVA, L. C.; THEREZO, A. L. S.; GATTI, L.; BARBIERI, D.; PERES, C. A. Detecção gástrica de Helicobacter pylori em pacientes pediátricos sintomáticos através da reação em cadeia de polimerase (PCR), teste de uréase e exame histológico. Pediat. n. 26, p. 34-42, 2004.
FILIPE, M. I.; MUÑOZ N.; MATKO I.; KATO I.; POMPE-KIRN V.; JUTERSEK A.; TEUCHMANN S.; BENZ M.; PRIJON T. Intestinal metaplasia types and risk of gastric cancer: a cohort study in Slovenia. International Journal of Cancer, v. 3, n. 57, p. 324- 329, 1994.
FISCHBACH, W.; MALFERTHEINER, P.; HOFFMANN, J. C.; BOLTEN, W.; KIST M.; KOLETZKO, S. Helicobacter pylori and Gastroduodenal Ulcer Disease. Dtsch Arztebl Int. v. 49, n. 106, p. 801–808, 2009.
!
81
FOSTER G.D; TWEEL D. Plant Gene Isolation. Principles and Pratics. Edited by Gary D. Foster & David Twell. John Wiley & Sons Ltd., England, p 426, 1996.
GATTI, L. L.; MÓDENA, J. L. P.; PAYÃO, S. L. M.; SMITH, M. A. C.; FUKUHARA, Y.; MÓDENA, J. L. P.; OLIVEIRA, R. B.; BROCCHI, M. Prevalence of Helicobacter pylori cagA, iceA and babA2 alleles in Brazilian patients with upper gastrointestinal diseases. Acta Trop. v. 3 n. 100, p. 232-40, 2006.
GEBERT, B.; FISCHER, W.; WEISS, E.; HOFFMANN, R.; HAAS, R. Helicobacter pylori vacuolating cytotoxin inhibits T lymphocyte activation. Science. n. 301, p. 1099– 102, 2003.
GISBERT, J. P.; CALVET, X.; GOMOLLÓN, F.; SAINZ, R. Conferencia de consenso. Tratamiento erradicador de Helicobacter pylori. Recomendaciones de la Conferencia Espanola de Consenso. Med Clin. n. 114, p. 185-195, 2000.
GIUDICEG, D.; MICHETTI, P. Inflammation, immunity and vaccine for Helicobacter pylori. Helicob. n. 1, p. 21-26, 2006.
GOLDSTEIN, N. S. Chronic Inactive Gastritis and Coccoid Helicobacter pylori in Patients Treated for Gastroesophageal Reflux Disease or With H. pylori Eradication Therapy.Am J Clin Pathol. n. 118, p. 719-726, 2002.
GOODWIN, C. S.; ARMSTRONG, J. A.; CHILVERS, T.; PETERS, M.; COLLINS, M. D.; SLY, L.; McCONNELL, W.; HARPER, W. Transfer of Campylobacter pylori and Campylobacter mustelae to Helicobacter gen. nov. as Helicobacter pylori comb. nov. and Helicobacter mustelae comb. nov., respectively. Internat. J. Syst. Bacteriol. n. 39, p. 397–405, 1989.
GÖTTKE, M. U.; FALLONE, C.A.; BARKUN, A.N.; VOGT, K.; LOO, V.; TRAUTMANN, M.; TONG, J.Z.; NGUYEN, T. N.; FAINSILBER, T.; HAHN, H.H.; KÖRBER, J.; LOWE, A.; BEECH, R. N. Genetic variability determinants of Helicobacter pylori: influence of clinical background and geographic origin of isolates. J Infect Dis. v. 5, n. 181, p. 1674-1681, 2000.
GUTIÉRREZ-GONZÁLEZ, L.; WRIGHT, N. A. Biology of intestinal metaplasia in 2008: more than a simple phenotypic alteration. Dig Liver Dis. v. 40, p. 510-522, 2008. HACKER J, BLUM-OEHLER G, MÜHLDORFER I, TSCHÄPE H. Pathogenicity islands of virulent bacteria: structure, function and impact on microbial evolution. Mol Microbiol. v. 6, n. 23, p. 1089-97, 1997.
!
82
HANSSON, L. E.; NYRÉN O.; HSING A.W.; BERGSTRÖM R.; JOSEFSSON S.; CHOW W.H.; FRAUMENI J.F. JR; ADAMI H.O. The risk of stomach cancer in patients with gastric or duodenal ulcer disease. N Engl J Med. v.4, n. 335, p. 242-249, 1996.
HARTGRINK, H. H.; JANSEN, E. P. M.; VAN GRIEKEN, N. C. T.; VAN DE VELDE, C. J. H. Gastric cancer. Lancet. n. 374, p. 477–490, 2009.
HAZIRI, A.; JUNIKU-SHKOLOLLI, A.; GASHI, Z.; BERISHA, D.; HAZIRI, A. Helicobacter pylori infection and precancerous lesions of the stomach. Med Arh. v. 4, n. 64, p. 248-9, 2010.
HE, Q.; WANG, J.P.; OSATO, M.; LACHMAN, L. B. Real-Time Quantitative PCR for detection of Helicobacter pylori. J. Clin. Microbiol. n. 40, p. 3720-3728, 2002.
HIGASHI, H.; TSUTSUMI, R.; FUJITA, A.; YAMAZAKI, S.; ASAKA, M.; AZUMA, T.; HATAKEYAMA, M. Biological activity of the Helicobacter pylori virulence factor cagA is determined by variation in the tyrosine phosphorylation sites. Proc Natl Acad Sci. v. 22, n. 99, p. 14428-33, 2002.
HISHIDA, A.; MATSUO, K.; GOTO, Y.; NAITO, M.; WAKAI, K.; TAJIMA, K.; HAMAJIMA, N. Combined effect of miR-146a rs2910164 G/C polymorphism and Toll-like receptor 4 +3725 G/C polymorphism on the risk of severe gastric atrophy in Japanese. Dig Dis Sci. v. 4, n. 56, p. 1131-7, 2010.
HIZAWA, K.; FUCHIGAMI, T.; IIDA, M.; AOYAGI, K.; IWASHITA, A.; DAIMARU, Y.; FUJISHIMA, M. Possible neoplastic transformation within gastric hyperplastic polyp. Application of endoscopic polypectomy. Surg Endosc. v. 6, n. 9, p. 714–718, 1995.
HOMAN, M.; LUZAR, B.; KOCJAN, B. J.; OREL, R.; MOCILNIK, T.; SHRESTHA, M.; KVEDER, M.; POLJAK, M. Prevalence and Clinical Relevance of cagA, vacA and iceA Genotypes of Helicobacter pylori Isolated From Slovenian Children. J Pediatr Gastroenterol Nutr. n. 49, p. 289-296, 2009.
IARC: HAMILTON S.R., AALTONEN L.A. (Eds.): World Health Organization Classification of Tumours. Pathology and Genetics of Tumours of the Digestive System. Press: Lyon 2000.
IKENOUE, T.; MAEDA, S.; OGURA, K.; AKANUMA, M.; MITSUNO, Y.; IMAI, Y.; YOSHIDA, H.; SHIRATORI, Y.; OMATA, M. Determination of Helicobacter pylori virulence by simple gene analysis of the cag pathogenicity island. Clin Diagn Lab Immunol. v. 1, n. 8, p. 181-186, 2001.
!
83
JASS JR, FILIPE MI. Sulphomucins and precancerous lesions of the human stomach. Histopathology. v. 3, n.4, p. 271-9, 1980.
KAGUE, E. ; CRISTIANE, M.; PARDINI, M. I. C. M.; CARVALHO, F.; LEITE, C. V.; PINHEIRO, N. A. Methylation status of CDH1 gene in samples of gastric mucous from brazilian patients with chronic gastritis infected by Helicobacter pylori. Arq Gastroenterol. v. 1, n. 47, p. 7-12, 2010.
KAUSER, F.; KHAN, A. A.; HUSSAIN, M. A.; CARROLL, I. M.; AHMAD, N.; TIWARI, S.; SHOUCHE, Y.; DAS, B.; ALAM, M.; ALI, S. M.; HABIBULLAH, C. M.; SIERRA, R.; MEGRAUD, F.; SECHI, L. A.; AHMED, N. The cag pathogenicity island of Helicobacter pylori is disrupted in the majority of patient isolates from different human populations. J Clin Microbiol. n. 42, p. 5302–5308, 2004.
KHALIFA, M.; SHARAF, R.; AZIZ, R. Helicobacter pylori: a poor man’s gut pathogen? Gut Pathogens. n. 2, p. 1-12, 2010.
KERSULYTE, D.; VELAPATINO, B.; MUKHOPADHYAY, A. K.; CAHUAYME, L.; BUSSALLEU, A.; COMBE, J.; GILMAN, R. H.; BERG, D. E.; Cluster of Type IV Secretion Genes in Helicobacter pylori’s Plasticity Zone. J Bacteriol. n.13, p. 3764– 3772, 2003.
KOSTRZYNSKA, M.; BETTS, J. D.; AUSTIN, J. W.; TRUST, T. J. Identification, characterization, and spatial localization of two flagellin species in Helicobacter pylori flagella. J. Bacteriol. n. 173, p. 937–946, 1991.
KONTUREK, J. W. Discovery by jaworski of Helicobacter pylori and its pathogenetic role in peptic ulcer, gastritis and gastric cancer
,
J Physiol Pharmacol. 54, suppl 3: 23- 41, 2003.KONEMAN, Diagnóstico microbiológico: texto e atlas colorido/ Winn Jr., W. AllenS., Janda W., Koneman E., Procop G., Schreckenberger P., Woods G. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008.
KRAUSE, S.; PANSEGRAU, W.; LURZ, R.; DE LA CRUZ, F.; LANKA, E. Enzymology of type IV macromolecule secretion systems: the conjugative transfer regions of plasmids RP4 and R388 and the cag pathogenicity island of Helicobacter