O método foi aplicado para 10 amostras de espinafre cultivadas no estado do Rio Grande do Sul (Brasil) e adquiridas em mercados locais de Santa Maria.
De acordo com a Tabela 10, todas as amostras analisadas apresentaram resíduos de um ou mais analitos na faixa de concentração entre 10,2 a 39,0 μg kg-1. Os compostos teflutrina, clorotalonil, procimidona, iprodiona e boscalida foram encontrados nas amostras em níveis acima do LOQ. Dentre estes, verificou-se que o composto teflutrina foi encontrado em todas as amostras.
Os compostos teflutrina, iprodiona e boscalida estavam presentes nas amostras em concentrações abaixo dos LMRs estabelecidos, de 20 μg kg-1 para iprodiona, 50 μg kg-1 para teflutrina e 50.000 μg kg-1 para boscalida. No entanto, o inseticida teflutrina estava presente em 90% das amostras analisadas. Por outro lado, as concentrações encontradas de clorotalonil e procimidona em algumas amostras analisadas estavam acima do LMR estabelecido de 10 μg kg-1.
Alguns compostos abordados neste estudo tiveram seu uso banido ou estão sob observação devido apresentarem riscos potencialmente graves e/ou cumulativos para a saúde humana e/ou o meio ambiente, sendo em sua maioria compostos organoclorados ou organofluorados (UTZ, 2015). Estes compostos são classificados como persistentes podendo estar presentes no ambiente de produção dos alimentos. Entre estes, os compostos HCH alfa, HCH beta, HCH gama, quintozeno e teflutrina já foram banidos. Por outro lado, os compostos clorotalonil e procimidona estão em avaliação e possuem uso controlado. Mesmo assim, estes compostos foram encontrados nas amostras avaliadas neste estudo.
No Brasil, não existem LMRs estabelecidos pela ANVISA para os compostos avaliados neste trabalho para a cultura de espinafre. Entretanto, a ocorrência de diversos compostos em praticamente todas as amostras avaliadas sugere a necessidade de regulamentação. Não menos importante é a necessidade do monitoramento dos produtos comercializados. Além disso, se faz necessária uma avaliação adicional empregando metodologia analítica complementar para fins de identificação das amostras positivas.
Tabela 10 - Resultados das análises das amostras de espinafre empregando o método desenvolvido e validado neste trabalho. Analitos LOD (µg kg-1) LOQ (µg kg-1) LMRa (µg kg-1)
Concentração nas amostras (µg kg-1)
A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10
Teflutrina 3 10 50 13,9 39,0 13,3 <LOQ 36,4 21,7 20,5 15,4 20,2 11,2 Clorotalonil 3 10 10 11,6 36,7 17,8 <LOQ 33,4 n.d. n.d. n.d. n.d. <LOQ
Procimidona 3 10 10 14,3 20,3 13,8 10,5 28,1 n.d. n.d. n.d. n.d. n.d.
Iprodiona 3 10 20 10,0 <LOQ 12,7 n.d. n.d. <LOQ n.d. n.d. <LOQ n.d. Boscalida 3 10 50.000 n.d. <LOQ 15,2 <LOQ <LOQ <LOQ <LOQ <LOQ <LOQ <LOQ
aLimites máximos de resíduos definidos para a cultura de espinafre pela União Européia.
5 CONCLUSÕES
O presente trabalho demonstrou o uso de diferentes sorventes na etapa de limpeza do método QuEChERS para a remoção de pigmentos, especialmente a clorofila, presentes em extratos de amostras de espinafre. O sorvente aminopropil e o sorvente à base sílica e C18 revestidos com dióxido de zircônio, conhecido como Z- Sep+, juntamente com o sal sulfato de sódio anidro, apresentaram excelente eficiência na limpeza dos extratos, com redução satisfatória dos teores de pigmentos sem perdas significativas de analitos, tendo em vista que a obtenção de extratos limpos é fundamental para o alcance de resultados confiáveis e para a preservação do sistema cromatográfico.
Para isto, foram realizados diversos testes com diferentes proporções e combinações de sorventes empregando metodologias distintas para o preparo das amostras e avaliação dos extratos através de técnicas auxiliares, como testes gravimétricos, cromatografia em camada delgada e análise qualitativa por HPLC- UV/Vis, para fins de otimização do método desenvolvido e posterior validação do mesmo empregando GC-ECD para a determinação dos agrotóxicos selecionados. As técnicas complementares utilizadas se mostraram adequadas para o monitoramento de testes no desenvolvimento de novas metodologias analíticas.
O método QuEChERS acetato associado à limpeza do extrato por SPE demonstrou ser eficiente para a extração e determinação de resíduos de 33 agrotóxicos em amostras de espinafre por GC-ECD. Os resultados de recuperação obtidos foram satisfatórios, na faixa entre 70 a 120% para 33 dos 39 agrotóxicos avaliados, com valores de RSD ≤20%. O método apresentou valores de LODm de 3,0 µg kg-1 e LOQ
m de 10,0 µg kg-1 para a maioria dos compostos analisados, exceto para clorpirifós etílico, HCH delta, pendimetalina, heptacloro, mirex e oxifluorfen que apresentaram LODm de 7,5 µg kg-1 e LOQm de 25,0 µg kg-1.
As soluções analíticas, utilizadas para a construção das curvas de calibração e consequente obtenção dos resultados de precisão e exatidão, foram preparadas no extrato da matriz, devido ao método ter evidenciado efeito matriz significativo, com a finalidade de descontar as interferências provenientes da matriz e, assim, evitar falsos resultados.
O método validado foi aplicado para a determinação de resíduos dos 33 agrotóxicos estudados em 10 amostras de espinafre adquiridas no comércio local, dos quais 6 agrotóxicos foram detectados, estando 3 deles acima dos limites estabelecidos pela legislação disponível para a cultura, sendo que 8 amostras apresentaram resíduos acima dos limites máximos permitidos de um ou mais dos compostos estudados.
O método QuEChERS modificado otimizado neste trabalho apresenta como vantagens em relação aos métodos tradicionais de extração, ser um procedimento simples e rápido, com um menor número de etapas analíticas, o que diminui a probabilidade de erros e perdas, além de ser relativamente barato e ambientalmente correto, devido ao baixo consumo de solventes orgânicos.
Portanto, conclui-se que o método desenvolvido é adequado à análise de resíduos de agrotóxicos em espinafre, podendo ser estendido para outras culturas semelhantes de hortaliças e utilizado em análises de rotina de laboratórios, visto que, todos os parâmetros de validação encontraram-se dentro dos limites exigidos para validação de métodos cromatográficos, atendendo satisfatoriamente os objetivos traçados para este trabalho.
DESTINO DOS RESÍDUOS GERADOS
As atividades laboratoriais geram resíduos sólidos e líquidos provenientes dos ensaios, os quais devem ser adequadamente tratados ou descartados, visto que podem representar riscos à saúde pública e ao meio ambiente.
Sendo assim, os resíduos sólidos gerados durante o desenvolvimento deste trabalho foram armazenados em sacos plásticos devidamente identificados e os resíduos líquidos foram recolhidos separadamente em frascos rotulados como resíduos halogenados e resíduos não-halogenados. Após, todos os resíduos foram encaminhados ao almoxarifado do Departamento de Química (DQ) da UFSM, setor responsável em destinar os resíduos gerados para uma empresa terceirizada, especializada na área para posterior tratamento e descarte.
SUGESTÕES PARA TRABALHOS FUTUROS
- Ampliar o escopo de compostos a serem analisados;
- Ampliar o estudo de sorventes pouco explorados para a limpeza de extratos;
- Avaliar o uso de diferentes quantidades de sorventes, objetivando a obtenção de extratos limpos, melhores recuperações de compostos e a minimização dos custos; - Comparar o método proposto com técnicas miniaturizadas de preparo de amostras; - Desenvolver método cromatográfico empregando a técnica de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em série (GC-MS/MS) para fins de confirmação dos compostos avaliados;
- Desenvolver método cromatográfico empregando a técnica de cromatografia líquida (LC) para a determinação de resíduos de agrotóxicos em hortaliças não passíveis de análise por GC;
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