As pesquisas sobre os fatores prognósticos da leucemia aguda são relevantes e inovadoras visto que com os avanços nas tecnologias diagnósticas, novos marcadores têm surgido, destacando os avanços no campo da imunologia e da biologia celular e molecular.
Neste cenário, destaca-se a investigação dos fenótipos de resistência a fármacos nas leucemias agudas, por meio da citometria de fluxo, sendo um método que vem sendo explorado em nossa região para análises diversas, principalmente na área da pesquisa. No Hemocentro Dalton Cunha temos explorado a citometria de fluxo para diagnóstico e acompanhamento dos pacientes com leucemias. Nesta tese, em particular, cujo estudo foi realizado em Natal/Rio Grande do Norte investigamos a freqüência e importância clínica da expressão dos biomarcadores PgP e MRP1 em um grupo de pacientes locais com diagnóstico de LMA, o que proporcionou a criação de um grupo para estudos das leucemias e doenças correlacionadas, compreendendo uma equipe multidisciplinar com experiência em hematologia clínica, oncologia clínica, farmácia, imunologia, biologia celular e molecular. A idéia da interação estreita entre os grupos envolvidos foi implantar o uso de novos marcadores para diagnóstico das leucemias agudas, visando eficiência e rapidez no diagnóstico e maior especificidade no tratamento.
Abordamos a citometria de fluxo como metodologia de escolha, pois embora tenha alto custo e seja necessário profissionais especializados para realização da técnica, tal metodologia permite uma análise rápida, eficiente e quantitativa das células em suspensão, o que vem tornando o diagnóstico das leucemias mais preciso e seguro. Através da mesma é possível diferenciar, nas leucemias agudas, casos de LLA e LMA, identificar os subtipos de LMA e a leucemia aguda bifenotípica, além de distinguir linfocitoses reacionais das malignas.
Ao ponto abordado acima faz-se uma critica ao poder público que se beneficia de um serviço que atualmente utiliza um equipamento como o citômetro, mas não possui cursos de capacitação para profissionais se qualificarem, desta forma se tornando limitado o número de farmacêuticos que sabem, de fato, aplicar e interpretar o método.
A compilação dos resultados das análises laboratoriais em associação com os dados clínicos trouxeram um maior entendimento sobre a sensibilidade e resistência das leucemias o que permitiu estratificar os pacientes quanto à possibilidade de resposta aos quimioterápicos, podendo, dessa forma, pautar decisões clínicas importantes e sugerir mudanças nos protocolos de tratamento já utilizados.
Analisando alguns estudos já publicados, onde os autores investigaram a expressão de proteínas de resistência como MRP, LRP e PgP, foi possível observar que nosso trabalho foi realizado com um “n” (346 sujeitos) superior aos demais (variando de 44 a 104 sujeitos de pesquisa) e conseguimos trazer mais informações sobre a dupla expressão positiva dos marcadores PgP e MRP, a qual está relacionada a doença refratária, idade avançada, expressão aberrante de antígeno linfoide T e aumento da taxa de recaída da doença.
Com os achados desta tese conseguimos trazer mais evidência para os clínicos de que a informação do fenótipo de resistência ao tratamento através da positividade de proteínas do fenótipo MDR nas células leucêmicas aperfeiçoa a conduta clínica, uma vez que a decisão terapêutica é guiada por tais resultados, tendo como desfecho a possibilidade de uma melhor resposta do paciente a quimioterapia.
Com base no que já discutimos recomendamos a adição de marcadores anti-PgP e MRP1, bem como outras proteínas relacionadas ao fenótipo MDR, como BCRP e LRP no painel para o diagnóstico de leucemias agudas, uma vez que esses biomarcadores são úteis como indicadores de um fator prognóstico independente dessas leucemias e também como indicadores preditivos importantes de acompanhamento terapêutico para pacientes com LMA.
Ademais, as novas informações geradas pela integração entre os grupos de pesquisadores permitiram estabelecer vias de comunicação entre a pesquisa básica e a pesquisa clínica podendo proporcionar a formação de pesquisadores e profissionais da área de saúde dentro desse novo paradigma que é a pesquisa clínica aplicada.
Este estudo proporcionou a oportunidade em ampliar meus conhecimentos, principalmente pela interdisciplinaridade ao longo das disciplinas cursadas como estatística, metodologia da pesquisa científica, metodologia do ensino superior, redação de trabalho científico, bioética e ciclos
de debates especiais em saúde, onde foi possível discutir questões de cunho científico e também humanas, o que permitiu um aprimoramento como pesquisador, e, acima de tudo,o respeito aos valores humanos, éticos e morais, o que foi muito importante para meu crescimento pessoal, intelectual e científico.
O conhecimento adquirido, neste doutorado, contribuiu para que eu conseguisse desenvolver novas técnicas laboratoriais no estudo de leucemias agudas e a adquirir um sentimento crítico e reflexivo a respeito da ciência. Durante os anos de doutoramento conseguimos realizar trabalhos diversos, incluindo o estudo de leucemias crônicas. Publicamos 01 artigo completo na revista da FAPERN: Ciência sempre, a convite do próprio órgão de fomento a professor Geraldo, em comemoração aos 20 anos da FAPERN, no ano de 2019. Publicamos 01 artigo completo no International Journal of Hematology, no ano de 2020, cujo fator de impacto é 2.141 e também fizemos 07 publicações na Revista Blood, cujo fator de impacto é 17.543, na forma de trabalhos completos publicados em anais de congresso.
Recebi um grande apoio do meu orientador e do Laboratório de Hematologia do HEMONORTE, juntamente com equipe médica qualificada, que me ajudaram e incentivaram a desenvolver este trabalho e desta mesma forma, espero que eu possa apoiar e incentivar outros alunos no desenvolvimento de seus estudos.
Através deste estudo, é certo que contribuí de forma excepcional, para que futuros trabalhos nesta área disponham de parâmetros sobre os efeitos dos marcadores MDR, aqui estudados, nas leucemias e assim contribuir de alguma forma para guiar a conduta clínica e melhorar a resposta terapêutica dos pacientes. Ademais, a grande perspectiva é com a continuação do presente estudo, ampliando a pesquisa destes e de outros biomarcadores, uma vez que existem mecanismos de resistência a fármacos nas leucemias ainda não explorados, em profundidade. De tal forma pretendo por meio do pós-doutorado investigar mais a expressão de PgP e MRP1, incluindo também marcadores como LRP e a P53 nas leucemias agudas, além de realizar um estudo da expressão de marcadore linfóide aberrante, como o CD7 em LMA.