RAS/MAPK pathway

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Feedback regulation of Gab2-dependent signaling by the Ras/MAPK pathway

Feedback regulation of Gab2-dependent signaling by the Ras/MAPK pathway

147 signaling, ERK1/2 specifically bind to specific sequences in protein substrates, such as the D-domain (Roskoski, 2012). It was shown that hydrophobic interactions were crucial for activated ERK1/2(p-ERK1/2)-substrate binding to occur, which either attracts substrates surrounding the kinases or ensures the correct orientation of substrates in the kinase active site (Ubersax and Ferrell, 2007). Since our data demonstrated that Gab2 only interacts with activated ERK1/2 (p-ERK1/2) rather than the inactivated form, we reasonably thought that Gab2 association with p-ERK1/2 is modulated by hydrophobic contact. Although we lack the crystal structure support of Gab2, several lines of evidence suggest that the identified Gab2 D-domain forms a hydrophobic bond with activated ERK1/2. Firstly, in our co-immunoprecipitation assays, both ERK1/2 activity and ERK1/2 CD-domain are crucial for Gab2-ERK1/2 association, raising the possibility of physical interaction of ERK and Gab2 in cells (Chapter 3, Figure 3.3D and 3.4A). Secondly, mutation of each positively charged amino acid and hydrophobic amino acids to alanine residues within the Gab2 D-domain disrupts Gab2-ERK1/2 interaction (Chapter 3, Figure 3.4C), which is accompanied with a significant reduction of Gab2 phosphorylation. This result implicates that Gab2 directly interacts with ERK1/2 in cells. Most importantly, among these residues, mutation of the hydrophobic amino acids L517 and L519 have the greatest impact on ERK1/2 association, indicating an essential role for the L-X-L motif in Gab2. Indeed, the same crucial function of L-X-L has been characterized in the transcription factor Ets-1, in which a ERK1/2 docking site is also located on the C-terminus and regulates Ets-1 transcription activity (Seidel and Graves, 2002). Although Gab1 is relatively similar to Gab2, we were not able to observe Gab1-ERK1/2 interaction upon the activation of the MAPK pathway, indicating the specificity action of ERK1/2 on Gab2 (Chapter, Figure 3.3F). This result is controversial with a previous report that Gab1, rather than Gab2, associated with activated ERK2 (Roshan et al., 1999). It was shown that Gab1 associated with ERK2 via its Met-binding domain (MBD), which interestingly contains part of the identified ERK1/2-docking domain. The reasons for these discrepancies are likely due to the respective assays, because we mostly monitored protein-protein interaction under physical conditions, rather than GST-pull downs using only MBD in Gab1 or the corresponding sequence in Gab2 as a bait protein.
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Aberrant Ras/MAPK signaling in skeletal development

Aberrant Ras/MAPK signaling in skeletal development

et  al.,  2006),  SOS1  (Roberts  et  al.,  2007;  Tartaglia  et  al.,  2007)  and  RAF1  (Pandit  et   al.,  2007;  Razzaque  et  al.,  2007)  have  all  been  linked  to  NS.  PTPN11  missense   mutations  are  responsible  for  50%  of  NS  cases.  PTPN11  encodes  for  protein  SHP2,  a   non-­‐receptor  protein  tyrosine  phosphatase,  which  contains  an  N-­‐terminal  SH2   domain,  a  C-­‐terminal  SH2  domain  and  catalytic  protein  tyrosine  phosphatase  (PTP)   domain.  The  majority  of  NS-­‐causing  mutations  in  PTPN11  are  in  residues  involved  in   the  interaction  between  the  N-­‐SH2  and  PTP  domains.  This  interaction  inhibits  the   catalytic  function  of  SHP2  and  causes  increased  signaling  down  the  Ras/MAPK   pathway  (Keilhack  et  al.,  2005).  SOS1  missense  mutations  are  responsible  for  12%   of  Noonan  cases.  SOS1 encodes for the SOS1 protein, a Ras-GEF, responsible for the conversion of Ras from the GDP-bound form to the GTP-bound form. The majority of SOS1 mutations are in residues responsible for stabilizing the protein in an inhibited conformation. They result in a gain-of-function SOS1 and a subsequent increase in the active form of Ras and increased Ras/MAPK pathway signaling (Roberts et al., 2007). 3-­‐ 5%  of  NS  cases  are  caused  by  mutations  in  RAF1,  which  encodes  a  serine/threonine   kinase  that  is  a  downstream  effector  of  Ras.  The  NS  mutations  result  in  a  gain-­‐of-­‐ function  phenotype  for  Ras  (Pandit  et  al.,  2007).  KRAS  mutations  account  for  about   2%  of  the  NS  cases.  These  mutations  cause  an  increase  in  the  GTP-­‐bound  form  of   KRAS  and  thus  increased  signaling  down  the  Ras/MAPK  pathway  either  by  reducing   the  intrinsic  GAP  activity  of  the  KRAS  protein  or  by  affecting  the  interaction  of  KRAS   with  guanine  nucleotides  (Schubbert  et  al.,  2006).  
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Régulation de la réponse immunitaire T par l’apoptose et hyperactivation de la voie RAS

Régulation de la réponse immunitaire T par l’apoptose et hyperactivation de la voie RAS

DNASE1L3 mutation, and in chronic granulomatosis disease [1] . Recently, Y. Crow suggested that SLE is not a single disease, and may rather comprise, to some extent, a heterogeneous collection of rare monogenic disorders [1] . A few reports described the association of Noonan syndrome (NS, OMIM: 163950), classified as a RASopathy with autoimmune features, including SLE [2 – 8 ]. RASopathies are autosomal dominant neurodevelopmental syn- dromes resulting from germline mutations in genes that partic- ipate in the rat sarcoma/mitogen-activated protein kinases (RAS/ MAPK) pathway, an important signal transduction pathway through which extracellular ligands stimulate cell proliferation, differentiation, survival, and metabolism [9] . They comprise NS Contents lists available at ScienceDirect
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Identification de nouveaux substrats de la voie Ras-MAP Kinase

Identification de nouveaux substrats de la voie Ras-MAP Kinase

Le premier de ces substrats potentiels à être décrit est la glycogène synthase kinase-3 (GSK3), dont le rôle consiste notamment à phosphoryler la beta-caténine afin de cibler la protéine pour dégradation par le protéasome (272). Les auteurs identifient la tyrosine 216 (279 chez l’isoforme alpha) comme site de phosphorylation pour les deux isoformes de GSK3 (GSK3 α et GSK3β), et suggèrent que cette phosphorylation par MEK1 induit une accumulation de GSK3 au noyau. Cette étude a toutefois plusieurs limitations, dont l’utilisation d’un anticorps spécifique à la Y216 comme unique méthode pour démontrer l’existence de la phosphorylation de ce site. De plus, le groupe de Philip Cohen a démontré presque simultanément que GSK3 est capable d’autophosphorylation sur ce même site (273). Plusieurs groupes ont aussi observé qu’une stimulation oncogénique de la voie MAP Kinase est suffisante pour promouvoir une activation de la voie canonique Wnt/beta-caténine, notamment via un mécanisme dépendant de la phosphorylation de LRP6 par ERK1/2 (274- 276). Il est donc possible que l’utilisation d’un inhibiteur ciblant MEK1/2 puisse avoir un impact sur l’activité ou la localisation de GSK3 de manière indirecte. Finalement, il a été observé que la translocation de GSK3 au noyau peut survenir en réponse à des signaux de différenciation et dans certaines phases du cycle cellulaire, des processus qui sont en grande partie modulés par la voie Ras-MAP Kinase (277, 278). Ensemble, ces évidences laissent planer un doute important quant à l’exactitude de l’hypothèse voulant que MEK1 phosphoryle GSK3.
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Le Théouprosopon-Ras as-Saq‘a (Liban) : étude géo-historique

Le Théouprosopon-Ras as-Saq‘a (Liban) : étude géo-historique

L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destinée au dépôt et à la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, émanant des établissements d’enseignemen[r]

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A phase 2 study of trametinib for patients with pediatric glioma or plexiform neurofibroma with refractory tumor and activation of the MAPK/ERK pathway

A phase 2 study of trametinib for patients with pediatric glioma or plexiform neurofibroma with refractory tumor and activation of the MAPK/ERK pathway

Methods: The primary objective is to determine the objective response rate of trametinib as a single agent for treatment of progressing/refractory tumors with MAPK/ERK pathway activation. The TRAM-01 study is a phase II multicentric open-label basket trial including four groups. Group 1 includes NF1 patients with progressing/refractory glioma. Group 2 includes NF1 patients with plexiform neurofibroma. Group 3 includes patients with progressing/ refractory glioma with KIAA1549-BRAF fusion. Group 4 includes other patients with progressing/refractory glioma with activation of the MAPK/ERK pathway. Eligible patients for a given study group will receive daily oral trametinib at full dose for a total of 18 cycles of 28 days. A total of 150 patients will be enrolled in seven Canadian centers. Secondary objectives include the assessment of progression-free survival, overall survival, safety and tolerability of trametinib, serum levels of trametinib and evaluation of quality of life during treatment.
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Armand Tavitian (1931-2020) - Des oncogènes à la superfamille Ras

Armand Tavitian (1931-2020) - Des oncogènes à la superfamille Ras

la recherche extensive, par cette stratégie, d’oncogènes dans des cancers humains variés. Très vite, l’implication de 2 autres oncogènes c-K-RAS et N-RAS, homologues de c-H-RAS est décrite [6,7] . Les protéines RAS sont des GTPases qui lient les nucléotides GTP (guanosine triphosphate) et GDP (guanosine diphosphate) et participent à la transmission intracellulaire des signaux issus de l’interaction de facteurs de croissance avec leurs récepteurs, présents à la surface de la cellule. Les mutations oncogéniques impactent le domaine de liaison au GDP/GTP des protéines RAS, ce qui a pour conséquence de bloquer ces dernières dans leur forme active liée au GTP, affectant ainsi les voies de signalisation en aval des récepteurs. Armand Tavitian prend conscience de cette révolution de l’oncogenèse qui est en train de bouleverser la cancérologie. En 1981, il fonde l’unité de recherche Inserm « Génétique et expression des oncogènes », à la faculté de médecine Lariboisière-Saint-Louis, et décide d’orienter ses projets de recherche vers les mécanismes du développement tumoral, que ceux-ci soient provoqués par des rétrovirus comme dans les leu- cémies murines ou ne le soient pas comme dans les cancers humains. Il s’entoure alors de jeunes collaborateurs passionnés et créatifs, accueille trois équipes de chercheurs et s’attache à construire dans le laboratoire un contexte optimal de travail, de réflexions, d’entraides et de discussions (Figure 2) . La variété des modèles étudiés, ainsi que les complémentarités thématiques et méthodologiques entre les équipes seront des atouts majeurs pour une approche intégrée des processus génétiques et cellulaires à l’origine du développement tumoral et se révèleront être un terreau fertile pour de nombreuses découvertes. Armand Tavitian va aborder la question du rôle
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GTPases : visualisation spatio-temporelle des réponses de Ras et Rap1

GTPases : visualisation spatio-temporelle des réponses de Ras et Rap1

De nombreux signaux extracellu- laires convergent pour activer les GTPases de la famille Ras via plu- sieurs protéines régulatrices. Toute- fois, si tant de signaux différents acti- vent ces GTPases, on ne sait pas comment elles aboutissent à la créa- tion de réponses spécifiques à cha- cun de ces signaux. Afin de suivre dans le temps et l’espace l’activation de deux GTPases proches, Ras et Rap1, en réponse à la stimulation des cellules par un mitogène, Mochizuki et al. ont perfectionné cette tech- nique de transfert de fluorescence. Ils ont exprimé dans des cellules une molécule hybride comprenant la GTPase Ras ou Rap1, le domaine de liaison à Ras et Rap de la protéine Raf-1 (Raf-RBD) ainsi que deux pro- téines fluorescentes, la CFP et la YFP (figure 1). L’activation de la GTPase, qui passe de l’état lié au GDP à l’état lié au GTP, lui permet alors d’inter- agir avec son effecteur le Raf-RBD, ce qui a pour effet de rapprocher les deux fluorophores provoquant ainsi le transfert de fluorescence de la CFP vers la YFP. Les auteurs ont enregis- tré ces images sur des cellules vivantes ; la mesure normalisée des intensités de FRET permet de visuali- ser à l’intérieur de chaque cellule la progression de l’activation de ces GTPases en réponse à une stimula- tion.
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L'irrésistible ascension du ras Tafari dans les imaginaires noirs

L'irrésistible ascension du ras Tafari dans les imaginaires noirs

Nous montrerons ainsi que l’ascension du rās Tafari vers le trône ne s’est pas faite seulement sur la scène politique éthiopienne, mais aussi sur une scène beaucoup plus [r]

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Climat et variabilité dans la région de Ras Shamra-Ougarit

Climat et variabilité dans la région de Ras Shamra-Ougarit

CLIMATE AND ITS VARIABILITY IN THE REGION OF RAS SHAMRA-UGARIT Bernard G EYER * 7KH UHJLRQ RI 5DV 6KDPUD ± 8JDULW EHQH¿WV IURP H[FHSWLRQDO ELRFOLPDWLF FRQGLWLRQV LQ SDUWLFXODU D W\SLFDOO\ 0HGLWHUUDQHDQ FOLPDWH GH¿QLWHO\ FKDUDFWHULVHG E\ D ORQJ GU\ VXPPHU VHDVRQ DQG E\ KXPLG ZLQWHUV PRUHWKDQPPRQDYHUDJHSHU\HDURQWKHFRDVW HVSHFLDOO\LQWKHPRXQWDLQVZKHUHFORXGV FOLQJDQGWKHDYHUDJHDQQXDOSUHFLSLWDWLRQLVPRUHWKDQPP,QGHHGWKHPRXQWDLQVSDUWO\EORFNWKH KXPLG ZHVWHUO\ ZLQGV RQ WKHLU ZHVWHUQ IDoDGH EXW DOVR OLPLW WKH LQÀXHQFH RI FROG FRQWLQHQWDO ZLQGV LQ ZLQWHUDQGGU\LQJGHVHUWZLQGVLQVXPPHU%XWLWLVREYLRXVO\WKHSUR[LPLW\RIWKHVHDWKDWSOD\VDQHVVHQWLDO role by maintaining, especially in summer, a high atmospheric humidity that somewhat limits the effects RIWKHGU\VHDVRQE\PLWLJDWLQJERWKZLQWHUDQGVXPPHUWHPSHUDWXUHV DQQXDODYHUDJHRIƒ& DQGE\ OLPLWLQJDPSOLWXGHLWIUHH]HVUDUHO\DQGVQRZDOPRVWQHYHURFFXUVRQWKHFRDVW$VLQDOO0HGLWHUUDQHDQ UHJLRQV WKH QXPEHU RI GD\V RI UDLQIDOO LV UHODWLYHO\ ORZ  GD\V SHU \HDU  EXW KHDY\ UDLQV FDQ DWWDLQ PPLQRQHGD\%XWDERYHDOOWKHUHJLRQEHQH¿WVIURPDQLQWHUDQQXDOYDULDELOLW\RISUHFLSLWDWLRQWKDW LVORZIRUWKH1HDU(DVWZLWKFRHI¿FLHQWVRIYDULDWLRQ UHODWLRQRIWKHVWDQGDUGGHYLDWLRQRIDVHULHVWRLWV DYHUDJH RIOHVVWKDQFRPSDUHGWRWRRQWKHFRDVWLQJHQHUDODQGWRLQWKHODQGVRI WKHLQWHULRU DQGPRUHWKDQLQWKHGHVHUWV 'XULQJGU\\HDUVDVIRUH[DPSOHLQWKHDQQXDO UDLQIDOORQWKHFRDVWZDVHTXDOWRRQO\KDOIWKDWRIDQDYHUDJH\HDUDWDERXWPPWKHUDLQIDOOZDVVWLOO VXI¿FLHQWIRUFURSVZLWKRXWXVLQJLUULJDWLRQ QHFHVVDU\RQO\ZKHQDQQXDOUDLQIDOOLVOHVVWKDQPP  ZKLFKLVKRZHYHURIWHQSUDFWLVHGDVDQH[WUDSUHFDXWLRQWRLPSURYH\LHOGRUEULQJIRUZDUGWKHKDUYHVWGDWH $W DOWLWXGH GHFUHDVH LQ UDLQIDOO LV DOVR SHUFHSWLEOH EXW WKH YROXPH UHPDLQV DERYH  PP 'XULQJ KXPLG \HDUV DV IRU H[DPSOH LQ  WKH FRDVWDO SODLQV UHFHLYHG DERXW  PP WKH PRXQWDLQV 1400 mm or more.
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Le « bleu égyptien » à  Ras Shamra-Ougarit (Syrie)

Le « bleu égyptien » à Ras Shamra-Ougarit (Syrie)

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β-caténine et N-ras - Une association dangereuse pour le mélanocyte

β-caténine et N-ras - Une association dangereuse pour le mélanocyte

BRAFE600-associated senescence-like cell cycle arrest of human naevi. Nature 2005 ; 436 : 720-4. 10. Delmas V, Beermann F, Martinozzi S, et al. Beta- catenin induces immortalization of melanocytes by suppressing p16INK4a expression and cooperates with N-Ras in melanoma development. Genes Dev 2007 ; 21 : 2923-35.

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Implication de la MAPK kinase kinase DLK dans la différenciation des kératinocytes

Implication de la MAPK kinase kinase DLK dans la différenciation des kératinocytes

En resume, nous avons appuye les premiers resultats associant un role a la proteine kinase DLK dans la differenciation des keratinocytes par l'etude de sa fonction specifique dans la d[r]

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Régulation du métabolisme des ARNm par les voies de signalisation MAPK et mTOR

Régulation du métabolisme des ARNm par les voies de signalisation MAPK et mTOR

2.1.4. mTOR, une cible thérapeutique privilégiée dans les cancers 2.1.4.1. Activation de mTORC1 dans les cancers La voie mTOR joue un rôle essentiel dans la croissance et la prolifération en coordonnant des processus anaboliques, synthèse des protéines, des lipides et des nucléotides, en fonction du statut énergétique de la cellule, des signaux extracellulaires et de la disponibilité des nutriments. Une caractéristique propre aux cellules cancéreuses réside dans leur capacité à déconnecter les signaux prolifératifs de leur perception par la cellule. Ce court- circuit est assuré par des évènements génétiques qui mènent dans une grande majorité des cas à l’activation inadéquate du complexe mTORC1. En effet celui-ci se retrouve en aval des voies pro-prolifératives Ras/ERK et PI3K/Akt dont l’activation oncogénique, assurée par des mutations activatrices d’oncogènes (Ras, Raf, PI3K, Akt) et par l’inactivation de gènes suppresseurs de tumeurs (NF-1 (NeuroFibromatosis-related protein-1), PTEN (Phosphatase and TENsin homolog), TSC) est présente dans près de 80% des cancers (Menon Manning Oncogene 2009). Ces évènements conduisent à l’hyperactivation de mTORC1 indépendamment des facteurs de croissance qui peut alors stimuler des processus anaboliques nécessaires à la croissance et la prolifération accrues des cellules cancéreuses. L’importance de mTOR dans le développement des cancers est aujourd’hui largement reconnue et de nombreux efforts sont faits pour mieux comprendre comment mTOR agit au sein de la cellule et pour mettre au point de nouvelles stratégies thérapeutiques ciblant mTOR.
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Rôle des MAPK dans la migration des lymphocytes Th17 à travers le collagène tridimensionnel (3D)

Rôle des MAPK dans la migration des lymphocytes Th17 à travers le collagène tridimensionnel (3D)

42 previously been shown that the calreticulin-thrombospondin-CD47 and CD26 pathways also regulate T cell migration in collagen gels [Li et al., 2005; Liu et al., 2009]. Whether these pathways are linked to p38 MAPK and/or DDR1 pathways remain to be investigated. Although integrins are dispensable for the amoeboid migration of activated T cells [Friedl et al., 1998; Friedl and Weigelin, 2008; Lämmermann et al., 2008; Schmidt and Friedl, 2010], it is possible that they contribute to the observed p38 activation in 3D collagen. In agreement with our findings, it has been shown that DDR1 mediates collagen-induced inflammatory activation of microglia [Seo et al., 2008] and collagen-induced nitric oxide production in murine macrophages through p38 activation [Kim et al., 2007]. Thus, besides macrophages, DDR1 signaling is also connected to the p38 MAPK pathway in human effector T cells. Inhibition of p38 activity also decreased CCL20-induced migration of Th17 cells indicating that in addition to random migration, p38 is essential for Th17 chemotaxis in 3D collagen. Inhibition of p38 did not affect the expression levels of DDR1 or of the CCL20 receptor (CCR6) (data not shown) suggesting a crosstalk between DDR1/MAPK p38 and CCR6 pathways in regulating Th17 chemotaxis in 3D collagen.
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Citrulline directly modulates muscle protein synthesis via the PI3K/MAPK/4E-BP1 pathway in a malnourished state: evidence from in vivo, ex vivo, and in vitro studies

Citrulline directly modulates muscle protein synthesis via the PI3K/MAPK/4E-BP1 pathway in a malnourished state: evidence from in vivo, ex vivo, and in vitro studies

Submitted 24 May 2016; accepted in final form 18 October 2016 Le Plénier S, Goron A, Sotiropoulos A, Archambault E, Guihenneuc C, Walrand S, Salles J, Jourdan M, Neveux N, Cynober L, Moinard C. Citrulline directly modulates muscle protein synthesis via the PI3K/MAPK/4E-BP1 pathway in a malnourished state: evidence from in vivo, ex vivo, and in vitro studies. Am J Physiol Endocrinol Metab 312: E27–E36, 2017. First published No- vember 8, 2016; doi:10.1152/ajpendo.00203.2016.—Citrulline (CIT) is an endogenous amino acid produced by the intestine. Recent literature has consistently shown CIT to be an activator of muscle protein synthesis (MPS). However, the underlying mechanism is still unknown. Our working hypothesis was that CIT might regulate muscle homeostasis directly through the mTORC1/PI3K/MAPK path- ways. Because CIT undergoes both interorgan and intraorgan traffick- ing and metabolism, we combined three approaches: in vivo, ex vivo, and in vitro. Using a model of malnourished aged rats, CIT supple- mentation activated the phosphorylation of S6K1 and 4E-BP1 in muscle. Interestingly, the increase in S6K1 phosphorylation was positively correlated (P ⬍ 0.05) with plasma CIT concentration. In a model of isolated incubated skeletal muscle from malnourished rats, CIT enhanced MPS (from 30 to 80% CIT vs. Ctrl, P ⬍ 0.05), and the CIT effect was abolished in the presence of wortmannin, rapamycin, and PD-98059. In vitro, on myotubes in culture, CIT led to a 2.5-fold increase in S6K1 phosphorylation and a 1.5-fold increase in 4E-BP1 phosphorylation. Both rapamycin and PD-98059 inhibited the CIT effect on S6K1, whereas only LY-294002 inhibited the CIT effect on both S6K1 and 4E-BP1. These findings show that CIT is a signaling agent for muscle homeostasis, suggesting a new role of the intestine in muscle mass control.
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Cartographe dynamique des voies de signalisation MAPK chez la levure Saccharomyces cerevisiae

Cartographe dynamique des voies de signalisation MAPK chez la levure Saccharomyces cerevisiae

D’abord, dans des souches ssk2A/ssk22z\, chez qui la réponse au choc osmotique dépend de la voie Shol, la phosphorylation de Hoglp survient lorsque les cellules sont exposées à 300mM NaC[r]

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Review of the current status of RAS mutation testing in patients with metastatic colorectal cancer (mCRC): Flash-RAS study

Review of the current status of RAS mutation testing in patients with metastatic colorectal cancer (mCRC): Flash-RAS study

In order to assess the impact of this modification and the real-life conditions in which the tests are carried out, it was decided to set up a French epidemiological study called Flash-RAS. This study follows the Flash-KRAS study conducted in 2011 on KRAS exon 2 genotyping only.

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Étude du rôle de la voie ERK/MAPK dans le développement embryonnaire chez la souris

Étude du rôle de la voie ERK/MAPK dans le développement embryonnaire chez la souris

54 1.4.5.5 MP1 MP1 est une petite protéine de 13.5kDa qui a été mise en évidence par un criblage double hybride chez la levure à la recherche de partenaires de MEK. Elle se lie spécifiquement à MEK1 dans le domaine riche en prolines. Des expériences d’immunoprécipitation de MEK1 dans des fibroblastes pulmonaires de hamster (CCL39) ont montré que cette interaction spécifique entre MP1 et MEK1 avait aussi lieu dans ces cellules de mammifères. MP1 se lie préférentiellement à la forme inactive de MEK1 favorisant l’activation de MEK1 par RAF-1, et conséquemment facilitant l’activation de ERK par MEK1. De plus, MP1 se lie directement à ERK1, suggérant que l’augmentation de l’activation de ERK par MEK1 via MP1 passerait par un rapprochement physique entre MEK1 et ERK1 (Schaeffer et al. 1998). Sharma et ses collaborateurs ont montré que la phosphorylation de ERK après activation de la voie entraîne une dissociation du complexe MP1-ERK1. Par contre, l’activation de la voie n’affecte pas le complexe MP1-MEK1. Ces mêmes auteurs ont démontré que MP1 fait partie d’un large complexe impliqué dans la régulation de la voie ERK/MAPK (Sharma et al. 2005). Le complexe associé à MP1 comprend aussi la protéine adaptatrice p14. Cette petite protéine permet l’ancrage de MP1-MEK1-ERK1 à la surface des endosomes tardifs (Wunderlich et al. 2001). Des analyses supplémentaires sur le rôle de ce complexe dans la réponse à la stimulation à EGF ont montré que la surexpression de p14 dans des cellules HeLa entraîne une augmentation de l’activation de ERK1. Cette modulation de l’activation de ERK se fait via MP1 et localise une partie de la signalisation MAPK aux endosomes tardifs. De manière surprenante, l’utilisation de siARN afin de diminuer l’expression de p14 entraîne une diminution protéique de MP1 (Teis et al. 2002). Ces données montrent comment la localisation du complexe signalétique dans les compartiments cellulaires joue un rôle dans la régulation de la signalisation cellulaire. L’analyse des souris invalidées pour le gène p14 a révélé que ce gène est essentiel à la survie. En effet, les souris p14 -/- meurent avant E10.5. De plus, l’étude de MEFs p14 -/- a permis de montrer que la signalisation passant par le complexe p14-MP1-MEK1-ERK1 est impliquée dans la régulation du trafic endosomal (Teis et al. 2006).
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Proximal Protein Interaction Landscape of RAS Paralogs

Proximal Protein Interaction Landscape of RAS Paralogs

Cancers 2020, 12, 3326 2 of 21 Keywords: RAS paralogs; interactome; protein–protein interaction; BioID 1. Introduction The RAS genes were characterized in the 1980s and encode four highly related and nearly ubiquitously expressed proteins: HRAS, NRAS, KRAS4A and KRAS4B. These small GTPases are at the crossroad of a broad range of cellular signaling networks and are essential for cell fate determination through their roles in cell proliferation, differentiation and survival [ 1 – 3 ]. RAS proteins switch between the active GTP-bound and the inactive GDP-bound states, regulated by the direct interaction with Guanine nucleotide Exchange Factors (GEFs) and GTPase-Activating Proteins (GAPs) [ 4 ]. RAS regulation is dependent of multiple signals integration, and this GTP–GDP cycling enables the transduction of extracellular stimuli to intracellular signaling cascades, required for cell adaptation to environmental changes [ 5 , 6 ]. A fine understanding of RAS functions is particularly important given their extremely frequent constitutive activation in human cancers (e.g., non-small cell lung cancer, melanoma and bladder cancer) and developmental disorders (i.e., Costello and Noonan syndromes). KRAS mutations are considered to be responsible for approximately one million deaths per year worldwide [ 7 , 8 ]. Hence, RAS proteins have been extensively studied and considerable efforts have
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