TUTORAT CYTO-HISTO
Année 2007-2008
Séance n°1
Séance du 12/10/2007
Méthodes d’étude et membranes - Pr. H. Vannereau QCMs de Brice et Thierry
QCM n°1
Concernant les techniques d’observation microscopiques photoniques, quelles sont les réponses vraies :
a) - La loupe binoculaire permet d’observer des coupes minces de l’ordre de 5 à 10 microns,
b) - La fixation a pour but de détruire la membrane plasmique des cellules de façon à libérer les organites qu’elle contient et pouvoir ainsi les observer,
c) - Les fixateurs sont des solutions d’aldéhyde (ex : le glutaraldéhyde) , ou bien des sels oxygénés de métaux lourds.
d) - La fixation emploie des substances qui ne tuent pas les cellules, car si la cellule meurt l’observation ne rend pas compte de la réalité in situ.
e) - La préparation de la pièce à observer nécessite 6 étapes préalables à l’observation.
Question bonus : citer ces différentes étapes.
QCM n°2
Concernant la préparation des pièces pour l’observation au microscope optique, quelles sont les réponses vraies :
a) - La déshydratation a pour but de permettre aux colorants de rentrer dans la cellule lors de la phase de coloration, b) - L’inclusion se fait par des bains de résine époxy de concentration croissante,
c) - Le microtome donne des rubans de coupes sériées qui vont être recueillies sur des lames porte-objets enduites d’une solution d’ovalbumine,
d) - La réhydratation a pour but de déparaffiner et d’hydrater les coupes en faisant des bains successifs d’eau puis d’alcool, e) - Les colorants topographiques permettent de repérer la forme précise des cellules tandis que les colorant signalétiques permettent de repérer certaines substances chimiques contenues dans les cellules.
QCM n°3
Concernant les méthodes d’observation en microscopie optique, quelles sont les propositions vraies :
a) - La coloration au MGG (qui est un mélange de deux bleus) est la technique la plus utilisée en histologie, b) - Les colorant vitaux colorent les cellules qui sont vivantes et permettent donc leur comptage,
Question bonus : donner les noms des 2 colorants vitaux et leurs fonctions,
c) - Les examens sur frottis sont très pratiques et rapides et peuvent s’appliquer à tous les tissus,
d) - Après la coloration on ajoute sur une lame porte-objets une goutte d’une substance de même indice de réfraction que le verre et on recouvre d’une lamelle couvre-objet,
e) - Le microscope à contraste de phase permet de différencier deux cellules ayant été fixées à des moments différents de leur cycle cellulaire.
Concernant les techniques microscopiques, quelles sont les propositions vraies :
a) - Les stéréo microscopes sont des loupes binoculaires qui permettent d’observer la surface d’un objet dans les trois dimensions et qui peuvent être utilisées en écoutant de la musique,
b) - Les microscopes à contraste interférentiel utilisent un faisceau de lumière qui va illuminer les substances possédant un pouvoir rotatoire,
c) - Le microscope à fond noir est un microscope envoyant une lumière rasante sur un fond noir,
d) - Le microscope inversé peut être utilisé avec tous les dispositifs de microscopie optique (fond noir, lumière polarisée,…), e) - Tous les types de microscopes optiques permettent l’étude de cellules vivantes.
QCM n°5
Concernant les techniques microscopiques, quelles sont les propositions vraies :
a) - La microscopie confocale et une technique de microscopie à fluorescence et donne une image en trois dimensions de l’objet par numérisation,
b) - Le stéréo microscope grossit x 80, le microscope optique x 1250, le MEB x 100000, et le MET x 500000, c) - Dans le MET les « lentilles » sont des bobines électromagnétiques,
d) - Dans le MO le vide n’est pas nécessaire car on utilise des électrons, contrairement au MET dans lequel on utilise des photons,
e) - Le MEB est en quelque sorte le stéréo microscope de la microscopie électronique.
Question bonus : pour ceux qui ont répondu au hasard, expliquez votre réponse pour la « e »
QCM n°6
Concernant la préparation au ME, quelles sont les propositions vraies :
a) - Les coupes faites à l’ultra microtome sur des résines époxy sont recueillies sur des grilles, b) - La fixation se fait au glutaraldéhyde ou à l’acide osmique OsO4, question très redondante c) - La « coloration » pour le MET se fait à l’acétate d’uranyle puis au citrate de plomb,
d) - Pour le MEB, la fixation et l’inclusion ne sont pas nécessaires, néanmoins la déshydratation l’est d’où la nécessité de redonner leur volume initial aux cellules par le CO2 liquide,
e) - Le microscope à très haut voltage permet d’observer pendant un court instant des bactéries vivantes enfermées dans une capsule de celluloïde.
QCM n°7
Concernant les différentes techniques en microscopie électronique, quelles sont les propositions vraies :
a) - La cryofracture permet de mettre en évidence des structures très fines comme le cytosquelette, b) - Le microscope à effet tunnel possède une nanopointe qui détecte les forces de van der Waals
Concernant les différentes techniques d’étude des cellules :
c) - L’analyse chimique globale comprend des techniques comme la centrifugation, la chromatographie sur gel, l’électrophorèse, etc.
d) - La réaction au PAS consiste en la coloration en rouge du réactif de Schiff en présence d’ADN, cette réaction peut être rendue plus spécifique par couplage avec une réaction enzymatique,
e) - Pour faire un repérage spécifique d’une substance on peut utiliser une molécule d’affinité spécifique couplée à un fluorochrome.
Concernant les différentes techniques d’étude des cellules, quelles sont les propositions vraies :
a) - Les techniques d’immunofluorescence sont utilisables aussi bien au MO qu’au ME, b) - L’immunohistochimie indirecte permet d’augmenter la sensibilité de la méthode, c) - L’histophotométrie permet le dosage spécifique d’une substance,
Question bonus : Expliquer cette technique et donner 1 exemple
d) - La réaction de Feulgen est spécifique de l’ADN, elle correspond à une coloration au réactif de Schiff précédée d’une hydrolyse acide à chaud,
e) - L’autoradiographie est une méthode utilisable au MO et au ME, elle permet de déterminer le site de synthèse d’une substance dans une cellule.
QCM n°9
Concernant les différentes techniques d’étude des cellules, quelles sont les propositions vraies :
a) - L’autoradiographie est une technique qui peut être rendue dynamique en recommençant l’expérience en augmentant à chaque fois la durée du Chase,
b) - Les cultures sont des études faites sur la cellule in vitro mais très utilisées alors que la micromanipulation est une technique expérimentale,
c) - L’extemporanée est une technique, souvent utilisée lors d’interventions chirurgicales, dans laquelle la fixation se fait au CO2 à -80°. Les coupes sont faites au cryostat,
Question Bonus : Donner un autre exemple d’utilisation
d) - La morphométrie et le comptage manuel sont des techniques de pointe très précises utilisées en cytologie,
e) - Le cytomètre de flux est un appareil « à tout faire » qui permet de compter et trier différentes populations cellulaires, et il peut même faire des réactions enzymatiques
Question Bonus : Peut-il faire à manger ?
QCM n°10
Concernant les différentes techniques d’étude des cellules, quelles sont les propositions vraies :
a) - L’hybridation in situ est une technique basée sur la complémentarité par exemple des chaînes d’ADN et d’ARNm qui permet de localiser un chromosome ou un ARNm dans une cellule.
b) - La technique utilisant la Green Fluorescent Protein permet, lorsque son gène est greffé à un animal, de le transformer en méduse d’une belle couleur verte,
c) - La technique du FRAP permet de mesurer la vitesse de déplacement des protéines,
d) - La microscopie biphotonique utilise une illumination ultra-violette qui est réémise par la matière sous forme de 2 photons, cette technique permet une observation des cellules en profondeur,
Question Bonus : Quelle est l’autre avantage important de cette technique ?
e) - Pour déterminer le site de synthèse d’une substance, on utilise la technique de l’autoradiographie avec un pulse court et un Chase court.
QCM n°11
Généralités sur les membranes plasmiques (M.P) quelles sont les propositions exactes:
a) - La MP est composée majoritairement de lipides, d’où sa fluidité.
b) - C’est une structure fluide et remodelable dans le temps.
c) - Au M.E, elle est mise en évidence par l’imprégnation argentique.
d) - L’organisation de MP varie en fonction du type de structure considérée (paroi d’un organite, membrane de cellules musculaire...) qu’elle limite.
e) - L’aspect trilamellaire vue au M.O est due à l’action des fixateurs.
Généralités sur la composition de la M.P, donner les propositions exactes :
a) - Les feuillets hydrophiles font 2,5 nm d’épaisseur.
b) - Le glycocalix est présent à la fois sur la face externe (E) et sur la face interne (P) de la MP.
c) - ce sont les membranes biologiques qui assurent le maintien de la compartimentalisation et de l’hétérogénéité intracellulaire..
d) - De manière générale les glucides sont à l’extérieur du cytoplasme.
e) -Les glycoprotéines sont plus nombreuses que les glycolipides dans la membrane plasmique.
QCM n°13
Concernant les caractères hydrophiles et hydrophobes de la MP, donner les propositions fausses:
a) -L'organisation micellaire est définitive.
b) -Un micelle est l’organisation spontanée des lipides en milieu aqueux visant à protéger leurs fonctions hydrophiles.
c) -Seules les substances hydrosolubles passent la barrière lipidique que constitue la M.P.
d) -L'eau ne passe pas la MP, pour la faire entrer la cellule utilise des aquaporines.
e) -Les phospholipides et les sphingolipides constituent la majorité des lipides membranaires.
QCM n°14
Concernant les rôles et les différenciations des membranes donner les propositions exactes:
a) -Le rôle de membrane sélective est l’unique rôle de cette membrane.
b) -La M.P participe activement aux fonctions de communication intercellulaire et à la réception de messages.
c) -Les radeaux sont des structures transitoires de transport basées sur une augmentation de la rigidité du feuillet E.
d) -Les cils et les microvillosités ont le même rôle car ce sont tous les deux des différenciatio s apicales de la MP. n e) -La vitesse des réactions enzymatiques est multipliée par 2 grâce au support qu’est la M.P.
QCM n°15
Concernant les protéines de la MP, donner les propositions exactes:
a) - Ce sont toutes des hélices alpha.
b) - Elles ont de multiples rôles comme assurer le passage d’éléments extérieur ou assurer les jonctions cellulaires.
c) - Les protéines extrinsèques sont uniquement liées au feuillet P.
d) - Une protéine intrinsèque peut porter un lipide et s’insérer dans la MP grâce à celui-ci.
e) - Toutes les protéines de la membrane plasmique sont glycosylées.
QCM n°16
Concernant les protéines de la MP, donner les propositions fausses:
a) -La forme « hélice alpha » nécessite un remaniement de la protéine initialement formée.
b) -Une hélice alpha est totalement hydrophobe.
c) -Seul le coeur de l’hélice alpha intramembranaire est hydrophile.
d) -L'action des détergents utilisés au M.O casse les hélices alpha.
e) -L’aspect trilamellaire n’est en fait qu’un artéfact dû aux techniques de préparations.
QCM n°17
Concernant le rôle des protéines de la MP donner les propositions fausses:
Concernant les jonctions cellulaires, donner les propositions exactes:
a) - Elles se situent toutes sur le pôle baso-latéral de la cellule.
b) - Elles permettent de polariser la cellule.
c) - Le cytosquelette joue un très grand rôle dans leur constitution.
d) - Elles assurent, en plus de la cohésion, des phénomènes de communication in ercellulaire. t e) -Seuls les hémidesmosomes ont une liaison avec les filaments intermédiares .
QCM n°19
Concernant les jonctions cellulaires, donner les propositions exactes:
a) - La plaque dense des zonula occludens contient des desmoplaquines et des occludines.
b) - Les caténines assurent une liaison aux microtubules cellulaires.
c) - L’engrènement permet la cohésion et la communication inter-cellulaire.
d) - Les desmosomes vrais possèdent aussi une plaque dense protéique.
e) - Pour étrangler la jonction, les zonulas adhérens met en jeu de la myosine et de l'actine.
QCM n° 20
Concernant les différenciations de la M.P, donner les propositions exactes:
a) - La bordure en brosse est composée de nombreux cils vibratiles.
b) - Il y a un plateau strié au niveau de l’estomac permettant l’absorption.
c) - La trachée comporte un plateau cilié permettant de faire remonter le mucus bronchique d) - La membrane basale des cellules rénales comporte de nombreuses interd gitations . i e) - Les pseudostéréocils se retrouvent dans le tractus masculin uniquement.
