PRINCIPE DE LA COLORATION DE GRAM
La coloration de GRAM permet de distinguer 2 grands groupes de bactéries qui se différencient par la nature de leur PAROI :
- les bactéries à GRAM – qui apparaissent ROSES
- les bactéries à GRAM + qui apparaissent VIOLETTES
Cette coloration permet de renseigner sur : - le type GRAM + ou GRAM –
- la FORME des bactéries - leur TAILLE
- leur MODE DE REGROUPEMENT
PRINCIPE DE LA COLORATION DE GRAM
AGENTS BACTERIE 1 BACTERIE 2 REMARQUES
Cristal Violet ou Violet de Gentiane
(colorant violet)
Le colorant pénètre dans les 2 types de bactéries (Gram + et Gram -)
Lugol
(mordant) Le mordançage permet
d’intensifier la coloration
Alcool = Ethanol (décolorant)
Bactérie 1 : peptidoglycane épais
Pas de pénétration de l’alcool Bactérie 2 :l’éthanol dissout la membrane externe et passe la fine couche de peptidoglycane Fuschine ou
Safranine (colorant rose)
Contre-coloration des bactéries décolorées (bactérie 2)
OBSERVATIONS
MICROSCOPIQUES Violet donc
GRAM + Rose donc GRAM -