UNIVERSITE MOHAMMED V DE RABAT FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH
1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK
1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI
2003 – 2013 : Professeur Najia HAJJAJ - HASSOUNI
ADMINISTRATION :
Doyen : Professeur Mohamed ADNAOUI
Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines
Professeur Mohammed AHALLAT
Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération
Professeur Taoufiq DAKKA
Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie
Professeur Jamal TAOUFIK
Secrétaire Général : Mr. El Hassane AHALLAT
1- ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS
ET
PHARMACIENS
PROFESSEURS : Mai et Octobre 1981Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajih Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. TAOBANE Hamid* Chirurgie Thoracique
Mai et Novembre 1982
Pr. BENOSMAN Abdellatif Chirurgie Thoracique
Novembre 1983
Pr. HAJJAJ Najia ép. HASSOUNI Rhumatologie Décembre 1984
Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale
Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation
Pr. SETTAF Abdellatif pathologie Chirurgicale
Novembre et Décembre 1985
Pr. BENJELLOUN Halima Cardiologie
Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale
Janvier, Février et Décembre 1987
Pr. AJANA Ali Radiologie
Pr. CHAHED OUAZZANI Houria Gastro-Entérologie
Pr. EL YAACOUBI Moradh Traumatologie Orthopédie
Pr. ESSAID EL FEYDI Abdellah Gastro-Entérologie
Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne
Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie
Décembre 1988
Pr. BENHAMAMOUCH Mohamed Najib Chirurgie Pédiatrique
Pr. DAFIRI Rachida Radiologie
Pr. HERMAS Mohamed Traumatologie Orthopédie
Décembre 1989
Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR
Pr. BOUKILI MAKHOUKHI Abdelali* Cardiologie
Pr. CHAD Bouziane Pathologie Chirurgicale
Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie Janvier et Novembre 1990
Pr. CHKOFF Rachid Pathologie Chirurgicale
Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne
Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique
Pr. MANSOURI Fatima Anatomie-Pathologique
Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation
Février Avril Juillet et Décembre 1991
Pr. AL HAMANY Zaîtounia Anatomie-Pathologique
Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation –Doyen de la FMPO
Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie
Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale
Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie Obstétrique
Pr. CHABRAOUI Layachi Biochimie et Chimie
Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie
Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie – Dir. du Centre National PV
Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique
Décembre 1992
Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation
Pr. BOUJIDA Mohamed Najib Radiologie
Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie
Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique
Pr. DAOUDI Rajae Ophtalmologie
Pr. DEHAYNI Mohamed* Gynécologie Obstétrique
Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie
Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne
Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
Mars 1994
Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie
Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique
Pr. CAOUI Malika Biophysique
Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique
Pr. EL AOUAD Rajae Immunologie
Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie
Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale- Directeur CHIS
Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique
Pr. HADRI Larbi* Médecine Interne
Pr. HASSAM Badredine Dermatologie
Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale
Pr. JELTHI Ahmed Anatomie Pathologique
Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie
Pr. MOUDENE Ahmed* Traumatologie- Orthopédie Inspecteur du SS
Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique
Pr. SENOUCI Karima Dermatologie
Mars 1994
Pr. ABBAR Mohamed* Urologie
Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique
Pr. BELAIDI Halima Neurologie
Pr. BRAHMI Rida Slimane Gynécologie Obstétrique
Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie
Pr. CHAMI Ilham Radiologie
Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie
Pr. EL ABBADI Najia Neurochirurgie
Pr. HANINE Ahmed* Radiologie
Pr. JALIL Abdelouahed Chirurgie Générale
Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique
Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
Mars 1995
Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale
Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique
Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique
Pr. CHAARI Jilali* Médecine Interne
Pr. DIMOU M’barek* Anesthésie Réanimation – Dir. HMIM
Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation
Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie - Directeur ERSM
Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie
Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale
Décembre 1996
Pr. AMIL Touriya* Radiologie
Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale
Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie
Pr. MOHAMMADI Mohamed Médecine Interne
Pr. OUADGHIRI Mohamed Traumatologie-Orthopédie
Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie
Novembre 1997
Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique
Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
Pr. BIROUK Nazha Neurologie
Pr. CHAOUIR Souad* Radiologie
Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie
Pr. FELLAT Nadia Cardiologie
Pr. HAIMEUR Charki* Anesthésie Réanimation
Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique
Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale
Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
Pr. OUAHABI Hamid* Neurologie
Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie
Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
Novembre 1998
Pr. AFIFI RAJAA Gastro-Entérologie
Pr. BENOMAR ALI Neurologie – Doyen Abulcassis
Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale
Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale
Pr. EZZAITOUNI Fatima Néphrologie
Pr. LAZRAK Khalid * Traumatologie Orthopédie
Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie
Pr. KHATOURI ALI* Cardiologie
Pr. LABRAIMI Ahmed* Anatomie Pathologique
Janvier 2000
Pr. ABID Ahmed* Pneumophtisiologie
Pr. AIT OUMAR Hassan Pédiatrie
Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie
Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie
Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale
Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale
Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie
Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie
Pr. ISMAILI Hassane* Traumatologie Orthopédie
Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation
Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation
Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
Novembre 2000
Pr. AIDI Saadia Neurologie
Pr. AIT OURHROUI Mohamed Dermatologie
Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie
Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale
Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation
Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie
Pr. EL KHADER Khalid Urologie
Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. HSSAIDA Rachid* Anesthésie-Réanimation
Pr. LAHLOU Abdou Traumatologie Orthopédie
Pr. MAFTAH Mohamed* Neurochirurgie
Pr. MAHASSINI Najat Anatomie Pathologique
Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
Pr. NASSIH Mohamed* Stomatologie Et Chirurgie Maxillo-Faciale
Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie
Décembre 2000
Pr. ZOHAIR ABDELAH* ORL
Décembre 2001
Pr. ABABOU Adil Anesthésie-Réanimation
Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation
Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie
Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie
Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie
Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie
Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie
Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie
Pr. CHAT Latifa Radiologie
Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique
Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. ETTAIR Said Pédiatrie
Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie
Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale
Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation
Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique
Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale
Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique
Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale
Pr. NOUINI Yassine Urologie
Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie Décembre 2002
Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique
Pr. AMEUR Ahmed * Urologie
Pr. AMRI Rachida Cardiologie
Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie
Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie
Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie
Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique
Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie
Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale
Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
Pr. EL MANSARI Omar* Chirurgie Générale
Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique
Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie
Pr. IKEN Ali Urologie
Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie
Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie
Pr. LAGHMARI Mina Ophtalmologie
Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique Pr. MOUSTAGHFIR Abdelhamid* Cardiologie
Pr. NAITLHO Abdelhamid* Médecine Interne
Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumophtisiologie
Pr. RHOU Hakima Néphrologie
Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale
Janvier 2004
Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie
Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique
Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie
Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie
Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique
Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique
Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie
Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale
Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
Pr. KHABOUZE Samira Gynécologie Obstétrique
Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie
Pr. LEZREK Mohammed* Urologie
Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. OUBAAZ Abdelbarre* Ophtalmologie
Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale
Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
Janvier 2005
Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
Pr. ALAOUI Ahmed Essaid Microbiologie
Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie
Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie
Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie
Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie
Pr. BARKAT Amina Pédiatrie
Pr. BENHALIMA Hanane Stomatologie et Chirurgie Maxillo Faciale
Pr. BENYASS Aatif Cardiologie
Pr. BERNOUSSI Abdelghani Ophtalmologie
Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Mohamed Ophtalmologie
Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique
Pr. EL HAMZAOUI Sakina* Microbiologie
Pr. HAJJI Leila Cardiologie (mise en disponibilité)
Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie
Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie
Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie
Pr. NIAMANE Radouane* Rhumatologie
Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique
Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique
Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
Décembre 2005
Pr. CHANI Mohamed Anesthésie Réanimation
Avril 2006
Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie
Pr. AKJOUJ Said* Radiologie
Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie
Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L
Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire
Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique
Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
Pr. ESSAMRI Wafaa Gastro-entérologie
Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation
Pr. GHADOUANE Mohammed* Urologie
Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne
Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie
Pr. JROUNDI Laila Radiologie
Pr. KARMOUNI Tariq Urologie
Pr. KILI Amina Pédiatrie
Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique
Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique
Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie
Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie
Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie
Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie
Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie
Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie
Pr. TELLAL Saida* Biochimie
Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie
Octobre 2007
Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale
Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie
Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale
Pr. AIT HOUSSA Mahdi* Chirurgie cardio vasculaire
Pr. AMHAJJI Larbi* Traumatologie orthopédie
Pr. AMMAR Haddou* ORL
Pr. AOUFI Sarra Parasitologie
Pr. BALOUCH Lhousaine* Biochimie-chimie
Pr. BENZIANE Hamid* Pharmacie clinique
Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie
Pr. CHARKAOUI Naoual* Pharmacie galénique
Pr. EHIRCHIOU Abdelkader* Chirurgie générale
Pr. ELABSI Mohamed Chirurgie générale
Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation
Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie
Pr. GANA Rachid Neuro chirurgie
Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. HADADI Khalid* Radiothérapie
Pr. ICHOU Mohamed* Oncologie médicale
Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie
Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie
Pr. LALAOUI SALIM Jaafar* Anesthésie réanimation
Pr. LOUZI Lhoussain* Microbiologie
Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale
Pr. MAHI Mohamed* Radiologie
Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie
Pr. MASRAR Azlarab Hématologique
Pr. MOUTAJ Redouane * Parasitologie
Pr. MRABET Mustapha* Médecine préventive santé publique et hygiène
Pr. MRANI Saad* Virologie
Pr. OUZZIF Ez zohra* Biochimie-chimie
Pr. RABHI Monsef* Médecine interne
Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie
Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie
Pr. SEKHSOKH Yessine* Microbiologie
Pr. SIFAT Hassan* Radiothérapie
Pr. TABERKANET Mustafa* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie
Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale
Pr. TANANE Mansour* Traumatologie orthopédie
Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie
Pr. TOUATI Zakia Cardiologie
Décembre 2007
Pr. DOUHAL ABDERRAHMAN Ophtalmologie
Décembre 2008
Pr ZOUBIR Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale
Mars 2009
Pr. ABOUZAHIR Ali* Médecine interne
Pr. AIT ALI Abdelmounaim* Chirurgie Générale
Pr. AIT BENHADDOU El hachmia Neurologie
Pr. AKHADDAR Ali* Neuro-chirurgie
Pr. ALLALI Nazik Radiologie
Pr. AMAHZOUNE Brahim* Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. AMINE Bouchra Rhumatologie
Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie
Pr. AZENDOUR Hicham* Anesthésie Réanimation
Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation
Pr. BJIJOU Younes Anatomie
Pr. BOUHSAIN Sanae* Biochimie-chimie
Pr. BOUI Mohammed* Dermatologie
Pr. BOUNAIM Ahmed* Chirurgie Générale
Pr. BOUSSOUGA Mostapha* Traumatologie orthopédique
Pr. CHAKOUR Mohammed * Hématologie biologique
Pr. CHTATA Hassan Toufik* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. DOGHMI Kamal* Hématologie clinique
Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale
Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie
Pr. ENNIBI Khalid* Médecine interne
Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique
Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie
Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie
Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie
Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie
Pr. L’KASSIMI Hachemi* Microbiologie
Pr. LAMSAOURI Jamal* Chimie Thérapeutique
Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie
Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique
Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale
Pr. NASSAR Ittimade Radiologie
Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie
Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-phtisiologie
Pr. ZOUHAIR Said* Microbiologie
PROFESSEURS AGREGES :
Octobre 2010
Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation
Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine interne
Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie
Pr. BOUAITY Brahim* ORL
Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie
Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine aéronautique
Pr. DAMI Abdellah* Biochimie chimie
Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie
Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie pédiatrique
Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie
Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie
Pr. ERRABIH Ikram Gastro entérologie
Pr. LAMALMI Najat Anatomie pathologique
Pr. LEZREK Mounir Ophtalmologie
Pr. MALIH Mohamed* Pédiatrie
Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation
Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie générale
Pr. NAZIH Mouna* Hématologie
Pr. ZOUAIDIA Fouad Anatomie pathologique
Mai 2012
Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie Pédiatrique
Pr. ABOUELALAA Khalil* Anesthésie Réanimation
Pr. BELAIZI Mohamed* Psychiatrie
Pr. BENCHEBBA Driss* Traumatologie Orthopédique
Pr. DRISSI Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale
Pr. EL KHATTABI Abdessadek* Médecine Interne
Pr. EL OUAZZANI Hanane* Pneumophtisiologie
Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique
Pr. JAHID Ahmed Anatomie pathologique
Pr. MEHSSANI Jamal* Psychiatrie
Pr. RAISSOUNI Maha* Cardiologie
Février 2013
Pr. AHID Samir Pharmacologie – Chimie
Pr. AIT EL CADI Mina Toxicologie
Pr. AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie
Pr. AMOUR Mourad Anesthésie Réanimation
Pr. AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation
Pr. BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale
Pr. BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation
Pr. BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie
Pr. BENKIRANE Souad Hématologie
Pr. BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique
Pr. BENSEFFAJ Nadia Immunologie
Pr. BENSGHIR Mustapha* Anesthésie Réanimation
Pr. BENYAHIA Mohammed* Néphrologie
Pr. BOUATIA Mustapha Chimie Analytique
Pr. BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie Orthopédie
Pr. BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie
Pr. CHAIB Ali* Cardiologie
Pr. DENDANE Tarek Réanimation Médicale
Pr. DINI Nouzha* Pédiatrie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie
Pr. EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire
Pr. EL HARTI Jaouad Chimie Thérapeutique
Pr. EL JOUDI Rachid* Toxicologie
Pr. EL KABABRI Maria Pédiatrie
Pr. EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologie
Pr. EL KHLOUFI Samir Anatomie
Pr. EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation
Pr. EN-NOUALI Hassane* Radiologie
Pr. ERRGUIG Laila Physiologie
Pr. FIKRI Meryim Radiologie
Pr. GHANIMI Zineb Pédiatrie
Pr. GHFIR Imade Médecine Nucléaire
Pr. IMANE Zineb Pédiatrie
Pr. IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques
Pr. KABBAJ Hakima Microbiologie
Pr. KADIRI Mohamed* Psychiatrie
Pr. LATIB Rachida Radiologie
Pr. MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne
Pr. MEDDAH Bouchra Pharmacologie
Pr. MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie
Pr. MRABTI Hind Oncologie Médicale
Pr. NEJJARI Rachid Pharmacognosie
Pr. OUBEJJA Houda Chirurgie Pédiatrique
Pr. OUKABLI Mohamed* Anatomie Pathologique
Pr. RAHALI Younes Pharmacie Galénique
Pr. RATBI Ilham Génétique
Pr. RAHMANI Mounia Neurologie
Pr. REDA Karim* Ophtalmologie
Pr. REGRAGUI Wafa Neurologie
Pr. RKAIN Hanan Physiologie
Pr. ROSTOM Samira Rhumatologie
Pr. ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique
Pr. ROUIBAA Fedoua* Gastro-Entérologie
Pr. SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie
Pr. SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. SEDDIK Hassan* Gastro-Entérologie
Pr. ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique
Pr. ZINE Ali* Traumatologie Orthopédie
Avril 2013
Pr. EL KHATIB Mohamed Karim* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. GHOUNDALE Omar* Urologie
Pr. ZYANI Mohammad* Médecine Interne
2- ENSEIGNANTS – CHERCHEURS SCIENTIFIQUES
PROFESSEURS / PRs. HABILITES
Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie
Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie – chimie
Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie
Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique
Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine
Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques
Pr. BOURJOUANE Mohamed Microbiologie
Pr. BARKYOU Malika Histologie-Embryologie
Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie – chimie
Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie
Pr. DRAOUI Mustapha Chimie Analytique
Pr. EL GUESSABI Lahcen Pharmacognosie
Pr. ETTAIB Abdelkader Zootechnie
Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie
Pr. HAMZAOUI Laila Biophysique
Pr. HMAMOUCHI Mohamed Chimie Organique
Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire
Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie
Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique
Pr. REDHA Ahlam Chimie
Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie
Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie
Pr. ZELLOU Amina Chimie Organique
Mise à jour le 09/01/2015 par le Service des Ressources Humaines
Au TOUT-PUISSANT ALLAH,
Le Clément, le miséricordieux
Pour m’avoir donné la force nécessaire d’accomplir ce travail,
Je l’adorerais jusqu’à mon dernier souffle afin qu’il guide chacun de
A l’Ambassade de la République de Guinée au Maroc ;
A mon pays natal, la GUINEE CONAKRY Ce pays qui m’a tout donné et que j’aime tant, Qu’ALLAH me donne la force de te servir jusqu’à
mon dernier souffle !
Au Royaume chérifien du MAROC, Ce pays qui m’a accueilli et a contribué grandement à élargir mes connaissances,
A mon père,
ALPHA MAKANERA,
Jamais il n’a cessé de me soutenir dans mes études pour que je
réussisse,
J’espère avoir accompli un tes vœux les plus chers en soutenant cette
thèse.
A ma mère,
FATOUMATA GANDEKA,
Celle pour qui mon existence n’aurait aucune valeur,
Je me réveillerai chaque jour pour m’atteler à faire ton bonheur,
A mes sœurs :
MAKANERA Salematou, MAKANERA Aïssatou, MAKANERA
Aicha, MAKANERA Hadja, MAKANERA Fatoumata, MAKANERA
Yarie, MAKANERA Aminata, MAKANERA Kadiatou, MAKANERA
M’Mahawa, MAKANERA Bintou
Merci vos affections et soutiens !
A mes frères :
MAKANERA Mohamed, MAKANERA Sankoumba,
MAKANERA Amadou, MAKANERA Ousmane, MAKANERA
M’Bemba, MAKANERA Issiaga, MAKANERA Babin, MAKANERA
A mes amis:
DIOP Moussa, CONDE Seydina Ali Badara, KABA Mohamed
Lamine Kairaba, KABA Mamady, BARRY Mamadou Moussa, CONDE
Salif, DIALLO Ibrahima Diogo, SAKOUVOUGUI Pokpa, ZADY
Ouraga, KAKOU Stéphane, BARRY MamadouMaladho, DIALLO
Moustapha, BALAMOU Henri Cécé, BALDE Mamadou Saliou, SOW
Abdoulaye, BAH Ibrahima, DIALLO Mamadou Labo, KONATE
Aboubacar Sidiki, SANDOUNO Tamba Marc, TOUPOU Lancinet,
BERETE Mame, GOITA Adam, KOUROUMA Kabafing
A mes collègues de l’ASEGUIM, particulièrement:
LOUA Michel, SOUMAH Elise, DIALLO Mamadou Cherif,
KEITA Mamoudou, BALDE Amadou Djouldé, DIALLO Amadou Oury,
DIALLO Kadiatou, CISSOKO Madina, DIANE Thierno, TOURE
Youssouf, TOURE Dudu
A notre Maitre et Président de thèse
Monsieur le Professeur JAMAL TAOUFIK
Professeur de Chimie thérapeutique
C’est un immense honneur que vous nous faites en siégeant dans
notre jury.
Malgré vos multiples sollicitations, vous restez toujours au service
des étudiants, votre disponibilité suscite l’admiration.
A notre Maitre et Rapporteur de Thèse
Madame le Pharmacien Colonel OUZZIF Zohra
Professeur de Biochimie
Chef de service du laboratoire de Biochimie de l’HMIMV
D’abord mon Maitre de stage puis, Maitre de thèse, ce travail
n’aurait jamais pu aboutir sans votre implication.
C’est en assistant à la présentation de certaines des thèses que vous
avez encadrées que j’ai voulu être encadré par vous afin de bénéficier de la
rigueur et de la qualité qui transparaissaient dans ces thèses : je dois
avouer que je ne fus pas déçu et vous avez été largement à la hauteur de
mes attentes.
Pour votre professionnalisme et vos qualités humaines, je vous
remercie du fond de mon cœur !
A notre maître et juge de thèse
Madame le Professeur GHISLANE BELMAJDOUB
Professeur d’Endocrinologie
Professeur, nous sommes très sensibles à l’honneur que vous nous
faites en acceptant de juger notre travail de thèse.
Nous avons apprécié votre accueil et vos qualités professionnelles.
Merci, cher Maitre, de nous faire bénéficier de votre expérience.
A notre maître et juge de thèse
Monsieur le Professeur YASSINE SEKHSOKH
Professeur de Microbiologie
Professeur, nous vous remercions d’avoir accepté de juger notre
travail de thèse.
Nous avons pu apprécier vos qualités humaines et professionnelles.
Veuillez trouver ici, cher Maitre, l’expression de nos sincères
A notre maître et juge de thèse
Monsieur le professeur JAMAL LAMSAOURI
Professeur de Chimie thérapeutique
Professeur, nous vous remercions d’avoir accepté de juger notre
travail de thèse.
Nous ne saurons exprimer ici tout l’honneur que vous nous faites en
siégeant dans notre jury.
Pour votre humanité, veuillez accepter cher Maitre, l’expression de
notre reconnaissance.
Monsieur le professeur ABDELILAH DAMI
Professeur, nous vous remercions pour l’aide précieuse dans notre
travail de thèse.
Pour vos qualités humaines et votre professionnalisme, veuillez
trouver ici cher Maitre, l’expression de notre reconnaissance.
LISTE DES
ILLUSTRATIONS
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Facteurs de maîtrise d’une méthode (diagramme d’Ishikawa) 7
Figure 2 Schéma illustrant le concept d’incertitude des mesures 10
Figure 3 Histoire de l’hémoglobine humaine 34
Figure 4A Figure 4B
Représentation tridimensionnelle de la myoglobine de cachalot Représentation tridimensionnelle d’un tétramère
d’hémoglobine
35
Figure 5 Formation de l’HbA1c 37
Figure 6 Automate G7 de chez Tosoh Biosciences 52
Figure 7 Automate DXC 800® de chez Beckmann-Coulter 53
Figure 8 Automate Capillarys® de chez Sébia 54
Figure 9 Courbe de linéarité (HbA1c) 62
Figure 10 Différence entre les valeurs G7-DXC800 (HbA1c) 66
Figure 11 Rapport entre les valeurs G7/DXC800 (HbA1c) 66
Figure 12 Courbe de corrélation entre les valeurs de G7 et DXC800 (HbA1c)
67 Figure 13 Courbe de corrélation entre les valeurs de G7 et Capillarys
(HbF)
69 Figure 14 Courbe de corrélation entre les valeurs de G7 et Capillarys
(HbA2)
69
Figure 15 Représentation schématique des chromatogrammes pour la mesure de l’HbA1c
LISTE DES TABLEAUX
Tableau 1 Principales caractéristiques des référentiels envisageables
pour la validation de technique 18
Tableau 2 Différents modules à programmer en fonction des stratégies à
déployer 20
Tableau 3 Caractéristiques générales des principes de dosage de
l’HbA1c 38
Tableau 4 CV (%) moyen des différentes méthodes disponibles (tout
automate, tout laboratoire) 39
Tableau 5 Résultats de l’HbA1c en % et leur correspondance en
mmol/mol 39
Tableau 6 Situations où le dosage d’HbA1c est susceptible de ne pas
refléter la glycémie moyenne 40
Tableau 7 Explication de la contamination inter-échantillons 58 Tableau 8 Résultats de l’étude de la répétabilité (HbA1c) 61 Tableau 9 Résultats de l’étude de la reproductibilité (HbA1c) 61 Tableau 10 Résultats de l’étude de la linéarité (HbA1c) 62 Tableau 11 Résultats de l’étude de la Stabilité de l’échantillon (HbA1c) 63 Tableau 12 Résultats de l’étude de l’inexactitude (HbA1c) 63 Tableau 13 Résultats de l’étude de la justesse (HbA1c) 64 Tableau 14 Résultats de l’Approche de l’Incertitude (HbA1c) 64 Tableau 15 Résultats de l’étude de la contamination inter-échantillons
(HbA1c) 65
Tableau 16 Résultats de l’étude de la répétabilité (Dosage HbA2/F) 68
Tableau 17 Techniques utilisées pour le dosage de l’HbA1c (%
LISTE DES ABREVIATIONS ADA Association américaine de diabétologie
ARIC Atherosclerosis Risk In Communities Study
CE Conforme aux Exigences
CIQ Contrôle Interne de Qualité
CO Monoxyde de carbone
COFRAC Comité Français d’Accréditation
CQ Contrôle de Qualité
CV Coefficient de Variation
DMDIV Dispositif Médical de Diagnostic In Vitro EADS Association européenne de diabétologie EEQ Evaluation Externe de Qualité
GBEA Guide de Bonnes Exécution d’Analyses HAS Haute Autorité de Santé
Hb Hémoglobine
HbA1c Hémoglobine glyquée
HGPO Hyperglycémie provoquée per os
HMIMV Hôpital Militaire d’Instruction Mohamed V HPLC Chromatographie Liquide Haute Performance IFCC International Federation of Clinical Chemistry ISO Organisation Internationale de Standardisation LED Diode électroluminescente
LBM Laboratoire de Biologie Médicale
NGSP National Glycohemoglobin Standardization Program
NO Monoxyde d’azote
NHANES National Health and Nutrition Examination Survey
O2 Dioxygène
SFBC Société Française de Biochimie Clinique SFD Société Francophone de Diabète
SH GTA Section Humaine Guide Technique d’Accréditation de vérification/validation SSED Société Suisse d’Endocrinologie et Diabétologie
INTRODUCTION ... 1
PARTIE THEORIQUE ... 4
I. VERIFICATION/VALIDATION DE METHODES EN BIOLOGIE
MEDICALE ... 5
A. Choix et maitrise des méthodes ... 6
B. Définitions et terminologie ... 8
1. Vérification ... 8
2. Validation ... 8
3. L’état de l’art ... 8
4. Méthode de mesure ... 8
5. Méthode quantitative ... 8
6. Coefficient de variation ... 9
7. Erreur ... 9
8. Série ... 9
9. Fidélité ou précision ... 9
C. Vérification/ Validation de méthodes : Une exigence dans les référentiels
de qualité ... 11
1. Le Guide de Bonnes Exécution d’Analyses (GBEA) ... 11
2. La norme ISO NF 9001 Version 2008 ... 12
3. La norme ISO NF 15189 ... 13
4. La norme ISO NF 22870 ... 15
D. Conditions et démarches à suivre pour la validation des méthodes ... 16
1. Conditions de Vérification/ Validation de méthodes ... 16
2. Démarche à suivre pour la Validation/ vérification des méthodes ... 17
2.1 Les étapes à suivre ... 17
2.2 Protocole d’évaluation de la procédure vérification/validation ... 18
2.2.1 Référentiel ... 18
2.2.2 Etapes techniques ... 22
2.2.3 Description des modules ... 23
II. HEMOGLOBINE, HEMOGLOBINE GLYQUEE A1C,
HEMOGLOBINOPATHIE ... 32
A- Hémoglobine... 33
1- Structure des hémoglobines humaines ... 33
2- Différentes hémoglobines humaines... 35
B. Hémoglobine glyquée A1cet diabète ... 36
1- Qu’est-ce que l’hémoglobine glyquée A
1c? ... 36
2- Standardisation des dosages de l’HbA
1C... 37
3- Place du dosage de l’Hb A1c dans l’exploration biologique et la prise en
charge du diabète sucré ... 40
3.1- Paramètre de surveillance et de suivi de Diabète ... 40
3.2- Paramètre de Diagnostic de Diabète ... 42
C. Hémoglobinopathies ... 44
1- Les hémoglobinopathies qualitatives ou structurales ... 45
2- Les hémoglobinopathies quantitatives ou thalassémies ... 46
3- Démarche diagnostique des hémoglobinopathies ... 47
PARTIE PRATIQUE ... 49
A.Automates ... 51
1.Automate G7® ... 51
2.DXC 800® ... 52
3.Capillarys® ... 53
B. Méthodes ... 55
1. Principes des méthodes utilisées ... 55
1.1- Principe de la technique de dosage utilisée sur le G7 (HPLC) ... 55
1.2-Principe de la technique d’inhibition immunoturbidimétrique ... 55
1.3-Principe de l’électrophorèse Capillaire ... 56
2. Protocole d’évaluation... 56
II.RESULTATS ... 60
A.Vérification de la technique de dosage de l’hémoglobine glyquée A
1csur le
G7 de chez Tosoh ... 61
1. Répétabilité ... 61
2. Reproductibilité ... 61
3. Etude de la linéarité ... 61
4. Stabilité de l’échantillon ... 63
5. L’inexactitude ... 63
6. Approche de la justesse ... 64
7. Approche de l’incertitude ... 64
8. Contamination inter-échantillons... 64
9. Comparaison de méthodes ... 65
B.Vérification de la technique de dosage de l’hémoglobine A
2et de
1. Répétabilité ... 68
2. Reproductibilité ... 68
3. Comparaison de méthodes ... 69
III.DISCUSSION ... 70
A. Dosage de l’hémoglobine glyquée HbA1c ... 71
1. La répétabilité ... 71
2. La reproductibilité ... 71
3. Etude de la linéarité ... 72
4. Etude de la stabilité ... 72
5. Evaluation de l’inexactitude ... 72
6. Evaluation de la justesse ... 73
7. Evaluation de l’incertitude ... 73
8. Contamination inter-échantillon ... 74
9. Comparaison de méthodes ... 74
B. Vérification de la technique de dosage de l’hémoglobine A
2et de
l’hémoglobine F sur le G7 de chez Tosoh... 77
1. Répétabilité ... 77
2. Comparaison de méthodes ... 77
CONCLUSION ... 78
RESUME
ANNEXES
BIBLIOGRAPHIE
1
2
La qualité des analyses de biologie médicale dépend de différents facteurs parmi lesquels le choix de la technique et sa vérification/ou validation jouent un rôle très important. Il appartient, en effet, au biologiste de bien sélectionner ses outils et de justifier objectivement ses décisions comme le rappelle le Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale [1] Chapitre I-2, opposable aux Laboratoires de Biologie Médicale marocains depuis 2010[1] ainsi que les exigences de la norme ISO 15189 relative à leur accréditation éventuelle [2].Ce souci ne peut être complètement satisfait en l'absence de référentiel. L’objectif est de s’assurer que la méthode convient à l’utilisation prévue mais aussi de fournir des résultats
suffisamment fiables pour ne pas entraîner d'erreur d'interprétation dans le cadre du diagnostic, du pronostic, de la surveillance, de la prévention, du dépistage et de l'épidémiologie des maladies.
La vérification/validation d’une technique consiste à évaluer les performances du
processus analytique, à les quantifier en suivant un protocole opératoire standardisé puis à les juger, par rapport à des critères définis.
Deux cas peuvent être facilement distingués :
Les dispositifs médicaux de diagnostic in vitro (DMDIV) utilisés dans les laboratoires de biologie médicale (LBM) ont fait l’objet de marquage CE garantissant leur conformité aux exigences de la directive européenne 98/79 CE. [3]L’une des exigences de la directive porte sur la vérification des performances annoncées. L’utilisation de tels dispositifs par les LBM apporte donc la garantie que les performances annoncées dans la documentation produite par le fournisseur résultent d’essais préalables. Les résultats de ces évaluations peuvent être réclamés aux fournisseurs par les autorités compétentes en cas d’anomalie constatée. Dans ce cas, l’évaluation au laboratoire se limitera à vérifier que les performances annoncées sont satisfaites dans les conditions réelles d’utilisation ;
3
Il n’existe pas de DMDIV ou ils ne sont pas applicables dans le laboratoire où il a été procédé une modification critique des conditions d’utilisation. Il s’agit alors d’une méthode développée par le laboratoire qui nécessitera une validation des performances plus approfondies [3].
C’est dans cette optique de respect des exigences du Guide de Bonne Exécution des Analyses : Chapitre I-2 (opposable aux laboratoires marocains depuis 2010) et de la norme ISO 15189 que, le laboratoire de biochimie de l’Hôpital Militaire d’Instruction Mohamed V (HMIMV) a voulu vérifier les performances de l’automate G7 de chez Tosoh acquis en fin 2013 ainsi que la technique HPLC qu’il utilise dans le cadre du dosage de l’HbA1c,marqueur de suivi et actuellement de dépistage du diabète et des fractions A2 et F de l’hémoglobine lors de l’étude des hémoglobinopathies.
Dans un premier temps, la partie théorique sera consacrée à placer le sujet dans son contexte avec des rappels sur les référentiels qualités applicables dans les laboratoires d’analyses de biologie médicale et le protocole de vérification/validation d’une méthode de dosage ainsi que sur la molécule d’hémoglobine, la forme glyquée A1c et les hémoglobines anormales
Dans la partie pratique, les outils utilisés, la méthodologie du travail et les résultats qui en découlent seront exposés. Puis, ces résultats seront comparés et discutés avant de conclure.
4
PARTIE
THEORIQUE
5
I. VERIFICATION/VALIDATION DE
METHODES EN BIOLOGIE MEDICALE
6
Le respect des règles d’assurance qualité des laboratoires oblige à procéder à la validation des techniques en préalable à leur utilisation et à le justifier.
En effet, le choix de la technique et sa fiabilité est l’un des facteurs déterminants des résultats des analyses de biologie médicale.
C’est une responsabilité qui incombe au biologiste. Ce dernier doit sélectionner ses outils et méthodes et les valider en vue d’assurer la transférabilité des résultats dans la mesure du possible, comme le recommandent les référentielles qualités. Il s’agit d’une exigence du système « Assurance qualité » et un prérequis indispensable dans le cadre d’accréditation des laboratoires selon les normes ISO 17025 ou 15189 [4].
A. Choix et maitrise des méthodes
La biologie médicale est devenue, à la suite d’une évolution profonde de l’approche médicale et de la connaissance scientifique, un élément crucial du parcours de soins, déterminant pour le diagnostic, l’évaluation pronostique, le suivi ainsi que la prise en charge thérapeutique de la majorité des pathologies.
Pour cela, le choix des méthodes d’analyses ne se fait plus au hasard, mais selon des critères définis, relatifs au principe de la technique et sa fiabilité, aux avancées technologiques intégrant l’automatisation et l’informatisation de l’équipement, à la bibliographie, aux exigences de la clientèle, au coût, ….
Par ailleurs, l’exactitude et la fiabilité d’un essai, examen ou analyse réalisé ne dépendent pas uniquement du personnel (formation, habilitation formalisée, compétence), des installations et conditions ambiantes (locaux, qualité de l’eau, température, stabilité de l’alimentation électrique, humidité…), des équipements, mesurage, conditions de préparation, de manutention, mais aussi des méthodes et leur validation ou vérification éventuelle.
Ce qui revient à dire que la maîtrise de la méthode oblige à connaitre les 5M (Milieu, Méthode, Matériel, Main d’œuvre, Matière), comme le souligne la figure 1.
7
Matériel : machines, outils, équipement, maintenance, etc. recense les causes qui ont pour origine les supports techniques et les produits utilisés.
Main d’œuvre : directe, indirecte, motivation, formation, absentéisme, expérience, problème de compétence, ….
Milieu : environnement physique, lumière, bruit, poussière, localisation, aménagement, température, législation, ….
Méthode : instructions, manuels, procédures, modes opératoires utilisés,
Ou peut ajouter aux 5M deux critères supplémentaires (Management et Moyens financiers) pour obtenir les 7M [5].
8 B. Définitions et terminologie
1. Vérification
La vérification correspond à la confirmation par l’examen et l’établissement des preuves que les exigences spécifiées ont été satisfaites [7, 8].
2. Validation
La validation correspond à la confirmation par examen et apport de preuves objectives du fait que les prescriptions particulières en vue d’une utilisation prévue et déterminée sont remplies.
«La validation de méthode» correspond à l’ensemble des procédures à mettre en œuvre pour s’assurer qu’une méthode présente la fiabilité requise pour répondre aux exigences de qualité dans l’état actuel de l’art [7, 8].
3. L’état de l’art
II représente le niveau de performances analytiques obtenues, à un moment donné, dans un certain nombre de laboratoires. Il est, en général, établi à partir des résultats des programmes de contrôle de qualité intra et/ou inter laboratoires. Le niveau de performance atteint par un certain nombre de laboratoires parmi ceux qui favorisent les meilleurs résultats pourrait constituer un objectif à atteindre pour tous [7].
4. Méthode de mesure
C’est une description générique logique des opérations mises en œuvre dans un mesurage [9].
5. Méthode quantitative
C’est une méthode fournissant un résultat chiffré, sur une échelle continue, dont les limites basses et hautes sont connues, en relation directe avec une quantité ou une activité donnée de l’analyte à mesurer [7].
9 6. Coefficient de variation
Il s’agit du rapport de l’écart type et la moyenne pour un caractère non négatif. 7. Erreur
Il s’agit de la différence entre la valeur mesurée d’une grandeur et une valeur de référence.
8. Série
Il s’agit de conditions expérimentales aussi représentatives que possible de la variabilité de l’utilisation de la méthode en routine (jour, opérateur, appareillage, etc.) [8].
9. Fidélité ou précision (Figure 2)
La fidélité ou précision exprime l’étroitesse de l’accord entre les indications d’une valeur mesurée obtenues par des mesures répétées du même échantillon dans des conditions spécifiées [7].La fidélité fournit une indication sur les erreurs dues au hasard. Elle traduit uniquement la distribution des erreurs aléatoires et n’a aucune relation avec la valeur vraie ou spécifiée. L’étude de la fidélité peut inclure :
La répétabilité mesurée dans les conditions : Même procédure de mesure, même operateur, même système de mesure, même condition de fonctionnement, même milieu, même objet de mesure pendant une courte période de temps. Il est recommandé d’utiliser au maximum deux niveaux de concentration [7, 8].
La fidélité intermédiaire (reproductibilité intra-laboratoire) correspondant aux conditions où les résultats d’essais indépendants sont obtenus par la même méthode en utilisant des échantillons identiques dans le même laboratoire et des conditions opératoires différentes (operateur, étalonnage, lot de réactifs, etc..) pendant un intervalle de temps donné. Elle est établie sur au moins 15 jours avec 30 déterminations et à deux niveaux [7, 8].
10
11
C. Vérification/ Validation de méthodes : Une exigence dans les référentiels de qualité
1. Le Guide de Bonnes Exécution d’Analyses (GBEA)
Il s’agit d’un référentiel actuellement opposable à tout laboratoire de biologie médicale au Maroc, depuis 2010.
La parution en France de ce texte réglementaire et obligatoire, défini en annexe de l’arrêté du 02 Novembre 1994, a été un événement important pour tous les laboratoires privés et publics. Cinq ans après, le GBEA a été modifié par l’arrêté du 26 Novembre 1999 publié au Journal Officiel le 11 Décembre 1999. Les principales évolutions portent sur l’instrumentation, en particulier le suivi métrologique des équipements, la gestion des réactifs, l’informatique, le transport des échantillons biologiques et la mise en œuvre des techniques de biologie moléculaires.
Le GBEA comprend les règles de fonctionnement concernant l’organisation en termes de personnel, l’installation et l’instrumentation. Une partie importante est consacrée à l’exécution des analyses ; elle précise toutes les étapes à formaliser par les documents écrits [11].
Le GBEA indique (chapitre I.1) que «C’est au biologiste qu’incombe le choix des méthodes optimisées, utilisées dans un grand nombre de laboratoires et recommandées par les sociétés scientifiques nationales et internationales de biologie ou, le cas échéant, validées par lui-même à condition qu’elles permettent, dans la mesure du possible, le transfert des résultats» et (chapitre III. 1) que «des procédures opératoires doivent être techniquement validées afin d’assurer la qualité des résultats » [12].
Le GBEA Marocain [12] est prévu par l’article 55 de la loi N° 12-01, publié dans le Bulletin Officiel N° 5892 -11 hijab 1431 (18-11-2010). Son application a pris effet, logiquement dès novembre 2010 [13].
12 2. La norme ISO NF 9001 Version 2008
La norme ISO 9001:2008 est l'une des plus connues. Elle est mise en œuvre par plus de 800000 entreprises dans 162 pays. Elle est devenue la référence internationale des exigences en matière de management de la qualité dans les relations interentreprises. La norme ISO 9001 aide les entreprises de tout type et de toute taille à «manager la qualité».
Cette norme est désormais reconnue mondialement comme la «norme générique des systèmes de management de la qualité». Elle peut s'appliquer à n'importe quel type d'entreprise, petite ou grande, quelle que soit son activité, ses produits ou ses services.
Les termes «systèmes de management» font référence à la structure mise en œuvre par l'entreprise pour gérer ses processus ou ses activités commerciales. Cette structure transforme l'apport de ressources en un produit ou un service satisfaisant les objectifs commerciaux de l'entreprise, conforme aux exigences de qualité du client et conforme aux réglementations.
La norme fournit le cadre des conditions de management requises pour satisfaire le client, pour définir une approche de management et pour favoriser l'amélioration continue des performances.
La norme ISO 9001 est basée sur des principes de management qui peuvent servir de cadre aux dirigeants des entreprises pour favoriser l'amélioration des performances.
Dans la version 2008, les exigences sont regroupées en six chapitres [14].
C’est au chapitre 7.1 (Planification de la réalisation du produit) que l’on retrouve les exigences relatives à la validation : «…Lors de la planification de la réalisation du produit,
l’organisme doit déterminer, les activités requises de vérification, validation, surveillance, mesure, contrôle et essais spécifiques au produit et les critères d’acceptation du produit ».
Dans le chapitre 7.3.1 de la même norme (Planification de la conception et du développement), il est également dit que : « L’organisme doit planifier et maîtriser la
conception et le développement du produit. Lors de la planification de la conception et du développement, l’organisme doit déterminer les activités de revue, de vérification et de validation appropriées à chaque étape de la conception et du développement».
13
Le chapitre 7.3.6 (Validation de la conception et du développement) stipule aussi que «
la vérification de la conception et du développement doit être réalisée conformément aux dispositions planifiées (voir 7.3.1) pour s’assurer que les éléments de sortie de la conception et du développement ont satisfait aux exigences des éléments d’entrée de la conception et du développement.
Les enregistrements des résultats de la vérification et de toutes les actions nécessaires doivent être conservés (voir 4 .2.4) ».
Les exigences sont relatives à la fois à l’organisation, à la conformité des produits ou prestations de services, au bon fonctionnement des équipements, l’environnement…. Les axes prioritaires sont : le client, le leadership, les ressources et l’amélioration continue.
Dans le cas des laboratoires de biologie, les clients sont les médecins prescripteurs et aussi les patients. Cette norme permet d’accroître la satisfaction des clients et de démontrer que les produits sont conformes à leurs attentes et aux exigences réglementaires applicables.
Elle peut conduire de surcroît à l’obtention d’une certification résultant d’une démarche volontaire.
3. La norme ISO NF 15189
La norme internationale ISO 15189 [4] est beaucoup plus spécifique comme son nom l’indique : « Laboratoires d’analyses de biologie médicale. Exigences particulières concernant la Qualité et la Compétence ».
En France, la réforme de la biologie médicale, via l’ordonnance du 13 Janvier2010, réaffirme la médicalisation de la discipline et souligne le droit de chaque patient d’accéder à une biologie médicale de qualité prouvée et payée à sa juste valeur [15].
Dans ce nouveau contexte juridique, le biologiste a un rôle médical à part entière et réaffirme son rôle dans le parcours du patient. En liaison avec le médecin clinicien, le biologiste devient responsable de la totalité de l’acte médical appelé dorénavant examen de biologie médical [15].L’ordonnance institue un régime d’accréditation obligatoire selon la
14
Actuellement, cette norme est adoptée dans le monde entier, comme seul référentiel pour l'accréditation des laboratoires de biologie médicale.
Elle conjugue les exigences du système qualité de la norme NF EN ISO 9001 : version 2000 et les exigences techniques propres aux analyses de biologie médicale, avec une partie « exigences relatives au management » et une partie « exigences techniques » qui prennent en compte l’ensemble de l’analyse y compris les phases pré et post-analytiques. Son sommaire est très proche de celui de la norme NF EN ISO/CEI 17025. C’est le premier référentiel normatif spécifique qui couvre la totalité de l’activité des laboratoires de biologie médicale [16, 17].
Ses exigences techniques comptent huit chapitres : 1 .PERSONNEL
2 .LOCAUX 3. EQUIPEMENTS
4. PROCEDURES PRE ANALYTIQUES 5. PROCEDURES ANALYTIQUES
6. MAITRISE DE LA QUALITE DES METHODES D’ANALYSE 7. PROCEDURES POST ANALYTIQUES
8. COMPTES RENDUS DES ANALYSES
Dans cette norme, la validation est retrouvée dans le chapitre 5.5.2 qui stipule: «le laboratoire doit utiliser uniquement des procédures validées pour s’assurer qu’elles conviennent à l’utilisation prévue. Les validations doivent être aussi approfondies que nécessaires pour répondre aux besoins de l’application ou du domaine d’application concerné(e).
Le laboratoire doit enregistrer les résultats obtenus et la procédure utilisée pour la validation. Les méthodes et les procédures sélectionnées doivent être évaluées et donner des résultats satisfaisants avant d’être utilisées pour les analyses médicales. Une revue des
15
procédures par le directeur du laboratoire ou une personne désignée doit être réalisée à l’origine à intervalles définis. Ces revues doivent être documentées».
La première version française de la norme est parue en 2003, la seconde édition a suivi en 2007 et la dernière est apparue en 2012.
C'est la seule norme aujourd'hui reconnue comme spécifique à la profession de la biologie médicale.
4. La norme ISO NF 22870 [18]
C’est une norme internationale fournissant des exigences spécifiques des analyses de biologie délocalisées destinée à être utilisée conjointement à l’ISO 15189.
Les exigences de cette norme s’appliquent lorsque les analyses de biologie délocalisées sont réalisées dans un hôpital ou une clinique ou encore par un organisme de santé prodiguant des soins ambulatoires.
L’auto-test par les patients à domicile ou dans un dispensaire est exclu, mais certains éléments de la présente norme internationale peuvent s’appliquer.
Ses exigences comptent deux chapitres importants: 4. EXIGENCES RELATIVES AU MANAGEMENT 5. EXIGENCES TECHNIQUES
Dans le chapitre 4.1 (Organisation et management) il est stipulé : « Le management des laboratoires d’analyses de biologie médicale doit planifier et élaborer les processus nécessaires pour les analyses de biologie délocalisées. Les éléments comme la vérification, la
validation, la surveillance requises des activités spécifiques des analyses de biologie
délocalisées doivent être pris en compte».
Le paragraphe 5.1.2 (a) de cette même norme stipule 5.3.2 (b) « Le directeur du laboratoire, ou une personne qualifiée désignée, doit être responsable du choix des critères et de la fourniture du matériel, des matériaux et des réactifs. Les performances des réactifs, trousses et matériels doivent être vérifiées avant l’utilisation de routine».
16
D. Conditions et démarches à suivre pour la validation des méthodes
1. Conditions de Vérification/ Validation de méthodes
La qualité du résultat d’analyse de biologie médicale dépend de nombreux facteurs dont l’un des plus déterminants est représenté par la fiabilité des techniques de mesures adoptées (instruments, analyseurs, réactifs, calibrateurs). Pour s’assurer de leur performance, des évaluations sont nécessaires, comme cela a déjà été souligné et permettent en fonction des critères définis de les valider, comme le recommande la règlementation [4, 12, 14].
En effet, les méthodes reconnues (DMDIV marqués CE ou méthodes « fournisseurs »), sont à priori validées dans leur domaine d’application. Dans le cadre des normes NF EN ISO 15189 et 22870, le LBM doit, pour ses méthodes, vérifier qu’elles sont utilisées dans leur domaine d’application, qu’elles correspondent aux besoins de ses clients (patients/prescripteurs) et qu’elles sont maîtrisées au sein du laboratoire, il s’agit d’une («
vérification de méthodes portée A»). Dans ce cas, il n’est pas demandé aux laboratoires
d’effectuer de nouveau la caractérisation approfondie des techniques ou des analyseurs.
Des études ont déjà été réalisées par les fabricants qui annoncent les performances de leurs méthodes. Il est demandé au LBM de procéder à une vérification lors de la mise en application, appelée vérification de performances sur site [7].
En revanche, dans le cas de la (« validation de méthode-portée B»), le LBM doit caractériser les critères de qualité de la méthode et la valider dès lors qu’il ne s’agit pas d’une méthode reconnue, méthode développée par le laboratoire, ou que celle –ci est employée hors de son domaine d’application (modification de la prise d’essai/milieu biologique…).
Le biologiste doit alors s’appuyer sur la documentation technique du fournisseur, il doit évaluer et apprécier ces informations à la lueur des recommandations ou des textes réglementaires, des attentes du prescripteur, des critères de performance proposés par les sociétés savantes. Ce travail d’expertise est la base du métier de biologiste médical [7, 19].
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Le laboratoire doit réaliser un protocole de validation lui permettant de démontrer, de vérifier que la méthode fonctionne correctement dans les conditions de laboratoire et qu’elle donne des résultats fiables pour les patients.
2. Démarche à suivre pour la Validation/ vérification des méthodes 2.1 Les étapes à suivre
La vérification/validation proprement dite comprend 3 étapes : L’étude des documents bibliographiques.
La détermination des critères de performance pertinents à établir et le choix des limites d’acceptabilité correspondantes pour la méthode.
La réalisation des vérifications expérimentales selon la procédure établie par le LBM
Le choix de critères de performance (fidélité, justesse…) et les limites d’acceptabilité (seuil) pour une méthode donnée doit se faire préalablement à l’étude expérimentale.
Il doit refléter l’état de l’art et la pertinence clinique. Il peut s’appuyer sur des recommandations de sociétés savantes, de groupes de travail de conférences de consensus, de publications scientifiques, sur des valeurs limites utilisées pour la gestion du CIQ, sur des résultats de campagnes de comparaison inter laboratoires,…et sera confronté aux données du fournisseur.
Les limites d’acceptabilité choisies doivent être adaptées et notifiées pour chacun des examens réalisés et pour chacun des niveaux ; elles doivent être en adéquation avec les besoins cliniques [7].
Concernant le choix des valeurs cibles lors de la validation de méthodes, la conférence de consensus établie en 1999 à Stockholm propose une hiérarchie de modèles applicables [20].Les exigences cliniques figurent évidemment au sommet des possibilités à envisager. La limite de ce modèle réside dans l’hétérogénéité de besoins des prescripteurs. Un néphrologue n’a pas les mêmes attentes qu’un gynécologue concernant les performances relatives au
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dosage de la créatinine. Pour de trop rares analystes (HbA1c, triglycérides, cholestérol total, cholestérol LDL), il existe des conférences de consensus qui proposent des objectifs analytiques précis.
Cependant, pour la grande majorité des mesures, les laboratoires peuvent se référer à deux modèles facilement accessibles qui sont mis en exergue dans un document technique par le COFRAC [7] .Il s’agit de celui des variations biologiques (RICOS) et celui de l’état de l’art (SFBC) comparés dans le tableau 1.
Tableau 1. Principales caractéristiques des référentiels envisageables pour la validation de techniques [21].
Model du CV RICOS Model du CV VALTEC
Avantages
Model international
Pluridisciplinaire (dont hématologie) Mise à jour régulière de la base de
données
Haut niveau hiérarchique selon la conférence de Stockholm
Reflète la pratique quotidienne
Valeur cible concentration dépendante
Rédigé en français
Inconvénients
Valeurs obtenues avec des effectifs trop limités (cas de certains analytes) Valeur cible concentration
dépendante
Pas d’objectifs pour les analytes indétectables à l’état physiologique (ex : troponine, lithium)
Mise à jour à envisager (1999)
Modèle franco-français Limité à la Biochimie et l’immunologie)
2.2 Protocole d’évaluation de la procédure vérification/validation
2.2.1 Référentiel
La commission de validation de techniques de la SFBC a publié un protocole de validation de techniques en 1986, complété en 1993 puis en 1999. Ce document permet la définition des normes d’acceptabilité (limites de reproductibilité de justesse et d’exactitude)