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LA GALERIE API 20E

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Academic year: 2022

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(1)

1ère STL Fiche technique n°31

LA GALERIE API 20E 1. Ensemencement en 1

er

jour

MODE OPERATOIRE GALERIE API 20E

Préparation de la galerie

o Répartir un peu d’eau dans les alvéoles du fond pour créer une atmosphère humide.

o Inscrire la référence de la souche sur la languette latérale de la boîte o Déposer la galerie DE FACON STERILE dans la boîte

Inoculation de la galerie

Ensemencer la galerie avec une pipette Pasteur stérile ouverte chargée en suspension, pointe posée sur un côté de la cupule, en laissant couler doucement la suspension dans la cupule. Tenir la boîte légèrement inclinée pour éviter la formation de bulles.

o Pour les caractères encadrés (CIT, VP, GEL) : remplir entièrement la cupule (tube et orifice)  mise en aérobiose

o Pour les autres caractères, ne remplir que le tube.

o Pour les caractères soulignés (ADH, LDC, ODC, H2S, URE) : remplir l’orifice de la cupule avec de l’huile de vaseline stérile  mise en anaérobiose

Refermer la boîte et mettre à l’étuve à 37°C pendant 18 à 24 heures.

2. Lecture en 2

ème

jour

 Vérification de la pureté de la souche

 Lecture de la galerie de façon ordonnée et méthodique après avoir vérifié la cupule du glucose.

 Lecture des éventuels autres tubes

 Identification

Prélèvement d’une SEULE colonie isolée

Suspension bactérienne dans 5 mL d’eau stérile Frottis fixé

coloré au Gram

Ensemencement : - une gélose VF

 type respiratoire - une gélose Hajna Kliger

 dégradation du lactose

N° souche

Ensemencement d’une Galerie API20E

Isolement sur gélose ordinaire 4

1

2

3

ATTENTION

(2)

1ère STL Fiche technique n°31

Tableau des Caractères de la Galerie API20E

Caractère Substrat Enzyme Produit(s)

formé(s) indicateur Réactif(s) ajouté(s)

Lecture +

Lecture

ONPG ONPG

ONPG-hydrolase ---

-galactosidase

ONP (jaune)

galactose JJaauunnee IInnccoolloorree ((11))

ADH Arginine

Arginine Dihydrolase

(ADH)

Ornithine NH3

CO2

RP RoRouuggee --

o orraannggee

JaJauunnee ( (22))

LDC Lysine

Lysine Décarboxylase

(LDC)

Cadavérine CO2

RP RoRouuggee --

o orraannggee

JJaauunnee ( (22)) ODC Ornithine

Ornithine Décarboxylase

(ODC)

Putréscine CO2

RP RoRouuggee --

o orraannggee

JJaauunnee ( (22))

CIT Citrate CO2

H2O BBT BBlleeuu VVeerrtt

((33)) H2S S2O32- (Thiosulfate

Réductase) S2- (H2S) Fer III NNooiirr IInnccoolloorree (jaune pâle)

URE Urée Uréase NH4+

(HCO3

-) RP RoRouuggee JJaauunnee

TDA Tryptophane

Tryptophane Désaminase

(TDA)

Acide indole pyruvique

NH3

TDA / immédiat (Fer III)

MaMarrrroonn B

Brruunn JJaauunnee

IND Tryptophane Tryptophanase

Indole A. pyruvique

NH3

James / immédiat

ou Kovacs / 2min RoRouuggee IInnccoolloorree J Jaauunnee

VP Pyruvate Acétoïne VP1 (KOH) + VP2

(-naphtol) / 10min RoRouuggee IInnccoolloorree ((55))

GEL Gélatine Gélatinase Acides Aminés NNooiirr

IInnccoolloorree (+particules

intactes)

GLU Glucose Acides BBT JJaauunnee

BlBleeuu oouu b

blleeuu--veverrtt ((44)) SUCRES

(AUXAN.)

Man, Ino, Sor, Rha, Sac, Mel,

Amy, Ara

Acides BBT JJaauunnee

B Blleeuu oouu bblleeuu vveerrtt

((44)) NO2-

/N2

NO3-

(cupule GLU)

Nitrate Réductase

NO2-

--- N2

Nit1 + Nit2 / 2min ---

(Zinc)

RoRouuggee -

-------------------------------- - I

Innccoolloorree

IInnccoolloorree ---

R Roouuggee

(1) une très légère couleur jaune est positive

(2) une couleur orange après 48H D’INCUBATION doit être considérée comme négative (3) le résultat se lit dans la cupule (zone aérobie)

(4) la fermentation commence dans la partie inférieure des tubes et l’oxydation dans la cupule (5) une légère coloration rose après 10 minutes doit être considérée comme négative

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