3ème Activité 6 : Extraction d’ADN

Question:

Consigne 1 : A partir de vos connaissances et de tout le matériel disponible listé ci-dessous, construire un protocole permettant de voir de quoi sont constitués les chromosomes. Vous répondrez à l’écrit sous la forme de votre choix (schéma, texte).

Aide : Pour réussir votre protocole pensez aux différentes « barrières » à franchir dans la cellule pour atteindre les chromosomes.

 Le liquide vaisselle permet de dissoudre les membranes des cellules et du noyau (constituées de lipides)

 Le broyage permet de séparer les cellules d’un organisme

 Le sel permet de faire exploser les cellules afin qu’elles libèrent leur contenu

 L’alcool à 70° (l’éthanol) permet de faire flotter le contenu des chromosomes dans le haut du tube à essai afin qu’il soit visible

 Le vert de méthyle est un colorant spécifique de l’ADN Document 2 : Le rôle de certains produits à utiliser

Consigne 2 : Réalisez l’expérience à l’aide de la fiche protocole puis réalisez un schéma de vos résultats.

Consigne 3 : A l’aide de l’observation du résultat de l’expérience rédigez une phrase qui permette de décrire le constituant des chromosomes.

3ème Activité 6 : Extraction d’ADN

T1 CH1

Document 1 : Matériel disponible.

Protocole:

1) Récupérez la matière vivante dont vous allez extraire l’ADN

2) Ajoutez-y une cuillère à café de sel fin. Ecrasez le tout à l'aide du mortier et du pilon. (note le pilon sert à écraser. Il est inutile de frapper. Ecrasez avec un mouvement rotatif).

But: Détruire les fibres du fruit. Le sel sert à isoler l'ADN d'autres molécules.

Vous devez obtenir une pâte homogène.

3) Ajoutez une cuillère à soupe de produit vaisselle. Ajoutez 5 cuillères à soupe d'eau.

But: le produit vaisselle détruit les membranes cellulaires.

Mélangez pour obtenir un mélange homogène. Il est normal d'obtenir de la mousse lors de cette étape.

4) Filtration du mélange: Mettez le filtre à café dans l'entonnoir. Mettez l'entonnoir au dessus d'un bécher.

Versez votre mélange dans le filtre et patientez le temps de recueillir le filtrat.

5) Au bout de Quelques minutes (demandez au professeur) versez le filtrat pur dans un tube à essai.

6) ajoutez de l'alcool au filtrat. (Maximum un quart du tube à essai). (professeur) 7) ajoutez 3 gouttes de Vert de méthyle, un colorant spécifique de l’ADN. (professeur) 8) observez: les filaments colorés en vert. Il s'agit du constituant des chromosomes.

Protocole:

1) Récupérez la matière vivante dont vous allez extraire l’ADN

2) Ajoutez-y une cuillère à café de sel fin. Ecrasez le tout à l'aide du mortier et du pilon. (note le pilon sert à écraser. Il est inutile de frapper. Ecrasez avec un mouvement rotatif).

But: Détruire les fibres du fruit. Le sel sert à isoler l'ADN d'autres molécules.

Vous devez obtenir une pâte homogène.

3) Ajoutez une cuillère à soupe de produit vaisselle. Ajoutez 5 cuillères à soupe d'eau.

But: le produit vaisselle détruit les membranes cellulaires.

Mélangez pour obtenir un mélange homogène. Il est normal d'obtenir de la mousse lors de cette étape.

4) Filtration du mélange: Mettez le filtre à café dans l'entonnoir. Mettez l'entonnoir au dessus d'un bécher.

Versez votre mélange dans le filtre et patientez le temps de recueillir le filtrat.

5) Au bout de Quelques minutes (demandez au professeur) versez le filtrat pur dans un tube à essai.

6) ajoutez de l'alcool au filtrat. (Maximum un quart du tube à essai). (professeur) 7) ajoutez 3 gouttes de Vert de méthyle, un colorant spécifique de l’ADN. (professeur) 8) observez: les filaments colorés en vert. Il s'agit du constituant des chromosomes.