L Cycline A et cancer

676

SY NTH ÈSE

médecine/sciences 1 .993 ; 9 : 676-83

E ugénia Lamas

Frédérique Zindy

Joëlle Sobczack

Patricia Paterlini

Jian Wang

Xavier Chenivesse

Berthold Henglein

Christian Bréchot

ADRESSE

---E . Lamas : chargée de recherche à l 'Inserm. F. Zindy : étudiante en thèse. J . Sobczack : maître de conférences des universités. P. Paterlini :

A ssistant hospitalo-universitaire. J . Wang : doc­ teur ès sciences. X. Chenivesse : docteur ès scien­ ces. B. Henglein : chargé de recherche à l 'Inserm. C . Brée hot : professeur des universités, praticien hospitalier. Inserm U . 370, C H U Necker, 1 56, rue de Vaugirard, 750 1 5 Paris, France.

Cycline A et cancer

La cycline A, assoctee à la protéine kinase p34 cdc2 , est

impliquée dans la transition G2/M du cycle . Elle s'asso­

cie aussi à la protéine kinase p33 cdk2 au cours de la

phase S du cycle. La cycline A participe à la formation

de complexes multimériques comprenant le facteur de

transcription E2F, la protéine kinase p33 cdk2 et la pro­

téine p 1 0 7 , homologue de la p 1 10 Rb. La modification de l'expression de la cycline A dans un cancer primitif du foie

humain, due à l' insertion de l'ADN du virus de l'hépa­

tite B dans le gène de cette cycline , de même que sa liai­

son à l' oncoprotéine E 1A de l ' adénovirus, suggèrent

qu'elle pourrait jouer un rôle important dans la carcino­ genèse humaine. Les études actuelles de la cycline A font le lien entre, d'une part, la machinerie du cycle cellulaire et, d' autre part, la prolifération cellulaire et l'expression

de certains gènes à effet oncogénique ou anti-oncogéni­

que . La cycline A pourrait , enfin, se révéler être un bon marqueur de cellules , plus particulièrement des cel­ lules tumorales . Dans cette optique , il serait intéressant

d'élargir les observations actuelles à divers types de cancer.

L

e s transitions G l iS et G2/M , événements clés du cycle cellulaire, sont contrô­ lées par un certain nombre de molécules régulatrices,

parmi lesquelles les cyclines. Les cyclines sont les sous-unités régulatri­ ces d'une famille de sérine/thréonine protéine kinases regroupées actuelle­ ment sous le terme de kinases dépen­ dantes des cyclines ( cdk5) et dont le prototype a été la p34cdc2 kinase (mis n ° 1, vol. 6, p. 8) .

Des travaux récents montrent, en effet,

1 'existence d'une famille de protéine kinases apparentées à la p34cdc2 et

associées à différentes cyclines [ 1 - 1 1 ] .

Il est bien établi aujourd'hui, de la levure à l'homme , que la transi­ tion G2/M , contrôlant l'entrée en mitose des cellules, est réglée par l'association d 'une cycline de type B avec la protéine kinase p34 cdc2 • L 'activation de cette kinase nécessite son association physique avec la cycline et l' activité du complexe cdc2-cycline B est réglée par l'état de phosphorylation de la sous-unité cdc2 [ 2 , 3 , 1 2- 1 4] .

l'ADN, n'est pas encore élucidé chez les eucaryotes supérieurs . En revan­ che, chez la levure Saccharomyces cere­ visiae, le rôle de la p34 «1c28 - et de son équivalent p34cdc2 chez Schizosa­ charomyces pombe

-

dans la transi­ tion G l iS a été clairement montré . Chez S. cerevisiae, des cyclines G 1 (CLN 1 , 2 , 3), identifiées par des tests de complémentation, permettent l'activation de la p34cdc28 au moment où la cellule s'engage vers la phase S (star! point) [ 1 5 , 1 6] .

Les cyclines A et B ont été initiale­ ment définies comme des protéines qui s'accumulent pendant l'inter­ phase, puis se dégradent brutalement durant la mitose . Ce sont des cycli­ nes mitotiques ; en effet, la micro­ injection des ARNm des cyclines A et B dans les ovocytes de xénope induit leur maturation, et leur dégradation est indispensable pour que la cellule puisse sortir de la mitose [ 1 7 , 18]. La cycline A comme la cycline B s'asso­ cient à la p34 cdc2 et permettent son activation [ 19] .

Cependant, ces deux types de cycli­ nes présentent des caractéristiques distinctes. En effet, l'accumulation de la cycline A précède celle de la cycline B ; la dégradation de la cycline A a lieu en prophase alors que la cycline B disparaît lors de la

rn;

:

l

-.

Cycline A

fi

82

p34Cdc2

transition métaphase -anaphase . L' activation du complexe cycline A­ cdc2 apparaît plus précocement que celle du complexe cycline B-cdc2 au cours du cycle [ 1 ] . Les cyclines A et B se distinguent également par leur localisation cellulaire : la cycline A est une p rotéine essentiellement nucléaire, alors que la cycline B est cytoplasmique et migre dans le noyau au moment de la rupture de l'enve­ loppe nucléaire [ 20-22 ] .

U n certain nombre d'éléments suggè­ rent que, chez les eucaryotes supé­ rieurs, la cycline A, outre son rôle en mitose, pourrait intervenir à un stade plus précoce, notamment dans la phase S en se liant à la p33 cdk2, pro­ che mais bien distincte de la p34«1c2 [ 1 0, 23] (figure 1). En effet, nous avons montré (voir cycline A et phase S, p. 679) que la cycline A est indispen­ sable à la synthèse d'ADN de cellu­ les épithéliales normales, alors que la cycline B ne l'est pas [2 1 ] . D'autres équipes ont confirmé ces résultats dans d'autres systèmes cellulaires [22, 24] . Toutefois, il est important de préciser que la cycline A n'a pas été trouvée chez tous les eucaryotes et que son rôle ne semble pas univoque chez tous les organismes. Ainsi, chez la drosophile, des embryons déficients en cycline A suivent un cycle

cellu-Dégradation CLN1 ,2,3 (levures) Cycline E Cycline D ? Cycline C cdk2 cdk : cdk3 Autres .. .

\.

cdk4 r-_.___

i ë

y

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l

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8;:

Dégradation Cycline A •

-

- - - • cdk2

Figu re 1

.

Cyclines et cycle cellulaire. Représentation schématique des dif­ férentes phases du cycle cellulaire : implication de la cycline A dans les pha­ ses S et G2/M du cycle.

laire qui s'arrête en G2 [25] . Par ail­ leurs, il a été suggéré, après des étu­ des in vitro chez le xénope , que la cycline A pourrait être impliquée dans le contrôle qui assure que l'entrée en mitose n'a lieu qu' après la fin de la phase S [26 ] .

L'implication de l a cycline A en G 1/S et S en fait une cible possible pour des agents carcinogènes. En particu­ lier, nous avons montré, dans un cancer primitif du foie, que l'ADN du virus de l ' hépatite B (HBV) s'intégrait dans le gène codant pour la cycline A humaine [27] . Par ail­ leurs, dans des cellules infectées par l'adénovirus du type 5, l'oncoprotéine virale E l A se lie à la cycline A [28] .

!

Intégration de l 'ADN du

virus de l'hépatite

8

dans

678

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Figure 2 . Cycline A (tumeur HEN}. Insertion de l'ADN du virus de l'hépa­

tite B dans le deuxième intron du gène de la cycline A dans un cancer primitif du foie (tumeur HEN) . Organisation génétique des transcrits hybrides (HBV­ cycline A) identifiés dans la tumeur " HEN " · Les exons codants du gène

cycline A sont représentés en rouge, les régions non codantes en blanc. Le génome viral intégré est représenté en gris et, pour la partie se retrouvant dans /'ARN hybride, en couleur bistre.

C 'est précisément l'identification du site d'intégration de l'ADN de l' HBV dans une tumeur précoce du foie qui nous a permis d'isoler et de séquen­ cer le gène de la cycline A (B. Hen­ glein, soumis pour publication). Dans cette tumeur, le tissu adjacent est his­ tologiquement normal (nous laissant supposer un effet direct de l' HBV sur la transformation hépatocytaire). L'ADN viral est intégré dans le deuxième intron du gène de la cycline A, entraînant une surexpres­ sion de deux ARN hybrides, initiés au promoteur PréS2/S de l' HBV ; ces ARN comprennent les séquences PréS2 et S délétées en 3 ' , fusionnées après épissage aux exons 2-8 de la cycline A avec conservation du cadre de lecture (figure 2). Dans cette tumeur , les transcrits normaux cycline A et HBV n'ont pu être mis en évidence . La protéine potentielle­ ment codée par ces ARN hybrides présente des caractéristiques très inté­ ressantes : il s'agirait, en effet, d'une protéine chimère de 430 acides ami­ nés dans laquelle les 1 52 acides ami­ nés de la partie N-terminale sont remplacés par 1 50 acides aminés des protéines virales PréS2-S alors que, dans les deux tiers de la partie C ­

terminale, la séquence de la cycline A contenant la cyclin box est intacte. Les séquences responsables de la

dégrada-tion de la cycline A sont localisées dans la partie N-terminale et sont donc délétées dans la protéine chi­ mère. Utilisant un système de dégra­ dation in vitro dans les ovocytes de xénope, nous avons pu effectivement

vérifier que la protéine HBV 1

cycline A n ' est pas dégradable (figure 3). Il est cependant frappant de constater que, malgré l'expression très importante des ARN hybrides, nous n'avons pas pu détecter la pro­

téine chimère . Cela peut s'expliquer soit par des modifications conforma­ tionnelles de la protéine empêchant sa reconnaissance aussi bien par des anticorps anti-cycline A que par des anticorps anti-PréS2/S , soit par un taux très faible d'expression [34] .

Le rôle potentiel de la protéine HBV /cycline A dans la transforma­ tion cellulaire est actuellement testé au laboratoire . Plusieurs hypothèses peuvent être émises pour expliquer l'implication éventuelle de la protéine chimère dans la carcinogenèse . Il est possible que cette protéine chimère non dégradable ait gardé la capacité de lier et d'activer les kinases p34cdc2 et p33 cdk2 , provoquant ainsi une synthèse d'ADN et donc une prolifé­ ration cellulaire prématurée et non réglée. Par ailleurs, la localisation de la cycline A pourrait être altérée par la présence des séquences virales

transmembranaire - et il est possi­ ble que la localisation cellulaire, plus que le taux d'expression de cette pro­ téine, puisse rendre compte des modi­ fications du phénotype . Enfin, nous avons vu que la protéine virale PréS2/S tronquée en C-terminal peut transactiver certains gènes cellulaires ; or, la partie N -terminale de la pro­ téine hybride inclut ce type de séquences.

1

Cycline A et phase S

De façon parallèle à ce travail, nous avons étudié l'expression de la cycline A dans des cellules épithélia­ les normales (hépatocytes de rat en culture primaire) au cours du cycle cellulaire. Les hépatocytes peuvent être maintenus en culture primaire pendant une période d'environ huit jours dans un milieu sans sérum, supplémenté en insuline et en dexa­ méthasone , en gardant une partie de leurs fonctions différenciées. Dans ces conditions, la synthèse d'ADN est fai­ ble. En revanche , dans un milieu sans sérum mais supplémenté en insuline, pyruvate et epidermal growth factor (EGF), elle est stimulée avec un maximum au troisième jour de cul­ ture . Nous avons montré que les ARN rn et la protéine de cycline A

sont uniquement détectés dans les

432

Dégradation Cyclin Box

90 432

1 52 430

N

PréS2/S Cyclin Box

hépatocytes stimulés par les facteurs de croissance. Le profil d'expression de la cycline A coïncide avec celui de la synthèse d'ADN, mesurée par 1 ' incorporation de la thymidine tri­ tiée , suggérant un rôle de la cycline A à la phase S du cycle cel­ lulaire. Afin de vérifier que ces obser­ vations in vitro reflétaient la situation in vivo, nous avons utilisé le modèle du foie de rat en régénération. Dans ce système, qui permet une synchro­ nisation partielle, les ARNm et la protéine de cycline A s'accumulent à partir de 24 heures (phase réplicative) et cela jusqu' à 32 heures (première division cellulaire) (figure 4, p. 681). Il nous a été possible de compléter cette étude par des expériences de micro­ injection : la micro-injection d'un plasmide contenant l'ADNe de la cycline A placé en orientation anti­ sens sous le contrôle d'un promoteur fort de SV 40 bloque la synthèse de l'ADN cellulaire des hépatocytes sti­ mulée par les facteurs de croissance . Cet effet est spécifique et n'est pas retrouvé pour la cycline B [2 1 ] . Des résultats semblables ont été obtenus après micro-injection d'anticorps anti­ cycline A dans des fibroblastes et des cellules HeLa [22, 24] . L'ensemble de ces résultats montre que la cycline A est nécessaire pour 1' accom­ plissement de la phase S dans les

cel-Protéine c Normale c L'i90 c HBV-cycline A Dégradation in vitro +

Figure 3. Structure de la protéine hybride HBV-cycline A . Représentation de la protéine chimère potentiellement codée par les transcrits hybrides dans la tumeur HEN.

Iules de mammifères en culture . La cycline A s ' associe à la p33 cdk2 ;

cette kinase est un élément régulateur important de la transition G 1/S. Le complexe cycline A-cdk2 est essentiel­ lement présent en phase S. Il semble donc, au moins dans les modèles de cellules de mammifères en culture , que la cycline A se lie à deux kina­ ses différentes, et cela en fonction des phases du cycle cellulaire [ 10, 35]. Le rôle de la cycline A en phase S sug­ gère qu'elle pourrait être impliquée dans la réplication de l'AD N cellu­ laire . Précisément, en collaboration avec F. Harper et E . Puvion, nous avons récemment observé, dans des cellules HeLa en culture, une co­ localisation de la cycline A et de l'antigène nucléaire de prolifération cellulaire (PCNA) au niveau de sites de synthèse de l'AD N cellulaire (identification par visualisation au microscope électronique de l'incorpo­ ration de bromodésoxyuridine) [36] . Ce résultat renforce notre hypothèse . Des données plus précises ont pu être obtenues par l'utilisation de systèmes acellulaires de réplication de l'ADN du virus S V 4 0 . E n p résence d'extraits cellulaires provenant de cel­ lules humaines en croissance expo­ nentielle (S- 1 00), l' antigène grand T (AgT) de SV40 permet la réplication d'un plasmide contenant l'origine de réplication de l ' AD N SV40 . Ce modèle expérimental a permis la purification , à partir des extraits cel­ lulaires, de plusieurs facteurs de répli­ cation humains agissant à différentes étapes de la réplication de 1' ADN. Les protéines actuellement identifiées et directement impliquées dans la synthèse d'ADN sont : les deux ADN polymérases ( l ' A D N polymérase a/primase et l'AD N polymérase D), la protéine de réplication A (RP-A), l'antigène nucléaire de prolifération cellulaire (PCNA), un facteur de réplication E (RFC) et les deux ADN topo-isomérases 1 et II.

680

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capacité à activer la réplication de l'ADN dans des extraits cellulaires en G 1 , le facteur RF -S a été partielle­ ment purifié à partir de cellules humaines : on a montré que le RF­ S contient une kinase cdc2 (la p34 cdc2) et que l'étape limitant l'acti­ vation de la kinase cdc2 à la transi­ tion G l iS pourrait être son associa­ tion à une cycline. En effet, l'addi­ tion de cyclines A ou B à des extraits cellulaires en G 1 augmente 1' initiation de la réplication de l'ADN. Par ail­ leurs, la protéine de réplication A (R P-A) possède une sous-u nité (RPA-32) dont la phosphorylation dépend du cycle cellulaire . La phos­ phorylation de la RPA-32 survient au moment de la synthèse d 'ADN. Il a été montré in vitro que les complexes cycline A-cdc2 , cycline B-cdc2 et cycline A-cdk2 peuvent phosphoryler la sous-unité RPA-32 et pourraient donc être considérés comme les kina­ ses in vivo de la RP-A. Cependant , une autre étude montre des résultats différents, suggérant que les cdk ne sont pas indispensables à la phos­ phorylation de RPA-32 . En effet, cette phosphorylation et 1 'association de RPA-32 à l'origine de la réplica­ tion ont été observées dans un extrait cellulaire en phase S dont les cdk ont été épuisés [3 7 -39 ] . Il est également frappant de constater que , dans ces systèmes in vitro , la cycline B est détectée dans des facteurs de réplica­ tion alors qu 'il n'existe aucun argu­ ment actuellement en faveur d'un rôle de la cycline B dans la phase S du cycle cellulaire .

Malgré les discordances entre diffé­ rentes équipes, il semble que des kinases dépendantes des cyclines sont impliquées dans une ou plusieurs éta­ pes du processus de réplication de l'ADN cellulaire . Bien que son rôle ne soit pas définitivement établi , la cycline A pourrait intervenir dans cette réplication. Cependant, d'autres cyclines, les cyclines G 1 et notam­ ment la cycline E , pourraient égale­ ment participer à la réplication de l'ADN .

1

Cycline A et régulation

transcriptionnelle

avec des protéines jouant un rôle dans le contrôle de la prolifération cellulaire, telles que le facteur de transcription E2F et la protéine p l 0 7 , homologue d e l a p l lO d u rétinoblas­ tome . Ces complexes contenant la cycline A semblent s'accumuler spé­ cifiquement à la phase S du cycle cel­ lulaire [40] . La protéine précoce E l A de l' adénovirus de type 5 a l a capa­ cité d'immortaliser des cellules épithé­ liales normales. Les domaines néces­ saires à la fonction d' immortalisation d ' E l A sont également ceux qui par­ ticipent à la liaison d ' E l A avec des protéines cellulaires. En effet, il a été montré par immunoprécipitation que la protéine pl lO du rétinoblastome ,

la p l 07, et la cycline A se trouvent

parmi les protéines se liant à E 1 A

dans les cellules infectées par l' adé­ novirus [41-44] . Par ailleurs, l'étude de la transcription du gène E2 de l'adénovirus a permis d' identifier le facteur de transcription E2F et de

montrer qu'il est indispensable à cette

transcription . Depuis, des sites pou­ vant lier E2F ont été identifiés sur un certain nombre de promoteurs de gènes qui, pour la plupart , sont impliqués dans la transition G 1/S du cycle (c-myc, c-myb, thymidine kinase, DHFR, ADN polymérase a) [40, 45-49]. E2F réglerait 1 'expression de

ces promoteurs. La cycline A se lie à

E2F dans un complexe

spécifique-ment identifié en phase S. Ce com­ plexe cycline A-E2F peut être disso­ cié par la protéine E l A , libérant le facteur E2F. De plus, la cycline A

s'associe à la protéine p l 07 , homolo­

gue de la p 1 1 0 Rb, régulateur négatif de la prolifération cellulaire . Les pro­ téines pl l O Rb et p l 0 7 possèdent tou­ tes deux un domaine de liaison (poc­

ket domain) qui permet 1' association

aux oncoprotéines virales E l A , à

l'antigène grand T de SV40 et à la

protéine E 7 du pap illomavirus

humain (HPV 1 6) . Cependant, la

liaison de la p l 07 à la cycline A se

réalise grâce à un domaine intermé­

diaire (spacer region) (figure 5). En revanche , la protéine p l l O Rb ne

Hépatocytes en culture primaire _{après hépatectomie partielle (HP)} Foie en régénération

A Non traités Traités A 3 cpm x 1 02 1 �19 ADN

I:

_lE

2

1 ncorporation I ncorporation

thymidine 3H thymidine 3H

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 0 1 6 24 30

Jours de culture Heures après HP

B

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

_B

0 16 20 24 26 28 30 32 kb kb 2,7 ... 2,7 ... Cycline A Cycline A 1 ,8 ... 1 ,8 ... 1 ... B2 m 1 ... B2 m

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3 2 3

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0 16 24 26 28 30 32 kb kb 55 ... Cycline A 55 ... - ... - -""'""" Cycline A

682

RÉFÉRENCES

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semble pas se lier directement à la cycline A [ 43 , 44] . La fonction répressive de la croissance cellulaire de la p l l O Rb est modulée par son état de phosphorylation, qui dépend de complexes cycline-cdc2 . La pro­ téine Rb est hypophosphorylée en G 1 et phosphorylée en S . La forme hypophosphorylée s'associe aux onco­ protéines virales ainsi qu 'à des pro­ téines cellulaires : c-myc, n-myc, E2F, Rb binding pro teins (RBP 1 , 2 , 3 . . . ) (46-50] . L a liaison de la forme hypophosphorylée en G 1 à ces pro­ téines cellulaires pourrait rendre compte de la répression par la pro­ téine Rb de la croissance cellulaire en G 1 . En revanche, à la fin de G 1 et en phases S/G2/M , Rb est sous forme phosphorylée et inactive [ 49, 5 1 ] . Des résultats récents, rapportés par l'équipe de Nevins, suggèrent cependant que ce modèle est proba­ blement trop simplifié : le cou­ ple E2F/Rb apparaîtrait en fait en phase S et non en phase G 1 (résultats non publiés). Le rôle de la phos­ phorylation dans l'inactivation de Rb a été bien illustré récemment par les travaux de Hinds et al. montrant que l'expression ectopique de cycline A et de cycline E peut induire la phos­ phorylation et l'inactivation de Rb

(52 ] .

F inalement, la protéine kinase p33 cdk2 participe aussi au complexe spécifique en phase S , qui est donc composé de E2F/p1 07/cycline Ncdk2 . Toutes ces observations montrent que la cycline A participe à une série de complexes multimoléculaires où elle est associée à diverses protéines ayant un rôle dans la croissance cellulaire (53-55 ] .

Actuellement, l e rôle précis d e la cycline A n'est pas encore bien éta­ bli. Cela dit, plusieurs hypothèses peuvent être émises : il a été montré que la protéine E2F possède un domaine de liaison à l'ADN . L'asso­ ciation du complexe cycline A/cdk2 kinase à une protéine de liaison de l'ADN pourrait cibler la kinase vers son substrat et/ou moduler son acti­ vité via sa phosphorylation. De plus, puisque des complexes cycline/cdk2 phosphorylent Rb, la cycline A pour­ rait annuler le blocage imposé par Rb dans la progression du cycle cel­ lulaire. La protéine p53 étant phos­ phorylée par ces mêmes complexes, la

Cycline A

1

E 1 A (Adénovirus)

\

s Cycline A - cdk2 p 1 07 E2F E2F

1

c-myc

!

Transmodulation N-myc DHFR Thymidine kinase Figure 5. Cycline A et régulation de la transcription. Illustration des liai­ sons de la cycline A avec la cdk2, la p 1 07 et Je facteur de transcription E2F, dans la phase S du cycle. Dissociation du complexe par l 'oncoprotéine E 1A de l 'adénovirus.

cycline A pourrait également modifier la fonction de cette protéine régula­ trice de la croissance cellulaire .

Cycline A

comme marqueur

de la prolifération

des cellules tumorales

in vivo :

application

en oncologie

Nous avons précédemment cité plu­ sieurs travaux suggérant que l'expres­ sion de cycline A est décelable en phases G l iS et jusqu' à la phase M . Nous avons étudié l'expression de la cycline A dans des cellules tumorales en prolifération in vivo. Cette étude a été réalisée chez des malades atteints de néoplasies hématologiques de dif­ férents types et de cancer primitif du foie. Les taux d' ARN et de protéine ont été déterminés respectivement par les techniques de slot blot et western blot. Les résultats de cette étude mon­ trent qu ' il existe une très forte cor­ rélation entre la quantité d' ARN et protéine de cycline A, et le nombre des cellules en phases S plus G2/M (estimé par cytométrie de flux) [56] . Dans la plupart des tumeurs humai­ nes, le taux des cellules qui rentrent dans un cycle cellulaire est générale­ ment bas. De plus, ces cellules tumo­ rales ont été souvent considérées

comme étant arrêtées en GO. Des études récentes suggèrent, au con­ traire, que ces cellules sont bloquées à la transition G l iS du cycle. Ainsi, les résultats obtenus indiquent que le taux d'expression de la cycline A devrait donner une bonne estimation du nombre des cellules tumorales qui s'engagent dans une division cellu­ laire . L ' utilisation de la cycline A (détectée sur coupes histologiques) en tant que marqueur de la prolifération cellulaire pourrait donc être complé­ mentaire de celle d'autres marqueurs tels que l'antigène nucléaire de pro­ lifération cellulaire (PCNA) et l' anti­ gène Ki67 . En effet, l'identification de marqueurs adéquats pour la pro­ lifération cellulaire représente encore un point essentiel en oncologie .

1

Conclusions

Ces dernières années ont permis une évolution considérable des connais­ sances sur le cycle cellulaire et les cyclines. Il est frappant de constater la convergence de deux domaines de recherche : le cycle cellulaire et 1 'oncogenèse. En ce qui concerne les cyclines, les résultats que nous avons rapportés, ainsi que ceux obtenus pour la cycline D 1 , suggèrent que des modifications de leur expression pour­ raient intervenir dans certaines étapes de la carcinogenèse . Pour la

cycline D l , en effet, une accumula­ tion des ARN a été décrite dans des tumeurs qui sont dues soit à des translocations chromosomiques, soit à une amplification de la région 1 1 q 1 3 , o ù le gène est localisé . Récemment, une activation en cis par insertion d'un provirus du virus de Moloney a été également rapportée. Il est donc probable que, dans l'avenir, la dis­ ponibilité de sondes correspondant aux différents éléments du cycle per­ mettra de mettre en évidence d'autres réarrangements dans des tumeurs humaines et d'identifier de nouveaux marqueurs directs de la prolifération tumorale [57-60] •

Summary

Cyclin A and cancer

Cyclin A is a multifunctional pro­

tein. I t associates to

p34cdk2

kinase and is thus involved in the G2/M transition of the cell cycle,

it associates also to

p33cdk2

during

the S phase. It has been found in multimeric protein complexes which include the E2F transcrip­

tion factor' the

p33 cdc2

kinase,

and the Rb P107 homologue. The modified expression of cyclin A in a human liver cancer, due to the insertion of hepatitis B viral DNA within the cyclin A gene , as weil as the binding of cyclin A to the oncogenic E lA viral protein in adenovirus infected cells, might have relevant implications in human carcinogenesis. Cyclîn A provides a link between studies directed to the cel! cycle machi­ nery and those aiming at elucida­ ting the modulation of cell proli­ feration and the regulation of gene expression by oncogenes and growth suppressor proteins. ln addition, cyclin A might also be considered as a marker for tumor cells proliferation in oncology. In this perspective it will now be of importance to extend these obser­ vations to different types of cancer.

TIRÉS A PART