Proposition de planning:
20 avril 1997:
reception de MP Carron a l'aeroport de Bangkok a 13h15 par JC Vincent et Miss Kannikar accompagnee d'un officier du RRIT,
installation a l'hotel, journee libre.
21 avril 1997:
reception de JL Jacob a l'aeroport de Bangkok a 5h20, TG931, installation a l'h6tel,
briefing/breakfast,
depart pour le CRRC avec MM Vincent, Carron, Montoro et Lacote; visite d'une journee,
retour sur Bangkok dans la soiree. MP Carron restant sur le CRRC jusqu'au 22 avril en fin de journee si necessaire.
22 avril 1997:
matinee: reception de H. Omont a l'aeroport de Bangkok, AF 174, 12h10,
apres-midi:
Arnbassade, RRIT et DOA, Lacote.
reunion preparatoire des rendez vous avec avec Mme Pujade-Renaud, MM Vincent, Montoro et
fin de journee (ou plus tot a sa convenance): arrivee de MP Carron du CRRC, briefing.
23 avril 1997: matinee:
apres-midi: 14h00, rendez-vous avec M. Anan Wattanatangum, Directeur du RRIT.
Sujets de discussion envisages:
Presentation du Programme Hevea (M. Omont), le SMOU-CIV (M.
Carron), la Physiologie-Exploitation dans la perspective d' un deuxieme SMOU (M. Jacob). Les moyens de financement.
24 avril 1997: matinee:
Benjasil (DG) et Sanit CIRAD (H. Omont) et des
9h00, rendez-vous au DOA avec MM. Vichit Samosorn (Dep. DG for Rubber): presentation du thematiques CIV et Physiologie de la production
(MP Carron et JL Jacob).
Discussions envisgables aussi:
biotechnologies des plantes sur le campus de Bangkhen mise en place opportunites de cultures perennes.
recherches sur d'autres
d'un centre de (Dr Hiran Pradit) s'associer a des apres -midi: visite du futur centre de biotechnologie du DOA
(a confirmer) ou rencontre avec Y. CROZAT, Responsable du Centre DORAS, a l'Universite de Kasetsart.
fin de journee, retour de MP Carron au CRRC. 25 avril 1997:
1° journee IRRDB pour H. Omont,
matinee: equipe Programme Hevea sensu stricto: compte
rendu d'activites et projets a discuter avec JL Jacob {full day),
apres-midi: rendez-vous au RRIT pour MM. Jacob, Montoro et Lacote avec M. Prawit Wonsukon (Rubber Production Division); projet NE et 2° SMOU (a confirmer).
26 avril 1997:
2° journee IRRDB pour M. Omont,
depart pour Hong Kong; JL JACOB et R Lacote; TG 602.
28 avril 1997:
apres-midi; 14h30, rendez-vous avec M. Culturel de l' Ambassade de France, avec Mme MM Omont, Vincent, Carron et Montoro.
3 mai 1997:
retour de MP Carron en France
le Conseiller Pujade-Renaud,
15 AVR '97 12:03 CIRHD CP 67617120
1- THAILANDE
La mission avait pour objectifs
- l'examen des possibilites de cooperation avec le RRIT;
P.2/5
ANNEXE
- I' examen de la suite envisageable apres 1997 pour le projet commun
CIR.AD/ORS TOM/MAHIDOLIRRIT.
Elle s'est deroulee en presence de Dominique Nicolas.
1.1.
LA COOPERATION AVEC LERRIT
Le RRIT apparait comme etant le partenaire naturel du Programme Hevea.
Pro:fitant d'un changement de direction
(Mr Anana remplace Mr Sanit
a
la tete
du RRIT), deux projets de conventions ont ete discutes avec les responsables
du RRIT (.MM. Anan et Karsedis):
• un projet de convention generate (Principal Memorandwn of Understa11ding),
• un projet de cqnvention pour une cooperation dans 'le domaine des cultures
in vitro (Specfic Memorandum of Understanding).
Le probleme du developpement de l'hevea clans le Nord Est de la Thailande
a par ailleurs
ete
aborde.
1.1.1. Le
memorandum principal
(cf annexe 1)
Con�u
·
sur le modele de celui signe en juin 96 avec le RRIM, le projet sotimis
au RRIT a ete accepte par ce dernier sous reserve de
� preciser dans le texte la langue de travail (anglais). et la langue des
.
publications (thai, anglais ou fran9ais)
;
- revoir les articles 9 .1 et 10 .1 qui semblent en contradiction.
. 16 AVR '97 12:04 CIRAD CP 67617120 P.3/5
Le projet sera soumis par le RRIT au DOA (Department Of Agriculture) dont
depend le RRIT
afin :- d'avoir l'aval de ce demier;
• de savoir qui sera le signataire du cote thai (DOA ou RRIT).
CP devrait etre fixe en janvier 97.
1.1.2. Le
memorandum
specifique CIV
(cf annexe
2)
Le projet soumis au RR.IT a ete accepte sans commentaire.
Le RRIT semble, toutefois, beaucoup plus interesse par une cooperation dans
le domaine de la transfonnation genetique et de la biologie moleculaire. C'est
cependant
la
une cooperation beaucoup plus delicate
a
co11cevoir pour
differentes raisons
• CP
n'estqu'au stade
-
des
premien::s apprud1�� d u,�slpas
1,neL,
- une telle cooperation dewait envisager le role de l'Universite·de Mahidol qui
est
par
ailleurs
depositaire
des
equipements
du
projet
CIRAD/ORSTOM/MAHIDOL!RRIT.
La creation d'un..groupe de reflexion franc.o-thai (RRlT:CIRAD).A.donc
ete
proposee. Il sera charge en 97 de faire des· propositions. L'une de ces
pro.positions pourrait etre la suivante
� plutot que d'envisager un nouveau SMOU, rester dans le cadre actuel de
cooperation
a
quatre (CIRAD/ORSTOM!MAHIDOL/RRIT).
1.1.3. Le Nord Est
Le RRIT a confinne son interet pour le Nord Est de la Thailande appele
a
prendre le re]ais du Sud au niveau du developpement heveicole. I1 a aussi
con.fume son interet pour une intervention du CIRAD qui se voit offiir la l.llle
possibilite de disposer d'un champ d'application d'une recherche qui pourrait
etre orientee vers l'approche physiologique de la production de l'hevea en
zones de deficit hydrique e mmer ieu
a
une integration regionale e11 raison
15 AVR '97 12:05 CIRAD CP 67617120
de la localisation de cette region dans une zone (Laos, Cainbodge, Hauts
PlatealLx
du Vietnam, Yunnan) porteuse de projets
a
un moment ou la
menace
d 'un deficit en caoutchouc nature} pese lourdement sur le marche de ce
produit.
(
II s'agit done
pourle CIR.AD aujourd'hui de s'integrer au plus vite clans la
mission d'etude proposee par la mission de reconnaissance de M. Latham,
R. Lacote et Chalinnee Niamskul realisee en mai 96
(cf annexe
3).
Pour cette mission d' etude qui devrait deboucher sur des propositions de
recherche, le CIR.AD pourrait envisager la mise
a
disposition de R. Lacote ( au
poste d'agronome) et de A. Leconte (au poste de selectionneur).
D. Nicolas et Y. Banchi prendront contact aJeur retour
a
Montpellier avec
M. Latham. JC. Vmcent et R. Lacote approcheront sur place Jes organismes
de financement possibles.
1.2. LA SUITE ENVISAGEABLE APRES
97
POUR LE PROJETCIRAD/ORSTOM/MAHIDOL
UNIVERSITYIRRITCompte tenu de l'avancement actuel du projet, il apparait aujourd'bui que
mi
98 les objectifs initiaux de notre intervention en Thailande auront ete
atteints:
- un transfert de technologie ( qui sera reconnu par un symposium en novembre
97) aura ete realise au profit de l'Universite de Mahidol et du RRIT;
- une cooperation CP/RRlT existera, nous ouvrant en Thailande l'acces aux
champs;
- des marqueurs d'encoche seche auront
ete
mis en evidence;
- Ies possibilites et les modalites d'une expression transitoire de la
transformation auront ete verifiees.
II s'agira done pour nous de valoriser au mieux cet acquis, en prenant toutefois
en consideration trois faits majeurs
- notre di
spositif en Thailande est un dispositif onereux qui incite
a
rechercher
des modes d'intervention differents ;
16 AVR '97 12:05 CIRAD CP 67617120
- notre partenaire legitime en Thailande demeure le RRIT qui nous ouvre
l'acces a la thematique de l'hevea en zone marginale
(cf paragraphe
1. 1.3.) ;
- la valorisation des resultats acquis en Thailande en matiere de biotechnologie
implique
lU1environnement
scientifique et une
confidentialite
que seul
Montpellier est
a
meme de nous donner.
Dans un
tel
contexte, notre approche de la Thaihmde apres 97
pounait
done
etre orientee selon Jes axes suivants
- maintien.
d'une cooperation avec
Mah.idol sur
la
base de
missions
d'appui
selectif
a
une
activite
de
recherche
sur
les marqueurs
de
l'encoche
seche ;
- poursuite de la cooperation engagee en 97 avec le RRIT en matiere de CIV
(missions d'appui) ;
- affectation au RRIT d'un agronome/physiologiste
a
meme d'assurer :
*
la
liaison
Mahidol/RRIT/CP,
* la mise en place et la conduite d'une recherche physiologique dans les
conditions marginales du Nord Est de la Thailande ;
Un tel dispositif aurait l' a vantage de
· - maintenir un dispositif fort de CP en Thailande a un cofit allege ;
- ouvrir.un p6le d'activites en zone marginale
a
meme de s'integrer dans un
dispositif regional (Hauts Plateaux au Vietnam, Yunnan et pourquoi pas
Laos) ;
- rendre disponibles deu.x chercheurs aujourd'hui fonnes pour le lancement
d'une activite biologie moleculaire
a
Montpellier en concertation avec
l'ORSTOM et BIOTROP.
COMPTE RENDU DE LA REUNION DU COMITE DE PILOTAGE CIRAD ORSTOM
Projet Hevea Thailande dans sa troisieme annee (1996)
Etaient presents le mercredi 1 1 decembre 1 996 clans les Jocau.x du Cl.RAD
a
Montpellier: ORSTOM: MM. G. Hainnau.x, J. Berthaud, G. Fabres, H. ChrestinClRAD: MM. J.L. Renard, J. Meunier, H. Ornont, Y. Banchi, J.L. Jacob, D. Nicolas. P. Montoro, R. Lacote
1- Situation du Projet Hevea Thailande dans les problematiques des deux Instituts:
CIR.AD: M. Y. Banchi, precise le positionnement du projet actuel mene en Thailande dans le Programme Hevea du CIRAD-CP.
"Le projet CIRAD-ORSTOM constitue pour nous CIRAD-CP une composante de notre Programme e:\.-ploitation/physiologie qui,
a
partir de la connaissance acquise au niveau du systeme laticifere de l'hevea, ,isea
proposer au.x operateurs du developpement des materiels, des methodes et des outils permettant d'optimiser un investissement heveicole.A J'epoque ou ii a ete lance, fin 1 993, ce projet repondait pour le CIRAD aux besoins suivants: - lancer le developpement d'un outil permettant !'identification de marqueurs moleculaires des potentialites de production et de Ja maladie de I' encoche seche,
- preparer le d6\·eloppement d'un outil de genie genetique.
Dans cette entreprise, J'ORSTOM constituait pour nous un partenaire incontournable en raison de la participation active qu'il avait prise
a
!'elaboration du modele physiologique du systeme laticifere. La Thailande presentait elle, J'avantage, en contrepartie d'un tranfert de technologiea
son profit, de nous donner un terrain d'experimentation et d'application et celaa
un moment ou:- Ja Thailande etait en voie d'affirmer son leadership de premier producteur mondial de caoutchouc nature!,
- nous etions nous-memes
a
Ja recherche de partenaires en Asie.Nous considerons aujourd'hui qu'une partie au moins de nos objectifs pourront etre consideres comme atteints a la fin de 1 99.7, epoque a laquelle nous aurons a decider avec l'ORSTOM de la suite a donner
a
une cooperation que nous souhaiterions, pour notre part, voir se poursuivre dans un cadre prenant en consideration:- Jes objectifs poursuivis par nos deux organismes,
- la specificite CIRAD-CP d'interface avec le developpement,
- nos contraintes mutuelles de fonctionnement."
ORSTOM: M. G. Hainnau.x propose de s'en tenir au deroulement de l'ordre du jour tel qu'il a ete propose et souhaite discuter des collaborations futures dans le chapitre des questions generales.
2- Presentation des resultats: (se reporter au rapport abrege des resu/tats)
Un resume des resultats est presente scion trois themes de recherche: e::\.-pression et regulation des genes, encoche seche et genie genetique.
2-1 Expression et regulation des genes: (H. Chrestin, V. Pujade-Renaud)
Le modele de Ja coagulation du latex par !'action de l'Heveine est presente: role de l'Heveine et de son recepteur (facteurs coagulants), des chitinases (facteurs anticoagulants), influence de la stimulation hormonale.
Le mecanisme d'action des stress O:\.")'datifs est rappele avcc le role protecteur joue par des eilZ)mes de type SOD et catalase.
L 'approche moleculaire est justifiee par
r
etude de I' expression des genes des enzymes interYenant dans les processus de coagulation et de protection contre les stress o:-..·ydatifs qui conduira a une meilleure comprehension des mecanismes impliques. L' obtention de sondes nucleiques pem1et deja de verifier la sensibilite des arbres: .-a la coagulation (modele Heveine),
-a
des stress physiologiques,par mesure de l'e:-..'Pression (transcription)
a
!'aide de northern blots.Les resultats obtenus, e:-..'Pression differentielle en fonction de la stimulation, de l'encoche seche induite (fatigue physiologique) ou necrotique permettent d'esperer de trouver un jour des marqueurs specifiques de l'un ou rautre type de TPD (Panel Dryness Disease). Les techniques '·antisens" sont envisagees, en genie genetique pour ralentir les processus de coagulation, notamment au niveau du recepteur de l'Heveine. En revanche, ii n'est pas recommende de controler le niveau d'e:-..'Pression de l'Heveine en raison de son role antifongique.
2-2 Encoche seche: (R Lacote, V. Pujade-Renaud)
Bien que de nombreuses definitions des types de la maladie de l'encoche seche ont ete et sont encore proposees on peut en retenir deux grands types bien definis par Jacob et al (P.R.D. 1994). L'encoche seche (ou TPD) de type necrotique, est caracterisee par ! 'affection de !'ensemble de l'ecorce du tronc: elle est irreversible. L 'encoche seche de fatigue physiologique est due
a
une ex'Ploitation (saignee et stimulation) trop intensive induisant une trop forte e:-..-portation de latex depassant les potentialites de production de l'arbre. Cette fonne d'encoche seche est reversible si la surex'Ploitation cesse car elle n'affecte que le fonctionnement du systeme laticiferea
!'exclusion des autres tissus de l'ecorce. Le criblage electrophoretique (mono et bidimensionnel) des proteines du latex montre qu'un certain nombre de proteines ont leur S)'llthese accrue ·1ors de !'apparition de la maladie. D'autres apparaissent de novo. Entre 20 et 30 Kd, deu.x proteines sont bien reperees: PDF22 (Panel DT)'lless Factor de 22 Kd), PDF 29 (29 Kd). Une troisieme proteine, PDF 19 est aussi reperable au.x alentours de 19 ± 3 Kd.La distinction des profils proteiques n'est pas possible entre les deux types d'encoche seche. La question reste ouverte: ces proteines sont elles des proteines de stress ?
Des modifications apparaissent aussi dans la zone comprise entre 20. l et 14 Kd. Un criblage plus fin de\ient necessaire afin de bien reperer les marqueurs dans cette zone. Ce travail est entrepris en collaboration avec le laboratoire du Pr Jarunya.
Une etude de la compartimentation des proteines observees sur gels a montre que PDF 22 est ey1osolique alors que PDF 29 est situee dans les lutoides. On observe aussi la disparition, en gel
monodimensionnel, de deu.x bandes de 32-33 KD chez les arbres malades dans le compartiment lutoidique. Cette observation est interessante. Dans la litterature ii est signale le role de la 1,3-Glucanase, proteine lutoidique basique de 35 Kd environ, dans le mecanisme de la coagulation du latex par neutralisation de charges. Cette proteine chargee positivement participerait, en raison de sa forte concentration,
a
la coagulation lorsque relachee dans le C)1osol. 11 sera interessant de connaitre l'identite de ces proteines d'un poids moleculaire voisin de la Glucanase et aussi de comprendre pourquoi elles disparaissent dans le latex d'arbres malades.La litterature cite aussi le role des Hevamines, lutoidiques aussi, dans la coagulation par neutralisation de charges, et leur poids moleculaire avoisine Jes 29 Kd ... une piste est ouverte pour PDF 29.
2-3 Genie genetique: (P. Montoro, V. Pujade-Renaud)
Le genie genetique a ete envisage chez l'hevea afin d'etudier
a
terme chez des arbres transgeniques l'ex'Pression des genes impliques dans la production en caoutchouc. L'objectifa
l'Universite de Mahidol est de cloner et d'etudier en e>.'Pression transitoire (dans des cellules transfonnees) des promoteurs controlant !'expression des transgenes d'interets dans Jes cellules laticiferes ou bien de Jes induire par !'ethylene. C'est dans ce cadre qu'a ete entrepris le clonage des promoteurs de l'Heveine qui est specifique des laticiferes et de la glutarnine synthetase qui est inductible par !'ethylene. Plusieurs clones genomiques ont ete isoles et caracterises cette annee par sequen9age. Les sequences supposees promotrices ont ete isolees afin de les cloner dans des vecteurs de transformation courant1 997. En ce qui concerne le promoteur de la GS, ii faudra mettre en e,idence que le clone obtenu est bien celui d"une GS inductible par l'ethylene. car ii s'agit d'une famille multigenique.
En parallele, Ies premiers essais de transformation de l'Hevea ont debute afin d'avoir un outil d'etude de l'e:\.-pression des promoteurs dans la cellule. Le projet initial d'electroporation de protoplastes a ete abandonne en raison des difficultes de manipulation des protoplastes, de l 'isolement des cellules qui peut fausser l'activite de la cellule elle-meme, et la specificite de cette approche qui ne peut deboucher que sur une etude en expression transitoire. La transformation de jeunes tiges issus de somaplants cultives in vitro a ete commence via Agrobacterium tumefaciens. Les cellules laticiferes de ces tiges gardent leur integrite et l'acces des agrobacteries au.x cellules laticiferes est facilite par les vaisseau.x. Les premiers essais ont montre qu ii est possible de transformer des tiges. ·
Une methode de transformation stable
a
partir de tegurnent interne de la graine d'hevea et de cals friables a ete initiee dans le but de l'etude du promoteur de l'Heveine a partir d'embryons somatiques ayant differencie des cellules laticiferes. Les resultats de cette approche donneront la base d'un procede d'obtention de plantes transgeniques qui sera la suite logique au projet actuel focalise sur les promoteurs. Une souche d' Agrobacterium a ete rnise en evidence comme efficace pour transferer son ADN de transfert chez Ies cellules d'hevea et un protocole de base a ete etabli.2-' Commentaires:
De l'avis general, les resultats presentes ne font pas naiment bien ressortir les travau.x recents de 1996. II est demande de replacer les resultats dans l'orientation des efforts en fonction des objectifs prealablement retenus. En revanche, les travau.x en genie genetique font apparaitre des resultats non prevus notamment en ex.-pression stable, en raison de l 'evolution des contraintes techniques.
Concernant le TPD, la discussion a mis en avant l'interet de travailler non plus seulement sur les proteines du latex mais aussi sur les proteines de l'ecorce de l'arbre. En effet dans le cas de l'encoche seche necrotique, c'est !'ensemble du tissu de l'ecorce qui est affecte. des travau.x recents font etat d'une telle etude mais malheureusement ne permettent pas d'eclairer beaucoup cette approche que nous entreprendrons.
3- Perspectives scientifiques pour 1997(juin 1998 ?)-2000:
Les objectifs du Projet Hevea Thailande sont replaces dans la problematique du Programme Hevea du CIRAD-CP. Les operations
a
conduire devTont participera
!'amelioration du modele du fonctionnement laticigene de fai;:ona
en tirer, pour le CIRAD, des applications valables pour !'amelioration de l'hevea en general.L'etude de !'expression et de la regulation des genes sera poursuivies dans Jes operations suivantes du Projet Hevea Thailande avec comme support ex.-perimental Ies essais mis en place (sure:\.-ploitation, champ de clone et TPD).
3-1 Coagulation:
Approche screening: verification par northern du niveau d'exl)ression des genes de proteines dont le role a ete demontre dans les processus de coagulation:
selon un mecanisme de type '·Iectine" (agglutination): Heveine, recepteur de J'Heveine, chitinases,
par neutralisation des charges, glucanases, hevamines dont la litterature recente annonce le role potentiel important. Ces proteines basiques (chargees +) sont contenues dans les Iutoi'des, leur liberation dans le cytosol entrainerait la neutralisation des charges (-) des molecules de caoutchouc provoquant la coagulation. Cette etude est
a
rapprocher de celle menee sur le TPD par criblage electrophoretique.Approche clonage et caracterisation: clonage du cDNA pleine longueur du recepteur de J 'Heveine et analyse de son e>..l)ression par northern.
3-2 Protection
Approche screening: verification par northern blot du niveau d'e;...--pression des genes des proteines dont le role a ete demontre dans la protection de structures subcellulaires: Catalase, Mn SOD, Cu Zn SOD.
Approche clonage et caracterisation des genes: Catalase, SOD et prerniere etude sur Jes pero;...·ydases du latex.
3-3 Regeneration
Approche screening: verification par northern du niveau d'e;...--pression du gene de la 3-Hydro;...-yl-3-Methylglutaryl-Coenzyme A Reductase 1 (HMGRl ) qui catalyse la synthese du
mevalonate et dont 1·action peut etre potentiellement lirnitante dans Ja �nthese du polyisoprene.
3-4 Encoche seche
Approche criblage proteique:
verification par electrophorese en 20 de la detection de(des) nouvelle(s) proteine(s) de 33 ± 3 Kd dans le latex, verification de leur situation compartimentale,
prerniere etude sur le criblage des proteines e:-..iraites de J 'ecorce d'arbres sains et d' arbres malades,
criblage electrophoretique en 2D des proteines de faibles poids moleculaires (6,5 -1-iKd) (laboratoire du Pr Jarunya).
Approche clonage et caracterisation (identification, etude d'ex--pression) des genes des marqueurs proteiques de TPD: PDF22 et PDF 29.
Deux voies sont emisagees:
obtention d'anticorps (en cours, en charge par le Iaboratoire d'immunologie du Pr Cinda) puis: criblage d'une banque d'e:-..--pression, elude par western blot, mise au point d'un test ELISA de fa<;on a pouvoir detecter, en champ,les arbres sensibles a la maladie. Cette voie necessitera la purification des proteines choisies. Elle pourrait se realiser dans le Jaboratoire d'agrophysiologie du ClRAD Montpellier.
rnicro-sequen<;age du peptide PDF 29 afin d'obtenir Jes premieres informations sur Ja nature de Ja proteine en question.
verification par northern du niveau d'ex--pression du gene de la PDF 22
Approche Diagnostic Latex et Production: poursuite des mesures des parametres physiologiques du latex et des controles de production et interpretation des resultats sur les e;...--periences supportant Jes etudes de l'encoche seche, des reductions de frequence de saignee.
Remarque:une convention Iiant ClRAD-ORSTOM-MU-RRlT avec BIOTEC (ex-NCGEB) a ete signee en septembre 1996. Initialement, !'accord etait prevu pour janvier 1996. Cet organisme finance
a
hauteur de 200.000 FF par an sur deux ans un programme de recherche specifique sur le TPD. Les deux Jaboratoires thailandais de Mahidol, Pr Jarunya et Pr Cinda sont concemes sur Jes themes de recherche precis, respectivement: proteines marqueurs de foible poids moleculaire et obtention d'anticorps. Le RRlT beneficie de 30% du financement pour equiper le Jaboratoire du Centre de Recherche de Chachoengsao (CRRC) en materiel de laboratoire. L'echeance de ce projet qui aurait du se terrniner en decembre 1997 est done reportee en juillet 1998. Ce qui peut amenera
revoir la position de J'un ou J'autre des agents ClRAD et ORSTOM affectes a Bangkok sur le tem1e de Jeur sejour prevu initialement en decembre 1997. II faut neanmoins souligner que le financement de ce projet est soumisa
! 'approbation par le cornite scientifique de BIOTEC d'un rapport d'activite semestriel, accord qui conditionne le financement pour les 6 mois a venir et ainsi de suite jusqu'au terme de deux annees.3-5 �nie genetique:
Les sequences supposees promotrices ont ete isolees afin de les cloner dans des vecteurs de transformation courant 1997. En ce qui conceme le promoteur de la GS, ii faudra mettre en e,idence
que le clone obtenu est bien celui d'une GS inductible par !"ethylene, car ii s'agit d'une famille multigenique. Des etudes d'expression de ce gene, et de transformation genetique seront rnises en place chez le tabac. Cela permettra de verifier si ce systeme heterologue est utilisable pour etudier un gene inductible codant pour la GS.
La transformation de jeunes tiges issus de sornaplants cultives in vitro a ete commence via Agrobacterium tumefaciens. Les premiers essais ont montre qu' ii est possible de transformer des tiges. En 1997, des exi,eriences de cytologie seront entreprises en collaboration avec N. Michau.x Ferriere (BIOTROP-CIRAD), pour localiser les types cellulaires transforrnes.
Une methode de transformation stable
a
partir de tegument inteme de la graine d'hevea et de cals friables a ete initiee dans le but de l'etude du promoteur de l'heveinea
partir d'embryons somatiques ayant differenties des cellules laticiferes. Durant l' annee 1997, les niveaux d 'ex-pression transitoire devront etre ameliores afin d'augmenter le potentiel de cellules transfonnees qui regenereront des embryons transgeniques. La phase de selection devra etre aussi rnieux rnaitrisee pour permettre au.x cellules transforrnees de se diviser.4- Questions generales:
4-1 Universite de Mahidol:
Dans le cadre de la thematique du Prograrnn1e Hevea, il est prevu de maintenir une acti,ite de recherche en collaboration avec la Faculte des Sciences de Mahidol (MU). Cette collaboration portera sur les sujets actuellement traitees
a
MU sur les marqueurs proteiques de l'encoche seche.- Pr Jarunya: criblage des proteines de faibles poids moleculaires,
- Pr Cinda: obtention d'anticorps des marqueurs identifies pour western blots et ELISA dans
le cadre des etudes sur l'ell.-pression des genes et la rnise au point d'un test de detection.
Cette activite
a
MU beneficie d'une partie du financement BIOTEC jusqu'en jullet 1998. II estdemande de recruter un chercheur sur financement BIOTEC qui epaulera l'equipe sur le TPD.
Le maintien d'une collaboration avec MU reste un atout au sens politique du terme puisque il est ainsi demontre a I' Ambassade de France (MAE) que l'investissement realise sur place pennet a l'equipe thailandaise de continuer
a
travailler avec nous. Pour le CIRAD-CP, cette collaboration n'est bien comprise que si elle s'integre cl.ins la problematique du Programme Hevea.4-2 Presentation de la problematique physiologic de l'exploitation du Programme Hevea du CIRAD-CP par J.L. Jacob:
Le modele de la fonction laticigene necessite bien sur d'etre ameliore afin d'en comprendre les mecanismes fondamentau.x.
Suite au.x travaux entrepris en biologie cellulaire (physiologie) ii est possible de definir cinq operations cles sur lesquelles portent les efforts de recherche a l 'aide des outils tant de la biologie cellulaire que de la biologie moleculaire (alimentation en sucre, energie cellulaire, metabolisme laticigene, mecanismes de protection et de coagulation). Le but fixe reste pour le CIRAD-CP l'amelioration de l'hevea comprise dans sa globalite; modelisation de la fontion laticigene, outils de diagnostic pour la definition de systemes d'exploitation adaptes et l'amelioration genetique. C'est dans ce but que sera utilise l'outil genie genetique. D'abord pour perrnettre les etudes des fonctions physiologiques du materiel transforme (impact des trangenes) et bien plus tard (calendrier non defini) permettre la creation de nouveaux clones.
C'est au sein de ce canevas d'operations de recherche orientees selon la strategie du Programme Hevea qu'est bien comprise la continuation de la collaboration avec l'ORSTOM, en particulier sur les
mecanismes de la coagulation du latex.
Si la collaboration CIRAD-CP/ORSTOM reste un affichage a preserver pour nos tutelles, l'activite de chaque partenaire devra etre precisee. Pour le CIRAD-CP l'Hevea peut etre un modele d'etude
commun. Le CIRAD-CP ,ise !'amelioration de la producti\ite grace aux etudes engagees en particulier en e:-..-ploitation-physiologie moleculaire et genie genetique. L 'ORSTOM conce,·ant 1 · He,·ea uniquement comme modele pour etude du fonctionnement du genome (thematique). Une contrainte majeure pour le Programme Hevea du CIRAD-CP est de cooperer avec des partenaires de terrain pour a la fois senir le transfert de connaissances et !'application raisonnee des resultats de la recherche dans le cadre de son mandat pour le developpement.
Le CIRAD se place comme l'interlocuteur pri\ilegie du RRIT en Thailande, mais aussi de l'IDEFOR DPL en Cote d'Ivoire en raison du dispositif experimental deja en place. Ainsi, le CIRAD-CP pourra valider Jes resultats de la recherche.
Une reunion est decidee pour le mois de juin prochain afin que chaque institut puisse preciser ses objectifs.
4-3 Le Rubber Research Institute of Thailand (RRI1):
Les relations evoluant entre le CIRAD et le RRIT placent cet institut comme le partenaire principal du CIRAD en lJlailande. Dans ce contex1e les resultats de la recherche seront directement appliques au RRIT par le CIRAD, pour leur validation (sondes nucleiques, anticorps) dans le cadre de la convention actuelle. Cela implique le resserrement des liens (deja entrepris) du CIRAD et du RRIT. II semble preferable de focaliser les efforts en ex-ploitation-physiologie (cellulaire-moleculaire) dans le cadre bien sur de l'etude de la typologie clonale de la fonction laticigene. 11 sera ensuite envisage une collaboration en genetique.sans doute en cartographie genetique en commenc;ant a localiser les genes d'interet identifies et avant de passer a la creation clonale.
Un discours clair sera tenu au RRIT sur la transformation genetique. La transformation genetique peut etre e\idemment employee comme outil de recherche sur le fonctionnement du systeme laticigene, de creation varierale et aussi comme possibilite de synthese de metabolites secondaires autre que le caoutchouc dans le latex. L'eventualite d'une cooperation en ce domaine devra prealablement etre discutee afin d'eviter tout conflit d'interet.
Un soutien scientifique sera apporte aux equipes thailandaises de MU et du RRIT dans le souci de perenniser la collaboration. C'est pourquoi un programme de recherche de\Ta definir les objectifs de cette collaboration afin d'envisager les actions a entreprendre en fonction des moyens qui seront degages. Dans ce programme, le CIRAD envisage de collaborer aussi ayec l'IDEFOR-DPL.
La collaboration quadripartite liant CIRAD, ORSTOM, MU et RRIT arrivera a terme le 3 1 aout 1 998. Elle devra etre revue afin d'en statuer a nouveau au cours du premier semestre 1998. La place du RRIT y sera discutee. Une discussion sur ce sujet se tiendra entre l'ORSTOM et le CIRAD a l'ete 1997.
4-4 Localisation des activites de recherche:
La relocalisation des agents en poste a Bangkok est a envisager. avant que le terme de la premiere convention franco-thailandaise soit echu le 3 1 aout 1998.
Au CIRAD il existe deux laboratoires fonctionnels:
- laboratoire d'agrophysiologie ou sont menees actuellement Jes recherches en biologie cellulaire-physiologie de la production,
- laboratoire de BIOTROP dans lequel des travaux de culture in vitro et de biologie moleculaire - genie genetique sont conduits avec des competences de premier ordre.
Ces deux laboratoires presenteraient l'avantage de mettre en synergie Jes competences acquises en Thailande, celles acquises par des chercheurs d'autres programmes-plantes en matiere de biologie moleculaire et de genie genetique et les competences en biologie cellulaire-physiologie de la production du laboratoire d'agro-physiologie.
Un poste CIRAD, au moins, sera maintenu en Thailande afin d'assurer le developpement des resultats de la recherche (sur convention) au RRIT.
A l 'ORSTOM, le laboratoire de Genetrop se prepare. Des locaux sont liberes pour y regrouper des equipes de biologie cellulaire, moleculaire et de genetique (notamrnent celle de 1 · IT ALB).
L'ORSTOM propose d'y regrouper les recherches sur Hevea: biologies cellulaire, moleculaire et genie genetique.
II n' est pas donne de suite
a
la discussion; les deu.x parties devant chacune prendre en compte Jeur propres contraintes et leur strategie de travail.4-J Fioancement, recrutement, partage des resultats, convention CIRAD-ORSTOM.
Reconduction des financements pour Ies agents en poste
a
Bangkok pour l'annee 1997. Pour le CIRAD, les budgets devraient rester stables (attribution rnensuelle). L'ORSTOM annonce une reconduction avec une baisse emisageable de 10a
15 % (attribution trirnestrielle).11 n'est pas indique de rechercher des financements industriels prives sur nos activites de recherche; le risque
a
prendre est trop grand. Le CIRAD peut en revanche rechercher des bourses industrielles pour un travail de valorisation ..Le recrutement de chercheurs ou de techniciens n 'est pas envisageable au CIR.AD pour 1997. L'ORSTOM ne peut non plus engager avant 2002 ou 2005.
11 faudra rernir clairernent la convention CIRAD-ORSTOM avant son echeance du 25 juin 1998 afin de preciser Jes rnodalites de valorisation des resultats. Dans l'eventulite d'une prolongation de six mois en Thailande d'une partie de l'equipe actuelle, un avenant
a
la convention liant le CIR.AD et l 'ORS TOM sera signe, precisant cornme jusqu' al ors les participations financieres et en personnel de chaque Institut.A la demande de MU un serninaire/atelier Hevea se tiendra
a
Bangkok fin octobre 1997 avec restitution officielle des resultats. La question est de savoir si ce symposium-atelier devra s'ouvrira
des non-thailandais, indonesiens, malais, indiens, ivoiriens ... L'arnbassade de France financera le voyage de trois ou quatre experts fran�ais imites a donner une conference a !'occasion de ce serninaire.Condense des tenants et aboutissants de l'accord specifique, signe le 1 1/02/1 997, entre le DOA (RRIT) et le CIRAD-CP(Programme Hevea) sur la culture in vitro de l'hevea.
L'amelioration genetique de l'hevea, au CIRAD-CP, regroupe en son sein plusieurs activites de recherche/developpement dont le but commun est de proposer aux utilisateurs (planteurs) un materiel vegetal mieux adapte
a
leurs besoins. Ces activites concement: les recommendations clonales, le programme d'amelioration genetique, les echanges de materiel vegetal et l'entretien des collections varietales, les recherches en cartographie moleculaire et en propagation par embryogenese somatique.Le CIRAD a demarre des recherches en culture in vitro de grandes cultures tropicales dans
les annees 70
a
des fins de propagation clonale (plantes entieres et portes greffes) et obtention de plantes saines indemnes de micro-organismes.En particulier, la mise au point des procedes d'embryogenese somatique et de microbouturage de Hevea brasiliensis a demarre en 1 979. Des 1 985, de nombreuses etudes fondamentales se sont averees necessaires pour ameliorer ces techniques.
Le CIRAD-CP mene ses activites de recherche en partenariat public et prive. Des collaborations avec des Universites (USTL-Montpellier, Clermont-Ferrand) et le CNRS (CEPE) ont permis au CIRAD de mettre au point plusieurs procedes de propagation in vitro de l'hevea. Les premiers somaplants (quelques centaines de plants issus d'embryogenese somatique) ont ete plantes en Cote d'Ivoire en 1 993, en accord avec l'IDEFOR-DPL.
Un accord a ete signe egalement avec la societe Michelin sur le developpement des techniques de sevrage et d'acclimatation des somaplants
a
grande echelle (Clermont Ferrand, Nigeria, Bresil).Les heveas issus d'embryogenese somatique revelent aujourd'hui une bonne conformite morphologique, homogeneite et une plus forte vigueur par rapport aux plants greffes habituellement utilises pour la plantation. Les tests de production sont en cours.
Dans la prochaine decennie, les defis que devra relever l'heveaculture sont principalement de deux types: (1 ) maintenir le developpement de la culture paysanne ce qui implique !'extension des cultures dans des zones considerees comme marginales (Yunnan, Nord-Est de la Thailande, Mato-Grosso), (2) produire un materiel vegetal adapte aux nouvelles techniques d'exploitation reduisant le coot du travail.
Dans le contexte des grands pays producteurs de caoutchouc naturel en Asie, le CIRAD-CP poursuit sa politique de cooperation en recherche-developpement. Et c'est bien pour intensifier sa mission de developpement que le CIRAD a souhaite s'implanter dans cette zone avec un partenaire tel que le RRIT.
La signature d'un accord general entre le DOA (RRIT) et le CIRAD-CP le 1 1 fevrier 1 997et la signature ce meme jour d'un accord dans le domaine particulier de la culture in vitro
("Production of Hevea plantlets by in vitro culture. Agronomic evaluation of such material")
sont les points de depart d'une collaboration de longue duree en recherche et
developpement pour !'amelioration de l'hevea.
-Nul doute n'est plus permis aujourd'hui sur les avantages que procurent les techniques d'embryogenese somatique comme (1 ); moyen de propagation des genotypes selectionnes, (2); pour la creation et la selection de nouveaux genotypes.
En ce domaine, la cooperation RRIT/CIRAD-CP (Programme Hevea) permettra (1) d'evaluer la valeur agronomique du nouveau materiel vegetal que constituent les somaplants d'hevea dans des essais
a
large echelle, (2) de selectionner les (soma)clones les plus adaptes aux besoins de l'hevea-culture en Tha·11ande (adaptation aux conditions ecoclimatiques, techniques d'exploitation), (3) de former des chercheurs du RRIT aux techniques d'embryogenese somatique par un transfert de savoir-faire progressif done adapte aux contraintes specifiques du partenaire.Expanding Para Rubber Planting Area in the North-East of Thailand
Introduction
At present, Thailand produced approximately 1 .6 million tons rubber per year and export the product at value of 1 , 1 53 .8 million US$. According to the research work on expanding the planting area of rubber, they are plenty of new planting area in the eastern region and the in the northeast of Thailand. Those are approximately 1 .6 million ha. In addition, planting rubber trees can help solving deforestation problem and in turn can improve global ecosystem. Moreover, the government policy Plan 8 promotes rubber extension areas especially in the Northeast: marginal area for rubber tree, so that there exists a big need in research and technica! advertisment for the rubber growers.
Background
Indeed, 64,000 ha of rubber have already been planted in the area during the last ten
years, mostly in the extreme Northeast which is the most humid part of the region. The Government estimates a potential area of at least 2,720,000 ha and plans to plant around
6.400 ha per year in the next five years but anticipates problems of drought for growing rubber
of convincing farmers of its viability.
A programme has been the object of a special government action plan during the last few years. A pilot project for Rubber Tree Cultivation in the Northeast (RUTCJNE) has been set up and financially and technially supported by the European Comission (EU). The project was per:eived as a pilot project to test rubber cultivation in suitable agro-ecological zones in four provinces in the upper Northeast, developping 3,600 ha of rubber.
Target area to be introduced in rubber in the Northeast is systematically evaluated in 19 provinces, focusing on the area which are planted with non-profitable crops especially cassava field. Since 1 989-1 993, government supported not only strengthening the implementating agencies and also provided money for preparing materials for plantation .
There are some difficulty practices rubber maintenance on farm level (25% of planted area) because they do not use to grow perenial crop.
Due to the lack of timber, rubber wood can be an alternative sources to supply the timber industry. In addition, it will prevent the influx of people from the Northeast to the central area of Thailand.
At the request of H . E. Deputy Minister of Agriculture, to assesss a cooperation between the French research/training Institutions and Thailand to expand rubber planting area, a pioneering mission composed of representatives from the DOA. CI RAD, CNEARC and IBSRAM visited the Northeast from 7-9 May 1 996. The mission identified the main need to have a more depth analysis of the existing situation and of its potential development. A fact finding mission, including Thai and foreign experts should be commissioned.
Objective
The main objective is to accomplish acceptable and sustainable community based on rubber planting system:production .
Terms of ref ere nee
Mission: fact funding for expanding para-rubber plantation in the Northeast of Thailand (details in annex 1 ).
The mission will assess, review and interpret available information experience and existing knowledge on cultivation practice of para-rubber planting in Thailand.
The major task during the mission will be:
1 - to review existing information pertaining technologies, farmers perception and problems for knowledge base,
2- to determine suitable agro-ecological zone in Northeast area for rubber plantation, 3- to formulate guidelines and methodologies for the efficient and effective programme for expanding rubber plantation in the Northeast,
4- to enhance adoption by land users and communities of the rubber planting system, 5- to advise :
farming systems to be integrated with para-rubber plantation,
participatory approach with land users, implementation and farmers perception role of women and men versus specialist.
6- to suggest strategic options to be tested,
7- to examine existing capacities and capabilities of staff, laboratory and making recommendations for improvement.
Expected output:
Agencies involved
Rubber Research Institute of Thailand (RRIT) will be the executing agency.
The implementing agency will be :
International Board for Soil Research and Management (I BSRAM)
Center for International Co-operation in Agricultural Research for Development (CI RAD) Centre d'Etudes Agronomiques des Regions Chaudes (CN EARC)
Department of Land Development (DLD)
Khon Kaen University
Duration of the mission
The fact finding mission. including Thai and foreign experts. will spend two weeks analysing the farming and research situation and preparing a revised development plan for developping the rubber plantations in the Northeast of Thailand (details in annex 2 and 3).
Estimated Budget
ANNEX 1
Main objectives
To put in p!ace such an ambitious programme and to support the expansion of rubber by smallholders in Northeast. the fact finding mission will prepare a master plan for the next five to ten years.
An extension agenda will include the following:
- the preliminary informations on rubber plantation specifically on suitable agro-ecological zones in the Northeast area.
- the programme for:
- increasing rural income not only from intercropping or cropping system but also an annual
rubber product income via a farming system/on-farm research, which will include studies as farmers production capacity analysis, labour gender nalysis, intercropping and other agronomic practices and market orgnization studies and planning.
- implementing studies on analysing the suitability area for intensive rubber growing area in map scale 1 :50,000.
- initiating and expanding rubber research programmes with a biophysical research agenda centred on the CRRC and NRRC which could include a search for drought resistant clones, moisture conservation research and tapping system research, to provide the technical assistance.
- a training programme geared:
(1) at researchers to enhance the quality of their work and to bring them closer to tamers needs,
(2) at extensionists to give them a better understanding of farming systems and farmer's needs and to promote them as facilitators between farmers and researchers.
Moreover, as there is a cross border interaction Northeast Thailand and Southeast Laos and Northwest Cambodia, the mission will take a regional perspective on smallholder development of rubber in the middle Mekong basin.
ANNEX 2
Timetable
to recheck with RRIT
A N N EX 3
Temporary list of the team members.
Team leader will be M. Prawit Wonsukon, Director of Division Production, RRIT. T earn members:
DONRRIT Jirakorn Kosasaiwe Agronomist
DOA Agroclimatologist
CIRAD Regis Lacrotte Agro-physiologist
Yves Crozat lntercropping system specialist
Antoine Leconte Breeding specialist
CNEARC Farming system specialist
IBSRAM Rod Lefroy Soil scientist
Suraphol Chandrapatya Extensionist
OLD Suraphol Charoenpongse Soil surveyor
KKU Doriane Kermel Socio-economist
Sawaeng Rueysoongnoen Socio-economist
ANNEX 4 Budget US$ 1 . Air tickets international (3 x 2500) 7,500 domestic (1 3x72) 936 2. Subsistence allowances
in Bangkok (US$ 1 00 x 3 persons x 4 days) 1 .200
elsewhere (US$ 80 x 13 p x 1 4 d) 1 4,560
3. Transportation 4,620
4. Organization of field visit 7,980*
5. Reporting 5,000
6. Administration & incidental expenses 1 ,660 TOTAL 43,436
ANNEX 5
Table 1 : Cumulated suitable area (rail for rubber cultivation in the North-East
Province 2nd class area 3rd class area 4th class area Total area
Holder Devastated Holder Devastated Holder Devastated Holder Devastated area forest area forest area forest area forest
Kalasin 730,189 76,564 305,1 76 1 89,453 1 ,035,365 268,01 7 Khon Khan 491 ,390 02,341 491 ,390 302,341 Chai Phum 1 ,207,096 265,231 1 ,207,096 265,231 Nakhonpanom 1 60,858 42,145 605,884 10, 1 56 748,852 52,341 Nakhonrachasima 35,728 1 36,1 97 741 ,400 705,457 777,128 641 ,654 Burirum 743,742 226,1 80 243,749 1 20,702 987,491 346,882 Mugdahan 231 ,502 7,031 231 ,500 7,031 Mahasarakham 231 ,934 1 31 ,352 1 54,934 1 31 ,352 Yasothon 599,603 209,91 8 63,278 662,881 209,91 8 Ro�ed 599,603 209,91 8 63,278 662,881 509,918 Lei 205,070 1 14,299 1 31 ,638 78,904 336,708 1 93,203 Sir-saket 25,391 6,688 346,941 1 13,672 365,628 1 88,280 737,960 306,640 Sakhonlnakhon 436,327 1 94,920 436,327 194,920 Surin 563,563 358,044 574,605 924,603 Nong Khai 20,313 554,292 924,603 574,605 924,603 Udonthanee 263,273 137,888 51 9,531 593,246 574,605 924,603 Ubonrachathan 26,561 906,633 378,342 906,633 404,903 Cumulated 226,562 73.434 6,443,859 3,01 9,1 66 4,068,886 2,444,1 14 10.739,1 41 5,536.714 Total Area 299,996 9,463,025 6,513,000 1 6,275,855
Remmk : 1 . Suitable area for cultivation refer to average of area on the ratio 1 :100,000 map.
2. Waste forest means the area which can grow rubber trees, but in the wasted area
Table 2: Rubber cultivated area (rai) in Thailand
Sector 1966 1 979 1986 1990
The South 6,990.741 8,043,971 9,686,000 9,708,744 The East 765,462 822,892 1 ,080,128 1 ,084,383
The North-East 367,683
Total 7,756,203 8,866,863 1 0.766, 128 1 1 ,137,810 Ref. : Rubber Research Institute, 1 995
-ANNEX 6
Table 3: Standard of rubber growth rate in new region of rubber cultivation
Age Girth (cm.) at 1 70 cm. height above ground level (month) low moderate height
24 8 1 0 1 2 30 1 1 1 3 1 5 36 1 5 1 7 2 1 42 1 8 20 23 48 20 23 27 54 26 29 31 60 32 36 40
Table 4: Girth (cm.) of rubber tree in dry region, identified by agro-climate zone.
Age Girth (cm.) at 170 cm. height above ground level
(month) Zone 1 Zone 2 Zone 3
good1/ medium good medium good medium
1 8 9.0 9.2 8.8 8.9 8.4 24 1 1 .9 1 1 .9 1 1 .5 1 0.2 1 0.2 30 17.7 1 6.7 1 5.2 13.4 10.6 36 22.0 2 1 .8 1 8.0 1 6.2 1 5.5 42 27.5 27.0 23.3 18.3 1 8.0 48 31.7 30.7 25.3 24.9 23.5 54 36.4 35.1 33.6 28.7 25.3 60 39.7 37.8 36.5 31 .9 29.6 72 46.2 42.4 4 1 .5 39.2 31 .8 78 49.3 45.7 44.3 44.3 36.8 84 51 .2 47.4 46.2 45.2 40.5
ANNEX 7
Table 5: Comparison of average yield between RRIM 600 clone and GT 1 clone in dry region, North, North-East and South of Thailand.
Tapping Yield (kg/rai/year)
Year North North-East South
1 22 78 1 54 (1 22) (71 ) (132) 2 1 33 134 205 (1 13) (103) (135) 3 249 226 236 (102) (127) (134) 4 280 218 251 (100) (109) (126) 5 321 181 290 (107) (86) (121) 6 415 270 252 (109) (107) (130) 7 297 2/ 260 355 (81 ) (101) (130) 8 213 285 (86) (121) 9 395 322 (106) (139) 10 2372/ 293 (79) (132) AVG 260 221 285 (103) (98) (130)
Remark : Number in circle means tapping days 1/ From Clonal Recommendation 1 993. 2/ Yield data not complete.
Table 6: Rubber yield in dry region, of the North-East, identified by climate zone.
Tapping Yield (kh/rai/year)
Year Zone 2 Zone 3
80.3 75.4 (79) 1/ (62) 2 1 60.7 107.6 (103) (103) 3 220.1 231 .9 (1 24) (130) 4 270.4 1 67.1 (129) (88) 5 1 93.9 1 68.7 (96) (76) 6 226.0 274.4 (1 1 6) (98) 7 299.4 222.0 ((109) (92) 8 226.4 1 98.7 (87) (85) 9 149.7 2/ 297.4 (56) (93) 10 ( · ) (· ) AVG 207.4 1 93.0 (100) (92)
Remark : 1/ Number in circle means tapping days
I ·
I
I
I ! ' ;PR INCIPAL l\1E1VI0RANDU1VI OF U!'\D E RSTANDING
A PRINCIPAL MEMORANDill-1 OF UNDERSTANDING (pt,,;fO U) made this d:iy, the 1 1 th of F ebrn:iry, 1 997
B ETWEEN :
The Rubber Research Institute, D epartment of Agriculture (RRIT-DOA), a Government Institution, with o flicc at Chatuchak, Bangkok 1 0900, Th:.i il:rnd (hereina fter re fe rred to as RRIT-D OA), represented by Dr. V ichitr Benjasil, D irector Genera l o f the Department of Agriculture.
AND
THE CIRAD-CUL TURES P E R E NNES, the Department of the Centre de Coopera tion Interna tionalc en Recherche Agronomique pour le Deve loppement (CIRA D ) having its registered o flice loca ted :.i t 6, rue Ju Genera 1 C lergeric, 7 5 1 1 6 Paris, Fra nee (hcreina fter re fered as CJRAD-CP), represe n ted by i\•l r. Patrice De Ve rnou, D i rector.
WHEREAS:
RRIT-DOA, establ ished rnr the purpose of i mproving the production and the qua l i ty of na tura l rubber through resea rch, Jevc lopnient a nd tr:iining, is desirous o r initiating resea rch coopera tion with C I RA D-CP,
2 C ! RA D-C P, us the Depa rtment in ch:.irgc of the rcse:.irch activities on n:.itura l rubber
with in, CIRA D, involved in tropica l :.igricu lturc :.i nd deve lopme nt is cager to intensify its involvement in the rubber rese:.i rch in the South-E:.ist Asia n region
AND WHEREAS:
RRIT-DOA and CIRAD-CP consider Ptv!OU to be their mutual, and possibly synerg1st1cs,
benefit and advantage to undertake col laborative research progr:immes and/or studies in the fields
specified hcre:i fter,
IT IS HEREI3Y AGREED, UNDER THIS PRINCIPAL MEMORANDUM OF UNDERSTANDING (hereina fter referred to as PMOU), between RRIT-DOA and
CIR..\.D-CP as follows :
Article 1 Objective of the P!VlOU
1 . 1 The objective o f the PMOU 1s to provide the basic framework fo r more specific
col laboration and co-L)peration between RRIT-DOA and CIRAD-CP, which 1s
governed by Specific Memorandum of Understanding (SMOU), with the view to develop and enrich the activities in research of the two partners.
1 .2 In the event that subsequent Sfv!OU arc signed by the Department of Agriculture and
CIRAD-CP to govern specific collaborative research projects, then the terms and
conditions of these Sl'v!OU supplement this Ptv!OU, and in case of con tlict preva il over
the l.itter.
Article 2 - Fields of specific co-operation
Among the .ircas identified for specific research collaboration arc :
2. 1 Rubber production research/activities.
2.2 Rubber chemistry and biotechnology and others research activities.
2.3 Training, information sharing and extension.
Specific MOU wil l be fom1ulated covering the above research activities (where applicable) and
the plan of action for each activities will be drawn up and agreed upon before embarking on any
Article 3-0blig:.itions :.ind limit:.itions
The personnel to be assigned to any coll:ibor::itive work under the PMOU and/or subsequent SMOU h::ive to be fa ithfully observe the terms of these MOU.
Article 4-Tr:.iining :.ind exchange of scientists
4. 1 CIRAD-CP will look favourably 011 applic:.1tio11s from research officers and scientists of
RRIT-DOA for a tt:.1chme11t to existing CIR.AD-CP research programmes (either in the
labor::itories or in the fields). as and when such opportllnities arise CIRAD-CP will assist in the integration of ::ippropriate qua lified candidates from RR!T-DOA for University courses for the French degrees of doctoral training (M.Sc and Ph.D) and/or for the Th::i i degrees of doctoral training Research for such degrees will be undertaken either Fr::ince ::ind/or partly in France and partly in Thailand.
4.2 RRIT-DOA will look favourably on appl ications from research officers or st::i ff of CIRA. D-CP for purpose of rese:.1rch in the fra mework
or
field and laboratorry works related to speci tic joint research projects.Article 5-Dur:.ition of the Pl\IOU
5.1 This P:-·fOU will be fi.)r a duration of five (5) years frnm the date of signature by both p:irties conta ined herein;
5.2 The dur:ition uf this Pi\[OU may be extended by mutual agreement.
Article 6-P:.irticip:.ition by other parties
Although the PMOU is be tween RRIT-DOA and CIRAD-CP, it is recogn ized that specific activities undertaken under the PMOU may need to involve 11011-RRIT and 11011-CIRAD-CP persons or i11stin1tio11s. The pa rticipation of such parties is encouraged. Provid ing their
participa tion is governed by the terms and conditions and spirit or this PMOU, in addition to any other terms and eonditil)ns specilica lly; determined and .igreed by the parties concerned in the
Article 7-P:.irticip:.ition in other :.ictivities
This PMOU or any subsequent SMOU will not prevent either RRIT-DOA or C I RA D-CP from engaging or participating in other activities rela ted to the activities being underta ken under this
PMOU and/or any subsequent S�vfOU.
Article 8-Collection :.ind deposition of specimens
\Vhenevcr specimens of plants, insects or any other ma teri:i ls arc required to be sent :ibroad for whatever reason, the rnles and regula tions of the relevant government agencies in force, governing the export of such materials will be strictly observed.
Article 9 -.-\ssignments of rights :.ind benefits
9. 1 The rights and bene fits. or any part thereof of each party con ferred under this Pl'v!OU and/or subsequent S1v!OU will not be :issigned to any other party or p:irties without first obta ining the pril)r wrincn consent of the other p:irty.
9.2 The publica tions presenting the results of the research c:irried our under the framework of this co-oper:ition will mention the two institu tion na mes RRIT-DOA and CIRAD-CP. The principal author will be the one who wrote the a rticles.
Article l 0-Gener:.il provisions
J O. I This Pl'v!OU will be understood as a statement o f intent to est:iblish co-oper:ition research be tween RRIT-DOA and CIRAD-CP for mutual bene fits. Nothing in this PMOU will be interpreted as crea ting any lega l obligation between RRIT-DOA and 10.2
CIRAD-CP.
All disputes arising out of the interpreta tion or the implementation o f this PivlOU will be
settled through amicable negotiations between RRIT-DOA :111d C I RA D-CP in keeping with the spirit of this Piv!OU.
IN COi'\FIRl\TATION O F their mutual aspir;itions. thc umkrsigncd h:ive hereby signed this Principal !\·knlllrandum uf Underst:ind ing;
S igned in the I I th o f Febru:iry, 1 99_7 ,
, \/ . G.,,--'l :____.,, \
For and on bch:i l f o f
Department of Agriculn1rc
(DOA)
in two (2) copies i1�_1the English
l:rng11�g.e...-_/J
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or :rnd on b�CI R.A..D-Cult11res Pcrenncs ( C I R.A.. D-CP)
AGREEMENT CONCERNING THE PROJECT
"PRODUCTION OF HEVEA PLANTLETS BY IN VITRO CULTURE.A G RE E MENT CONCE R.il\!ING T H E P RO J E CT
"PRODt:CTION O F H E VEA P LA NTLETS BY IN VITRO C U LTURE. AGRONOMIC E VA LUATION O F SUCH l\ I AT E RIA L"
B ETW E E N :
The RUB BER RES EARCH INSTITUTE OF THAILAND, DEPARTivlENT OF AGRTCUL TURE
a Thai public establishment, based i n B angkok
hereafter referred to as ·'RRIT-DOA"
represented by Dr. Yichitr Benjasil, Director General
of t he fi rst p art
A:\'D :
The CENTRE DE COOPERATION INTERN A TIONALE EN RECHERCHE
AGRONOMI QUE POUR LE DEVELOPPEl\'fENT - TRE E CRO P S D E P ARTl\'lENT -6 rue du General Clergeri e - 75 1 1 6 P aris - France
hereafter referred to as "C IRAD-CP" represented by \ fr P at rice De Yernou
of the second part W H E REAS :
CIRAD-CP, i n conj u nction with public and private partners, has b een carrying out research o n i n vitro culture for over ten years. l t has acqu i red consid erabl e expertise in this field and is keen t o work with logistical support from a part ner country i nvolved in rubber research and production.
RRIT-DOA has experi m ental plantat ions and labora t o ry i nstal lations, notably at the C hachoengsao Research Centre (CRRC). It is interested i n p roducing rubber plantlets by i n vitro culture t o improve yields from Thai plantations.
I
r
t
IT HAS B E EN A G RE E D AND D E CID E D A S FO L LOWS :
I. S C O P E O F THE A GR E E MENT
The parties agree to cooperate on
1 . 1 . A transfer of technology for in vitro plantlet acclimatization and production (defined in annex I) using a somatic embryogenesis procedure (defined in annex I) developed by CIRAD.
1 .2. Setting up in field trials in RRIT-CRRC plots using in vitro plantlets ( defined in annex I) produced in the CTRAD laboratory. These fields trials will be intended to compare the agronomic merits of in vitro plantlets with those of plants produced by horticultural propagation for gro\.vth, development and latex production.
11. CONTRIB UTION S OF THE P A RTIES
2. 1 . CIRAD-CP contribution
CIRAD CP shall provide the plant material required to set up the in vitro plantlet fields in the form of in vitro plantlets produced and acclimatized at CIRAD in \fontpellier and then in the form of in vitro plantlets produced at CIRAD in ?v{ontpellier and acclimatized at RRIT-CRRC installations.
CIRAD-CP shall provide scientific support throughout the project in the form of expert missions.
2.2. RRIT-DOA contribution
RRIT-CRRC shall provide the following logistical support :
- research installations with equipment suitable for acclimatizing in vitro plantlets - experimental plots on land appropriate for rubber tree development and for experimental monitoring
- an in vitro culture laboratory.
RRIT-DOA shall host the CIRAD-CP expert(s) sent to its research installations, giving the CIRAD-CP experts free access, possibly accompanied, to the areas planted with trees produced by in vitro culture.
RRIT-DOA shall assign the necessary staff to the project
RRIT-DOA shall procure the equipment required to apply the in vitro plantlet production and acclimatization method practised at CTRAD.
RRIT-DOA shall provide CIRAD-CP with experimental results obtained in the laboratory and in the field, under terms to be determined by mutual agreement between the parties.
III. CONTENT OF THE PROGRAMME
The programme comprises the follo\ving objectives 3 . 1 . To produce i n vitro plantlets at the CIRAD laboratories ... 'J
.) ·-·
3 .3 .
3 .4.
To pass on the methods and techniques proposed by CIRAD-CP for successful in vitro plant let acclimatization to the RRJT-CRRC staff assigned to the project. To plant young rubber trees obtained by somatic embryogenesis in the field, following an acclimatization phase.
To pass on the methods and techniques proposed by C IRAD-CP for successful production of in vitro plantlets by somatic embryo genesis of primary calli to the RRIT-CRRC staff assigned to the project.
3.5. To use the areas planted to determine the agronomic merits of trees produced by in vitro culture and their adaptation to specific soil conditions.
IV. PROVISIONAL SCHEDULE
1 99 7
4. I . CIRAD France. Start on training a researcher from RRIT-CRRC in the tissue culture laboratory and the greenhouses. Training geared towards acclimatizing rubber in vitro plantlets and handling calli and embryos during the different stages of plant regeneration by somatic embryogenesis (five weeks - second half of 1 996).
4.2. RRIT Thailand. Mission by a CIRAD-CP expert \\'ith despatch to RRIT-CRRC of the first acclimatized in vitro plantlets. The mission will cover the organization of the in vitro plant let acclimatization unit (delined in annex I). Discussions and drawing up field trial protocols. The mission will also include drawing up research protocols with a view to improving the somatic embryogenesis procedure using primary calli and to producing plantlets at the RRIT-CRRC laboratory. The trials will be carried out using genotypes chosen by RRIT.
4.3. Production of plantlets by somatic embryogenesis, by CIRAD France. Despatch by air of several batches of in vitro plantlets (total number around 300), half acclimatized beforehand at CIRAD and half to be acclimatized at RRIT-CRRC.
4.4. RRJT Thailand. Setting up of a nursery, preparation of control budded plants and installation of the first type I field trial (defined in annex II).
4.5. RRIT Thailand. End-of-year mission by a CIRAD-CP expert to analyse, along with the RRIT-CRRC researcher, the results obtained for in vitro plantlet acclimatization, the initial field plantings, and somatic embryogenesis of primary calli in the laboratory. The steps to be taken to solve any problems or improve
