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M.4 "P4*u, 03/lt'
REPUBLIQTIE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINISTERE DE L'ENSEIGNEMENT ST]PERMURE ET I}E LA RECHERCHE
SCTENTIHQUE
UNTVERSITE DEJIJEL ---E--i',,l-tl
Jl, ;;)';i-+rrtr rtJ'l' i5
Y i--(-_Jt
Facult6 des sciences exactes et informatiques Ddpartement de chimie
MEMOIRE
En vu de l'obtention du diplOme de Master en chimie Option : Chimie pharmaceutique
THEME
Evaluation de I'activit6 antibactdrienne de quelques analogues acycliques de dihydrobenzopyranes portant des fonctions ur6e ou thio-uroe
Presentd par :
BOUI{ECKKOUIIT Fatima. Z BOUIOUDENE Aziza
-ii'-))o) r*1.
Devant le iury:
Mr. HARROUCffi Kamel M-"MECHOUCHD, Nadia M-" BOUIDER Nafila
M.A.A M.A.A M.C.B
P16sident
Encadreur Examinateur
Universitd de Jijel Universit6 de Jijet Universit6 de Jijel
t< Ann6e universita ire ZO1,S / ZOt6 >,
refirIEqCIrvlW{Tg
Ir{os remercimtmts rtont tout prmtiiremmt d Oieu fe tout puissant pour fa 'l/o[ont6, fa santd et fa paticnce qu'ifnous o fonni pour terminer ce mimoire.
A tntre(Encaf,reu
fivl,,n tvllEffitou a{lE watru
I/otre compftence, votre mca[remmt ont toujours susciti notre profonfrespect.
ltfous eous remercie pourvotre accueiffe et votre conseifs.
'/euiffez trouver ici f eryression fe nos gratitudes et fe nos grandes est'imes,
Arqn en 6res [ujury
Wdsitent fu ICARKOffi{?E l(g.mef gqoffiituteur : $O,uIryEK g{ofik
fu(.essieur, fuLa[ame : fes jurys, ,uous nousfaites un gran[ fronneur lEn acceptant fe juger ce travait,
9{ow ternfls d remsrcie tou fes mseigrunts [e fa cfrimie pour feurs qnfrt*s scinffiuos et p6[agogQues.
Les mnnipuktians fe ce travaif ont fitdfaites aunivat4fe failoratoire fe fa pfinrmacohgit et pfrltocfiimie d fafacufti fes scicnces exactes [e f'()nhtersitd fe
1i4 un gran[ remercic pour fulor*ieur Snattffitlntlf,4 k (Directeur fe
fafioratoire et professeur d funiversiti [e ]ijet
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gtris ou [e bia n'ont apporti feurs sotficitutes pour a.cconpfrr ce
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I.1
I.1.1 r.1.2
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r.1.3.2
I.2
r.2.1
t.2.2
t.2.3
t.2.4
I.3
r.4
I.4.1
Sommaire
Introduction g6n6rale...
Chapitre I : Etude bibliographique de la microbiologique.
Les bactdries D6finition
Constitutions principale
Classifi cations morphologiques .
Staphylocoque.
Entdrobactdrie Antibiotique
Ddfinition
Classification des antibiotiques
Mode d'action des antibiotiques
M6canismes de rdsistance aux antibiotiques L'antibiogramme
La concentration minimale inhibitrice (CMI)
10
11
l1
lt
D6finition
I.4.2
I.4.3
Ddtermination de la concentration Minimale Inhibitrice (cMI) D6finition des catdgories cliniques S/VR.
Chapitre II : Etude chimique.
G6ndralit6 sur les benzopyranes. . " .
20
20
2l l9
I6 t9 t9
16
t6 t4
M6thodes de synthdse des urdes et des thiourdes T6
[1.1 M6thodes de synthdses des ur6es
il.1.1.1 Synthdse des urdes d partir des isocyanates
[.1.1.2 Synthdse des ur6es d partir des amines.
[.1.1.3 Interaction avec le dioxyde de carbone
II.l.2 M6thodes de synthdses des thiour6es.
ll.l.2.l. A partir d'amine aromatique et d,isothio cyanate
II.1.2.2, A partir d'amine et de carbone disulphide
11
13
il
II.1
tt.2 II.3.
trI.1.
TTT.2
Stratdgie de synthdse
Mdthode gdndrale d'accds...
Chapitre III : travaux r6alis6s et discussion.
Technique d' 6valuation de l, activit6 antibactdrienne.. . ..
Mat6riels et mdthodes
III.2.1 Bactdriesutilisdes.
z.+
24
25
4I.2.2 Pr6paration des solutions de produits 6valu6s. 25
Itt.2.3
ITI,2,4
III.2.5 III.3
Prdparation des disques
Mode op6ratoire. 26
Lecture des rdsultats
Rdsultats et discussion 26
Conclusion et perspectives 32
Liste d'abrtiviutions
CMI Concentration minimal inhibitrice.
"C Temp6rature en degr6 Celsius.
DMSO Dim6thvlsulfoxvde.
ATCC ATP Bn
Et KCOs
LCR
m
American type culture collection.
Addnosine triphosphate.
Benzyle.
Ethyle.
Ouvreurs potassiques (K* Channel Openers).
Liquide cdphalorachidien.
M6ta.
Me M6thyle.
mg Milligramme.
ml Millilitre.
Millimdtre.
Microlitre.
Microgramme.
pl
pg
Nd
o
PAB
P
Non ddtermind.
Ortho.
L' acide para-aminobenzoiQue.
Para.
Figure 01
Figure 02
Figure 03
Figure 04
Figure 05
Figure 06
Figure 07
Figure 08:
Figure 09:
Figure 10:
Figure 11:
Liste des lisures
structure de base des compos6s d tester
Repr6sentation sch6matique d' une cellule bact6rienne
laparoi cellulaire des bactdries gram positifet gram ndgatif les diffdrentes formes des bact6ries...
Structure chimique de vancomycine...
mode d'action des antibiotiques...
croissance bactdrienne en prdsence de concentrations croissantes d,un Antibiotique.
Concentrations minimales inhibitrices en milieu solide.
Deux exempies de benzopyranes.
Structure chimique de la Cromakalim... 15
Structure chimique de la levcromakalim t5
I2 I2
I4
Liste des tableuux
Tableau 01 Rdsumd des mdcanismes d'action des antibiotiques...
Tableau 02 Les compos6s urdes test6s avec les diffdrents groupes Rr et &
Tableau 03 Le l"sdrie des compos6s thiour6es testde avec les diff6rents groupes Rr et R.2.... ,, 22
Tableau 04 Le 2""s6rie des compos6s thiourdes (substitues) testde avec les diffdrents. ZJ
25
z5 groupes Rr, Rz, &, R4
Tableau 05 les diffdrentes souches bactdriennes utilis6es
Tableau 06 pr6paration de diffdrentes dilutions
Tableau 07 Activit6s antibactdrienne de la Ciprofloxacine sur quelques souches bact6riennes. 26
Tableau 08 Activitds antibact6rienne de quelques ur6es sur quelques souches bact6riennes... 27
Tableau 09 Activit6s antibact6rienne de quelques thio-urdes non substitu6s souches bactdriennes.
sur quelques 28
Tableau 10 Activit6s antibact6rienne de quelques thio-ur6es substitu6es sur quelques souches Zg bactdriennes
Tableau 11 diamdtres des zones d'inhibition des produits thiourdes non substitudes aprds les Diff6rentes dilutions
Tableau 12 diamdtres des zones d'inhibition des produits thiour6es substitudes aprds Ies...
Diffrrentes dilutions
22
30
30
Introfuction gdndrafe
Introduction g6n6rale
Introduction g6ndrale
La maladie infectieuse apparait quand la virulence du germe ddpasse les moyens de ddfense de I'individu. Principalement, f infection bactdrienne reste toujours le probldme major de la sant6 publique.
La rdsistance bactdrienne aux antibiotiques n'est pas un phdnomene conjoncturel ou passager, mais une propri6t6 intrinsdque de monde bacterienne.
Dans ce travail, nous avons int6ressd a dvaluer I'activite antibactdrienne de quelques analogues acycliques des dihydrobenzopyranes dejd slmthetis6s portent une fonction urde ou thio-ur6e sur quelques bact6ries connues : staphylococcus aureus, klebsiella, proteus, pseudo et Escherichia coli. La Ciprofloxacine est utilisde comme rdfdrence; c'est une 4-quinolone qui possede un puissant effet bact6ricide, neutralisant les enzymes bactdrierures de r6plication emp6chant toutes multiplications cellulaires.
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tr'igure 01 : structure de base des compos6s d tester.
D'autre part la lecture de r6sultats obtenus a fitd effectude aprds la mesure d'un paramdte pilier d'antibiogramme; la Concentration minimale inhibitrice (CIvII). Cette concenfration critique mesurable in vitro par la technique de diffirsion en milieu gdlosd,
Ce travail sera prdsent6 en trois chapitres dont le premier chapite est consacr€ d la recherche bibliographique autour de la microbiologie, le deuxidme chapitre comporte 1'6tude chimique concernant les benzopyranes, les ur6es et les thio-urdes. Les r6sultats obtenus sont discutd dans le troisidme chapitre.
En fin une conclusion g6n6rale.
Cfr,apitre
I
lEtufe 6i 6 fiograp frtque
fe fo microfiiofogie
Etude biblio e de la microbioloeie.
I. Introduction
La microbiologie a souvent 6t6 ddfinie comme 1'6tude d'organismes trop petits pour 6tre vue d I'ail nu, c'est -d-dire l'6tude des micro-organismes. Cette science est principalement concern6e par des organismes d'un diam0tre infdrieur d un millimdtre, qui sont invisibles et doivent Otre examin6e au microscope.
La relation micro-organismes - maladie fut loin d'0tre 6vidente et il fallut des anndes
pour que les scientifiques 6tablissent le lien enfie micro-organismes et d6veloppement de maladie [1]. Les infections microbiennes causdes par diffdrents micro-organisme, principalement
les infections bact6riennes sont excrdment courantes d l'origine d'une morbiditd et d'une mortalit6 substantielle [2].
I.l.Les bact6ries I.1.1.Ddfinition
Les bact6ries sont des microorganismes unicellulaires, font partie des protistes inferieurs ou procaryotes (figure 2); cuact5isent par I'absence de la membrane nucl6aire. De trds petit taille varie de 1 d 10 pm ; sont donc invisibles d l'eil nu [31. Elles ont en g6n6rale la taille des mitochondries et des chloroplastes d'une cellule eucaryote [1].
\ ,^fr)
-'--\A>
Figure 02 : Repr6sentation schdmatique d'une cellule bactdrienne.
Etude bibliographique de la microbiologie.
I. l.2.Constitutions principale a. Cytoplasme
Les bacteries, en tant qu'organisme procaryotes possddent un niveau d'organisation bien plus simple que les cellules eucaryotes, d6pourvue d'organites ddlimitds par une membrane.
Contient essentiellement d'eau (60% de poids sec) de nombreux ribosomes et un chromosome fait d'ADN d double brin, en gen1rale circulaire [1,4].
Le plasmide ; est un autre constituant cytoplasmique circulaire chez certaines bact6rie, se
trouve juste d cotd de chromosome, se sont des fragments d'ADN beaucoup plus petits que les chtomosomes. Comportent souvent des gdnes conferant des avantages s6lectifs aux bactdries;
comme la r6sistance aux antibiotique [4].
b. Membrane cytoplasmique
Elle prdsente chez toutes les bact6ries, joue le r61e de contr6ler les 6changes enhe le milieu int6rieur et ext6rieur de la cellule [4].
c. Paroi bact6rienne
Est le constituant principale d'une cellule procaryote d l'exception des mycoplasmes et quelques arch6obact6ries; enveloppe rigide, responsable de la forme des bact6ries et leur permettant de rdsister d la lyse osmotique. Cette force et cette fonne sont dues au mur6ine;
appeld encore peptidoglycane. [4,51.
La composition de la paroi diffdre d'un groupe de bactdries i l'aufre. Sur la base d'une coloration ddvelopp6e par Christian Gram en 1884, les bact€ries se divisent en deux groupos principaux [1].
. Bact6ries Gram -positif
Chez ces bact6ries, la paroi cellulaire est form6e essentiellement d'une seule couche homogdne, 6paisse, de peptidoglycane. Ce denrier est tavers6 lat6ralement pm diffdrents constituants : polysaccharide, des prot6ines, des acides teichoiques [1141.
r BactdrieGram-n6gative
La paroi des bactdries Gram-n6gative, est plus complexe que celle des bact6ries Gram positives, tandis que le peptidoglycane est une couche mince peu dense (figure 03) [1r4].
Etude bibliographique de la microbiologie.
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Figure 03 : La paroi cellulaire des bactdries Gram positives et gram ndgative Gram positif d gauche et gram n6gative d droite.
d. Capsule
La capsule est une structme extdrieurs, plus ou mois dpaisse qui entoure la pmoi de certaine bact6ries. Sa constitution est le plus souvent polysaccharidique, parfois prot6ique. La capsule jeu un rdle important dans le pouvoir pathogdne chez certains bactdries en emp6chant la phagocytose [4].
e. Fimbria ou Pili
Pili (de pilusnoil) ou Fimbria (frange) ; courtes appendices et fins coflrme les cheveux, se situant sur la zurface de paroi de nombreuse bactdries, plus frdquemment chez les bact6ries Gram n6gative. Ils peuvent intervenir dans les interactions avec autres bact6ries ou avec des cellules eucaryotes [31.
I. l.3.Classifications morphologiques
Les bact6ries se pr6sentent sous plusieurs formes diffdrentes: sph6riques (coques), allongees ou en b6tonnets (bacilles), des formes plus ou moins spiraldes (spirilles) (figure 04) t6t.
E!q{" bibliographique de la microbiologie.
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Figure 04 : Les diffdrentes fonnes de bact6ries.
I. 1.3. l.Staphylocoque
. Staphylococcrrsaureus
Staphyloccocus aureus est l'espdce principale de genre staphylococcus. Les staphylocoques ont observd par Pasteur en 1880 dans un pus. Sont des coques (cocci) d Gram
positi{ group6s en amas ayant la forme de grappes de raisin. S.aureus est le microbe de suppuration caractdrisd par une coloration dor6 [71.
I. 1.3.2. Entdrobactdrie
. Escherichro coli
E.coli Appel6 aussi colibacille; est un bacille d grarn n6gative. Constitue la majoritd de la flore intestinale humaine. Elle peut devenir un agent pathogdne responsable de differentes infections notamment les infections urinaires [81.
. Klebiellapnanmiae
Autrement appel6 bacille de Friedlander. Ce sont des bacilles d gram n6gative, largement touv6 dans l'eau, les sols et les poussidres. Sont i 1' origine des infections respiratoires [81.
t Proteus
Est une espdce trds mobile, cofllmensale de tube digestif, d I' origine des infections urinaires [71.
5fl.3
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SrrC|tU tUSlf0nfft
Etude bibliographique de la microbiologie.
. Pseudomonas aeraginosa
Bacille d gram n6gative, reprdsente I'espdce type de ce geffe des baot6ries, trds mobile cormus aussi sous le nom bacille pyocyanique, frds repandus dans la nature, la plus pathogdne caracter'tsf par leur r6sistance aux antibiotiques [71.
I.2. Antibiotique:
I.2.1. D6finition
Un < antibiotique > (du glec anti, contre et bios,la vie) est tout compos6 chimique d'origine biologique ou produit par synthdse ou semi-synthdse dont I'activitd th6rapeutique se
manifeste d trds faible dose d'une manidre sp6cifique par I'inhibition de la multiplication ou de d6truire des micro-organismes.
Les antibiotiques sont d6finis par leur :
. activit6 antibact6rienne (spectre d'activit6), . toxicitd s6lective (mode d'action),
. activit6 en milieu organique (lharmacocin6tique), . bonne absorption et diffusion dans I'organisme [91.
I.2.2.Classifrcation des antibiotiques
Les antibiotiques doivent tuer (effet bact6ricide) ou inhiber (effet bact6riostatique) les mioro-organismes, sans d6truire nos cellules. En effet, pour pouvoir Ohe utilisable en pratique clinique, un antibiotique doit se caract6riser par une action spdcifique sur les germes vis6s sans perturber le fonctionnement des cellules de I'h6te [101.
Les antibiotiques peuvent Otre class6s selon plusieurs critdres : I'origine, la nature chimique,le m6canisme d'action et le specfre d'action [91.
On distingue des antibiotiques :
' ;:;l:rffi:n ainsi appel6es parce que leur molecule comporre un cycre B
lactame. Ils se rdpartissent en trois groupes [11] :
. Groupe I : il comporte le cycle B lactarne et un cycle thiazolidine . Groupe tr : il comporte un cyole lactame et un cycle dihydrothiazine . Groupe Itr : il comporte un noyau limitd au cycle B lactame [91.
Etude bibliographique de la microbiologie.
. Les Aminosides ou Aminoglycosides
Le premier antibiotique de ce groupe qui ait 6td iso16 est la streptomycine dont la d6couverte fut. En effet, d partir de 1939, Waksman et coll. Examindrent syst6matiquement un grand nombre de micro-organismes du sol d la recherche d'un producteur d'antibiotique utilisable. En1944, aprds avoir examind plus de10000 espdces, ils isoldrent la sfreptomycinel.
D'une souche de streptomyces griseur. La sfucture chimique est d base de sucres et notamment de sucres aminds, d'ori le nom donn6 d ce groupe [11].
. Ph6nicol6s / Chloramphdnicol et d6riv6s :
Isol6 en 1947 d partir de streptomyces venezuelae et introduit en clinique en I949,Ie
chloramph6nicol (initialement chloromyc6tine) d 6t6le premier antibiotique d large specfre aprds les sulfamides. Il fut synthdtis6 dds 1950 du fait de la simplicitd de sa structure. Il contient un noyau aromatique avec un groupe nitro en para, uno chaine aminopropanediol contenant deux cmbones asym6triques et une chaine acyle lat6rale. Sur les 4 diastdrdoisomdres possibles, seul le D-theo possdde une activitd antibactdrienne. Il existe deux ddrivds principaux, le thiamph6nicol utilis6 en m6decin humain et le florf6nicol utilis6 en mddecin v6t6rinaire [12].
. Les T6tracyclines
La famille des tdtracyclines comprend plusieurs antibiotiques de fonnules chimiques trds voisines. Le noyau de la mol6cule est constitud par l'accolement de quafre cycles hexagonaux, ce
qui explique le nom donn6 d ces produits. Chacun d'eux est individualis6 par la nafure des
radicaux fix6s sur ce noyau. La chlortdtracycline fut le premier antibiotique de ce groupe, isol6
en 194'7 de streptomyces aureofaciens. Depuis ont &e introduit en thdrapeutique : I'oxyt6tracycline [1 11.
r Les Macrolides
Trois groupes d'antibiotiques (les macrolides, les lincosamides et streptogramines) prdsentent de nombreux points communs dans leurs propri6t6s, leur specfie antibact6rien et leurs modalitds d'action.
La plupart des macrolides sont produit par divers streptomyces, la formule de toutes ces substances comporte un grand cycle lactone, ou olide, d'ori le terme de macrolides. A ce cycle sont li6s un ou plusieurs sucres, amin6s ou non [,11.
Etude bibliographique de la microbiologie.
I Les sulfamides
D6couvert et 1932 par < Domagk >. Les zulfamides sont des analogues structuraux de l' acide para-aminobenzoique (PAB) t12J.
Les modifications de la formule ont 6t6 faites par substitution soit sur le groupement
NHz, soit sur le groupement SOzNHz. Plusieurs composds obtenus par substitution sur le radical SOzNHz se sont r6v6l6s int6ressants et plus actifs [11].
r Les quinolones
Ce sont des agents antibact6riens de synthdse chimique, utilisds jusqu'ici surtout pour le traitement des infections urinaires comme l'acide nalidixique [11].
Il a surtout 6td 6tudi6 pour l'acide nalidixique. Ce produit inhibe d la fois la synthdse de
I'ADN et de I'ARN, ces deux actions 6tant ind6pendantes [11].
. Glycopeptides
Vancomycine et teicoplanine sont deux mol6cules comprend une fonction glucidique associde d des acides amin6s [11].
! [,
Figure 05 : structrue chimique de laVancomycine
I.2.3. Mode d'action des antibiotiques
Les antibiotiques agissent sur les bactdries en inhibant des fonctions physiologiques precises telles que la synthdse de la paroi ou de peptidoglycane (bdtalactamines, glycopeptides, fosfomycine), la r6plication-transcription de I'ADN (fluoroquinolones, rifampicine, sulfamides, trimdthoprime), la synthdse prot6ique (aminosides, t6tracyclines, macrolides, chloramphenicol, oxazolidinones) ou encore la respiration cellulaire (polymyxines, daptomycine). Pour exercer
leur action, ils doivent se lier d des cibles mol6culaires spdcifiques le plus souvent
intracellulaires (figure 5) 1121.
Etude bibliographique de la microbiologie.
(A tnhibition de ta synthose
@ Autres rndcanisrrres Sulfamidrs
Trim€,thoprime
Figure 06 : Mode d'action des antibiotiques.
Les mdcanismes d'actions pour ces antibiotiques sont regroupds dans le tableau 1 Tableau 01. : Rdsumd des m6canismes d'action des antibiotiques [13].
Antibiotique M6canisme d'action Structure chimique
p- lactamines
Glycopeptides
Inhibition de la synthise de peptidoglycane
oE'-\_i_sr-/cFr"
,l*-*/\cn"
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,Urr-f
inhibition des PLP, par analogue structurale du cycle p- lactame avec le dipeptide terminal D-ala- D-ala du pr6curseur disaccharide-pentapeptide.
Entrainant une lyse bactdrienne. Les p- lactamines sont bact6ricides
fixation zur le dipeptide tenninal D-ala-D-ala du disaccharide pentapeptide empdchant par
encombrement stdrique, l'action des
trancglycosylases. Ils sont bactdriostatiques.
Aminosides
T6tracyclines
Inhibition de la synthdse prot6ique
Les aminosides sont bact6ricides, ils inhibent la franslocation du peptide en formation; par fixation sur la sous-unit6 30S du ribosome.
Tnhibition de la fixation de I'aminoacyle-ARNt par
fixation d la sous-unit6 30S du ribosome. ils sont
bact6riostatiques. T6tracyclines
Etude biblio microbiol
Ph6nicol6s
Macrolides
Fixation rdversible d la sous-unlte SOS Oe
ribosomes ; ils bloquent l'dlongation du peptide en
r6duisent I'activitd catalytique de peptidyl-
transf6rase, les Phenicoles sont bact6riostatiques.
H CH2OH
orNl /r?-?-*tl
OH H C=O
I Uru12
Chloramph6nicol
Inhibition de la fixation de l'aminoacyle-ARNtde la liaison peptidique par fixation d la sous-unitd 50S du ribosome, ils sont bactdriostatiques.
Erythromycine
Quinolones
Sulfamides
Inhibition de la synthise des acides nuctAques
Acide nalidixique
Fixation sur le complexe "ADN-AD].Lgfasd et forrnation d'un autre complexe ADN gyrase- quinolone en emp6chant la replication et la transcription de I'ADN bact6rien. Les quinolones ont une action bactdricide.
Les sulfamides ont une activit6 bacteriostatique. ils
entrent en comp6tition avec le pAB bloquant ainsi I'action de dihydropt6roate synth6tase et donc l'acide tdtrahydrofolique (cofacteur de la synthdse ult6rieur des bases puriques et pyrimidiques).
/,--'i\ 0 // \\ tl
H,Na hfi-*r,\-0
sulfanilamide
1.2.4 .M6ranismes de r6sistance aux antibiotiques
Les bactdries ont, par ailleurs d6montr6 leur capacitd d
antibiotiques ptr une multitude de m6canismes dont la nature et especes et les produits [121.
On peut classer les mdcanimes de r6sistance en 4 groupes :
- L'inactivation enz5rmatique de l,antibiotique.
- La modification de la cible.
- La diminution de la permdabilitd membranaire.
- L'excrdtion de l'antibiotique [l].
- La r6sistance aux antibiotiques peut 6tre naturelle ou acquise.
accroitre leur rdsistance aux l'efficacit6 vmient suivant les
Etude biblio hique de la microbioloeie.
r R6sistance nafurelle
La r6sistance naturelle est un caractdre prdsent chez toutes les souches appartenant d la m€me espdce. On peut citer par exemple, la rdsistance naturelle des ent6robact6ries et des P seudomonds auxmacrolides [101.
o R6sistance acquise
La r6sistance acquise peut 6tre soit par acquisition de gdnes (r6sistance des Staphylocoques d la vancomycine), soit par mutation chromosomique (r6sistance des Citrobacter aux c6phalosporines) [101.
La rdsistance acquise r6sulte d'une modification de patrimoine gdndtique. Il peut s,agit d'une mutation qui peut enffainer, par exemple, une modification de la cible de l"antibiotique ou bien diminuer sa p6n6tration. Le plus souvent il s'agit de l'acquisition d'ADN erranger pouvant provenir de la m6me espdce ou d'espdces bactdriennes diffdrentes. L'acquisition d'ADN se fait le plus souvent par conjugaison. Elle se fait alors par l'interm6diaire de plasmides ou de
transposons conjugatifs qui peuvent porter un ou plusieurs gdnes de r6sistance [L].
I.3. L'antibiogramme
Un antibiogramme est une technique de laboratoire visant d tester la sensibilit6 d'une souche bact6rienne vis-d-vis d'un ou plusieurs antibiotiques supposes ou connus [141.
Le principe consiste d placer la culture de bact6ries en prdse,nce du ou des antibiotiques et d observer les cons6quences sur le ddveloppement et la survie de celle-ci. Il existe trois types d'interprdtation selon le diamdfre du cercle qui entoure le disque d'antibiotique: souche ou bact6rie sensible, interm6diaire ou rdsistante.
I.4. La concentration minimale inhibitrice (CMI) I.4.f. D6finition :
La CMI est ddfinie comms la plus faible concentation d'antibiotique de demi en demi, qui entraine une inhibition de visible en 24h [15].
d'une gamme de dilutions toute croissance bactdrienne
I.4.2.D6termination de Ia concentration Minimale Inhibitrice (cMI)
Afin de pouvoir conclure sur la sensibilite d'une souche i un antibiotique donn6, il faut d6terminer sa CMI vis d vis de cette mol6cule [151.
TL
I.4.3. D6finition des catdgories cliniques S/I/R
r Sensibles
Les souches (S) sont celles pour lesquelles la probabilit6 de succds th6rapeutique est acceptable; on doit s'attendre i un effet th6rapeutique dans le cas haitement d dose habituelle parvoie gen1rale.
r Interm6diaires
Les souches (I) sont celles pour lesquelles le succds th6rapeutique est imprdvisible. La catdgorie -interrr6diaire- est la plus h6t6rogdne.
r R6sistants
Les souches (R) sont celles pour lesquelles il existe une forte probabilitd d,6chec
thdrapeutique quel que soit le type de fiaitement [13].
Etude biblio ue de la microbiol
13
Cfrryitre
II
lEtufe cfrimiqut
Etude chimi
II. Gdn6ralit6 sur les benzopyranes
Les composds dans lesquels un noyau benzdnique et un noyau de pyrane sont
fusionnds avec de divers niveaux de saturation et d'oxydation, sont trds communs dans la nature. Font partie des benzopyranes [171.
Deux classes de benzopyranes (figure 8), ont 6t6 d6crites selon la position de l,atome d'oxygdne [18].
l-Benzopyrane 2-Benzopyrane
Figure 09 : Deux exemples de Benzopyranes.
Benzopyrane, souvent appel6 Chromdne; est l'un des classes des compos6s organiques structurellement diversifid contenues dans les produits naturels. apparait notamment dans les alcaloides naturels, flavonolde, tocoph6rol et anthocyanines. Ainsi que dans des moldcules spthdtiques. C'est un systdme hdtdrocyclique rdsultant de la fusion d,un cycle benzdnique avec le noyau de pyrane hdt6rooyclique [19, 20r2rl.
Au cours de ces dernidres anndes, la synthdse de dihydrobenzopyranes et leurs d6riv6s ont attires I'attention de chimistes; en consequence divers molecules ont prouv6s des effets biologiques intdressants [22J.
Notre attention va focaliser dr l'une de ces mol6cules synthdtique, appartient a la s6rie des 4-amido-3'4-dihydro-2H'l-benzopyrane-3-ol; La cromakalim en tant que prototype de cette famille, qui est un activateur des canaux potassique (Karp) [231.
t4
Etude chimi
Figure 10 : Structure chimique de Cromakalim.
Rappelons, tout d'abord que Les canaux potassiques sensibles d l'ATp forment la classe de canaux potassique dont la diversit6 structurale et fonctionnelle est la plus compliqude, sont distribu6s au niveau de la membrane cellulaire des mammifdres, Ori ils jouent un rdle essentiel via le contrdle de divers processus physiologiqu e 1241. Se ferrne lorsque la concentration intracellulaire d'ATP augmente, il s'ouwe lorsque la concentration cytoplasmique d'ATP diminue [25].
Les canaux Karp sont activds par une nouvelle classe des pharmacologiquement Actifs appelds ouweurs des canaux potassique (KCos).
l'hyperpolarisation de diffdrents tissus cellulaire via l'activation de canaux sensible n I'ATP [261.
composds
Ils assurent potassique
Plusierns 6tudes ont 6t6 effectu6s in vivo; suggdrent que la Cromakalim peut exerce une activitd bronchodilatateur utilisd dans le traitement de l,asrhme [221.
A cause d'une toxicit6 r6nale, I'activit6 de compos6 est rdside d l'dnantiomdre l6vogyre ; 35 ,4R levcromakalim I2Sl.
Figure ll : Structure chimique de levcromakatim.
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