QUALITE DU LAVAGE DES MAINS CHEZ UN GROUPE D’ECOLIERS A COTONOU.

(1)

Qualité du lavage des mains chez un groupe d’écoliers à Cotonou

Réalisé et soutenu par Arnaud CHIGBLO & Kabirou SOUMAÏLA Page 1

REPUBLIQUE DU BENIN

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MINISTERE D’ETAT CHARGE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

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UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI (UAC)

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ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI (EPAC)

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DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE (GBH)

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RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE

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Option : Analyses Biomédicales

Présenté et soutenu par :

Arnaud CHIGBLO & Kabirou SOUMAÏLA

Présidente du jury: Prof Evélyne LOZES Membre 1 : Prof Honoré BANKOLE Membre 2 : Dr Victorien DOUGNON Tutrice de stage Superviseur

QUALITE DU LAVAGE DES MAINS CHEZ UN GROUPE D’ECOLIERS A COTONOU.

Mme Agnès HOUNWANOU Inspectrice d’action sanitaire A1 Laboratoire Central

Ministère de la Santé

Prof. Honoré S. BANKOLE Microbiologiste

Maître de Conférences des Universités du CAMES EPAC/ UAC Année académique : 2013-2014

7^ème promotion

(2)

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REPUBLIQUE DU BENIN

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MINISTERE D’ETAT CHARGE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

*******

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI

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ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI

DIRECTEUR : DIRECTEUR ADJOINT :

Prof. Félicien AVLESSI Prof. Clément BONOU

CHEF DE DEPARTEMENT :

Dr. Julien A.G. SEGBO

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LISTE DES ENSEIGNANTS

DU DEPARTEMENT DE GENIE DE

BIOLOGIE HUMAINE

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I. ENSEIGNANTS PERMANENTS

N° NOMS ET PRENOMS MATIERES ENSEIGNEES 01 Feu ADISSSODA Cyrille Anglais

02 AHOYO Théodora Angèle Microbiologie Générale et Médicale 03 AKPOVI Casimir Physiologie Humaine et Biochimie

Métabolique

04 ANAGO Eugénie Biochimie Métabolique

05 ANAGONOU Sylvère Education Physique et Sportive 06 ATCHADE Pascal Parasitologie médicale

07 BANKOLE Honoré Bactériologie Appliquée

08 DOSSOU Cyriaque Techniques d’Expression et Méthodes de Communication

09 HOUNSOSSOU Hubert Biométrie et Anatomie Générale 10 LOKO S. Frédéric Biochimie Clinique

11 LOZES Evelyne Immunologie Générale

12 SECLONDE Hospice Immuno-Hématologie, Transfusion Sanguine et Leadership

13 SEGBO A. G. Julien Biologie Générale et Biologie Moléculaire

14 SENOU Maximin Histologie Appliquée

15 TOPANOU Adolphe Hématologie Générale et médicale 16 YOVO K. S. Paulin Pharmacologie et Toxicologie

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II. ENSEIGNANTS VACATAIRES

N° Nom et Prénoms Matières enseignées 01 ABLEY Sylvestre Déontologie Médicale

02 ADOMOU Alain Physique

03 AGBANGLA Clément Génétique Moléculaire

04 AGOSSOU Gilles Législation et Droit du Travail 05 AÏKOU Nicolas Biochimie Structurale

06 AKOGBETO Martin Entomologie Médicale

07 BINAZON Claude César Soins Infirmiers et Phlébotomie 08 DARBOUX Raphaël Histologie Spéciale

09 DESSOUASSI Noël Biophysique

10 DOUGNON T. Victorien Méthodologie de Recherche 11 DOSSEVI Lordson Techniques Instrumentales 12 FOURN Léonard Santé Publique

13 HOUNNON Hyppolite Mathématiques 14 MASLOKONON Vincent Histologie Générale 15 SENOU Maximin Histologie Spéciale

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Arnaud C.

DEDICACE

Kabirou S.

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A l’Eternel DIEU Tout-Puissant

Tu as veillé sur nous depuis le début de cette formation. Pour tes bienfaits, tes bénédictions et ta protection, que la grâce te soit rendue.

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REMERCIEMENTS

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 Au Professeur Frédéric LOKO pour nous avoir permis d’effectuer notre stage au Laboratoire National de Santé Publique.

 Au Professeur Honoré S. BANKOLE notre superviseur ! Votre sens du travail bien fait et votre rigueur ont permis la réalisation de ce travail.

Malgré vos multiples occupations, vous avez été toujours présent et disponible. Par vos conseils et votre sens de la discipline, vous avez été, pour nous, comme un père. Puisse l’Eternel vous accorder longévité et prospérité afin que les générations futures bénéficient aussi de vos connaissances.

 A Mme Agnès HOUNWANOU, plus qu’une tutrice vous avez été pour nous une mère de par votre soutien, vos analyses, vos sages conseils et votre attention à notre égard. Vous avez su nous faire bénéficier de vos expériences et de votre savoir-faire. Que le Seigneur vous comble de sa grâce.

 A M. Emmanuel DJOSSOU et M. François HOUNSOU, pour votre soutien, vos sages conseils et les efforts consentis pour la réalisation de ce travail, nous vous remercions infiniment.

 A tout le personnel du Service des Explorations Diagnostiques (SED), pour votre disponibilité, votre soutien, vos multiples conseils ;

 A tous nos camarades de promotion, en souvenir des moments de joies et de peines vécus ensemble. Courage et persévérance.

 Au Dr. Victorien T. DOUGNON, malgré que vous soyez très occupé, vous avez porté une attention particulière à notre travail.

 Aux enseignants de l’EPAC, en particulier ceux du département de Génie de Biologie Humaine, recevez ici le témoignage de notre profonde gratitude.

Arnaud et Kabirou

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 A mon père Gaston CHIGBLO

Dans l’amour et la rigueur, vous m’avez donné le goût du travail bien fait.

Recevez ce travail en signe de ma profonde reconnaissance. Puisse Dieu vous accorder la longévité afin que vous puissiez jouir les fruits de vos efforts.

 A ma mère Agathe EKE KOUKOU

Trouvez ici la concrétisation de vos vœux. Que Dieu vous accorde une longue vie pour jouir pleinement des fruits de vos efforts.

 A mes frères et ma sœur

Votre amour fraternel m’a toujours réconforté. Recevez toute ma reconnaissance. Voyez en ce travail, un exemple à suivre. Que Dieu nous unisse davantage et fasse de nous des élites.

 A mes oncles, mes tantes, mes cousins et mes cousines

Pour vos soutiens, vos aides financiers, vos conseils et votre sympathie.

Recevez tous ma gratitude et mon affection.

 A Clarice AFFO qui m’a toujours soutenu. Que Dieu nous unisse davantage.

 A mon doyen Kabirou SOUMAÏLA avec qui ce travail a été réalisé.

 A tous ceux qui de près ou de loin ont contribué à la réalisation de ce travail. Merci infiniment !

Arnaud

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 A mon feu père Soumaïla ISSIAKA et ma feue mère Salimatou OSSENI Que la terre vous soit légère.

 A mes frères Kassoumou, Mouinou, Moumouni, Koudous, et mes sœurs Sophiath et Alimatou

Votre amour fraternel m’a toujours réconforté. Recevez toute ma reconnaissance. Que Dieu nous unisse davantage et fasse de nous des élites.

 A mes oncles, mes tantes, mes cousins, mes cousines, mes beaux-frères, mes belles-sœurs, ma belle-mère, mes neveux et mes nièces

Pour m’avoir soutenu par vos multiples conseils et votre sympathie.

Recevez tous ma gratitude et mon affection.

 A ma très chère épouse Amina ABASS

Pour ton amour et ta présence, reçois ici ma sincère gratitude.

 A Arnaud CHIGBLO

Merci infiniment à toi, cher petit frère ! Que le Seigneur te soutienne.

 A Ganiou SANNI, pour tout le soutien et le réconfort que tu m’as toujours apportés. Merci !

 A tous les amis, recevez ici le fruit de nos efforts.

 A tous ceux qui, de près ou de loin, m’ont aidé de quelque manière que ce soit.

Kabirou

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HOMMAGES

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A son excellence le Président du jury

C’est un honneur pour nous que vous acceptiez de présider le jury de notre soutenance. Veuillez recevoir nos hommages respectueux.

Aux honorables membres du jury

Pour avoir accepté de siéger dans ce jury et de juger ce travail. Nos hommages à vous.

Vos remarques et suggestions contribueront à l’amélioration de ce travail.

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LISTE DES ABREVIATIONS

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ADN : Acide désoxyribonucléique NaCl : Chlorure de sodium

°C : degré Celsius cm : Centimètre

DNase : Désoxyribonucléase EMB : Eosine Bleu de Méthylène BCC : Bouillon Cœur-Cervelle g : Gramme

L : Litre µ : Micron ml : Millilitre

% : Pourcentage

qsp : Quantité suffisante pour pH : Potentiel Hydrogène h : heure

N : Négatif P : Positif

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LISTE DES TABLEAUX ET

FIGURES

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I. LISTE DES TABLEAUX

Tableau I : Répartition des écoliers selon le sexe……….. 26 Tableau II : Répartition des écoliers selon l’âge....…….……….. 27 Tableau III : Répartition des échantillons en fonction des résultats au

Gram.………. 28

Tableau IV : Répartition des résultats au Gram en fonction du sexe….. 29 Tableau V : Répartition des échantillons en fonction du nombre

d’espèces bactériennes identifiées et des mains…………. 30 Tableau VI : Répartition des espèces bactériennes identifiées en

fonction des mains……….… 31 Tableau VII : Répartition des échantillons en fonction des résultats au

Gram ………... 32 Tableau VIII : Répartition des résultats au Gram en fonction du sexe ... 33 Tableau IX : Répartition des échantillons en fonction du nombre

d’espèces bactériennes identifiées et des mains ……….... 34 Tableau X : Répartition des espèces bactériennes identifiées en

fonction des mains... 35

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II. LISTE DE FIGURE

Figure : Organigramme de la section de bactériologie………...16

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RESUME

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RESUME

Le lavage des mains constitue l’un des moyens de lutte contre les maladies infectieuses. Pour être efficace, il doit se faire selon une technique appropriée. La présente étude a eu pour objectif d’évaluer la qualité de lavage des mains chez un groupe d’écoliers à Cotonou. A cet effet, 128 échantillons obtenus par écouvillonnage des mains de 32 écoliers avant et après lavage de mains non guidé, ont été acheminés au laboratoire pour identifier les éventuelles espèces bactériennes présentes. Au terme de l’étude, les résultats ont montré que le lavage des mains n’avait eu aucun impact sur les charges bactériennes portées par les mains de plus de 87% des écoliers.

Mots-clés: Evaluation, qualité, lavage des mains et écoliers.

ABSTRACT

The washing of the hands constitutes one of the struggle means against the infectious illnesses. To be efficient, it must be made itself according to a suitable technique. The present survey had for objective to value the quality of washing of the hands at a group of schoolchildren in Cotonou. For that, 128 samples gotten by swabbing of the hands of 32 schoolchildren before and after washing of no guided hands have been routed to the laboratory to identify the possible present bacterial species. To the term of the survey, the results showed that the washing of the hands had not had any impact on the bacterial loads carried by the hands of more than 87% of the schoolchildren.

Keywords: Assessment, quality, washing of the hands and schoolchildren.

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SOMMAIRE

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INTRODUCTION ………...1

I SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE………...4

1. APERCU GENERAL SUR L’HYGIENE………5 2. HYGIENE DES MAINS………...6 3. PREALABLES POUR L’HYGIENE DES MAINS……….9 4. PROCEDURES ET INDICATIONS DU LAVAGE DES MAINS……10

II MATERIEL ET METHODES………..14

1. CADRE ………..15 2. MATERIEL ………18 3. METHODES ………..20 III RESULTATS ET COMMENTAIRE………...…24 1. RESULTATS………..25 2. COMMENTAIRE………...36 CONCLUSION ET SUGGESTIONS……….39 CONCLUSION………...40 SUGGESTIONS………..42 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES………44

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INTRODUCTION

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L’hygiène est un élément essentiel de la mission de la santé publique visant à réduire la transmission et les conséquences de la maladie [7]. Le déclin marqué des décès causés par des maladies infectieuses observé dans les pays riches au cours du dernier siècle n’aurait pu se réaliser sans d’importants progrès en hygiène et surtout en hygiène des mains [7, 12].

En effet, les mains représentent l’outil le plus souvent utilisé par les Hommes et sont en contact permanent avec l’environnement, qui renferme des bactéries, des virus mais aussi des éléments toxiques.

Au nombre des maladies infectieuses contractées par l’intermédiaire des mains, les maladies diarrhéiques occupent une place de choix. Les enfants payent un lourd tribut [1].

Selon l’OMS, environ 3,5 millions d’enfants de moins de 5 ans meurent chaque année dans le monde des suites de maladies diarrhéiques et de pneumonie [11].

Aujourd’hui au Bénin, de nombreuses séances de sensibilisations sont organisées à l’endroit des populations sur la technique et l’importance du lavage des mains.

Le lavage correct des mains constitue alors l’un des moyens les plus efficaces de prévention contre les maladies infectieuses [7, 12, 4]. C’est la raison pour laquelle depuis plusieurs jours, des séances de sensibilisation sur la technique du lavage des mains sont multipliées à l’endroit des populations béninoises.

Le présent travail s’est alors donné comme objectif général d’évaluer la qualité du lavage des mains chez un groupe d’écoliers.

Spécifiquement, il s’agit de :

 Ecouvillonner les mains chez un groupe d’écoliers avant et après le lavage des mains ;

(25)

 Identifier les différents germes présents dans les prélèvements obtenus par écouvillonnage ;

 Comparer les résultats obtenus avant le lavage des mains à ceux obtenus après.

Le présent document comporte dans sa première partie une synthèse bibliographique sur le lavage des mains. La deuxième partie prend en compte la méthodologie suivie. Enfin, les résultats suivis du commentaire sont exposés dans la dernière partie.

(26)

PREMIERE PARTIE

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

(27)

1. APERÇU GENERAL SUR L’HYGIENE

Etymologiquement le terme hygiène vient du mot grec « hygienon » qui signifie santé [13]. Selon le dictionnaire Robert : « c’est l’ensemble des principes et des pratiques tendant à préserver et à améliorer la santé ». Le manque d’hygiène est incontestablement le principal coupable de l’incrimination de nos aliments, de nos milieux de vie, de nos propres corps comme réservoir de toute sorte de maladie. Donc, pour parler d’hygiène des mains nous devrons impérativement passer sur l’hygiène dans ses autres branches qui sont entre autres : l’hygiène corporelle, l’hygiène alimentaire et plus particulièrement l’hygiène hospitalière.

1.1. HYGIENE CORPORELLE

La peau est le siège d’un écosystème microbien riche et varié qui joue un rôle essentiel dans l’équilibre de l’organisme. Les zones sèches de la peau sont peu colonisées par les microbes contrairement aux zones humides. Une bonne hygiène corporelle permet d’éviter la propagation de ces germes vers des individus surtout de groupes sensibles (bébés, femmes enceintes, personnes âgées) ou vers des personnes déjà affectées par une maladie. La douche quotidienne pour tous doit devenir alors une réalité. Une bonne hygiène buccale limitera la contamination aéroportée de l’entourage par le biais de la toux et des éternuements [14].

1.2. HYGIENE ALIMENTAIRE

La plupart des études réalisées en ce sens estiment que la moitié des intoxications alimentaires domestiques sont dues à des mauvaises pratiques d’hygiène. Donc une meilleure connaissance et le respect strict des règles d’hygiène auraient un impact significatif sur l’incidence des intoxications alimentaires [3].

(28)

1.3. HYGIENE HOSPITALIERE [7, 12]

Du point de vue médical, l’hygiène est l’ensemble des moyens et pratiques visant à améliorer et à assurer le bien être physique et mental de l’individu et à faciliter son adaptation harmonieuse avec le milieu ambiant. Donc l’hygiène hospitalière va s’attacher à harmoniser les rapports entre l’homme malade et l’hôpital. De ce fait, on peut dire que : l’hygiène hospitalière est avant tout une politique visant à prévenir et contrôler les infections hospitalières grâce à :

 Des mesures et techniques évitant l’apparition et la transmission des micro-organismes pathogènes.

 Un ensemble d’actions intéressant la propreté, la salubrité, le choix des produits et de matériel, la dispensation des soins, le circuit de la chaîne alimentaire.

 Des comportements individuels et collectifs.

2. HYGIENE DES MAINS 2.1. Historique

En 1795, Alexander Gordon, accoucheur et chirurgien naval, avance que la fièvre puerpérale était probablement transmise d’une patiente à l’autre par les sages femmes et les médecins [8].

Oliver Wendell Holmes établit le premier que les mains des soignants jouaient un rôle dans la transmission de la fièvre puerpérale [8, 9]. Après la mort de l’anatomiste Kolletchka des suites d’une piqûre « cadavérique » en 1861, le médecin obstétricien Hongrois Phillipe Ignaz Semmelweis affirme que « ce sont les doigts des étudiants souillés au cours des récentes dissections qui vont porter les fatales particules cadavériques dans les organes génitaux des femmes enceintes et surtout au niveau du col utérin causant la fièvre puerpérale» et il dit

« Désodorisez les mains, tout le problème est là ».

(29)

Il fait laver les mains des étudiants en médecine avec une solution de chlorure de chaux à 4 % et la mortalité puerpérale devient presque nulle [8, 17, 16]. En 1967, à l’occasion des entretiens de Bichat, le professeur Viliam évoque la nécessité de création de structure de surveillance et de réflexion sur les infections nosocomiales, il étendit le concept du lavage des mains aux protections vestimentaires, essuie main, serpillière et circuit du linge salle qui font partie des bases élémentaires de l’hygiène hospitalière [14].

L’hygiène des mains reste jusqu’à preuve de contraire le déterminant emblématique de la lutte contre les infections nosocomiales. Elle est une exigence de respect, de qualité des soins et de sécurité pour le malade.

2.2. Ecosystème de la peau

2.2.1. Caractères physico-chimiques

Les caractères physico-chimiques observés au niveau de la surface de la peau vont influencer l’équilibre écologique cutané. Il s’agit de la desquamation de la peau (10000 squames/minute en activité normale soit une baisse du nombre de germes sur la peau mais une augmentation des bactéries dans l’environnement), de la température de la peau qui varie entre 30 à 35°C, du pH de la peau normalement acide (entre 5 et 6) et de son humidité provenant de la sécrétion de sueur [3].

2.2.2. Barrières

Le revêtement cutané préserve l’organisme des agressions externes. C’est une barrière naturelle tant mécanique que chimique qui s’oppose à la pénétration de substances exogènes comme le passage de microorganismes ou celui des molécules. L’épiderme porte des follicules pileux et les glandes sébacées, siège d’une prolifération importante de microorganismes. Il est la seule partie du corps qui puisse vivre exposée à l’air sans s’infecter spontanément à condition qu’il soit intact.

(30)

2.2.3. Flore cutanée

L’écosystème cutané comprend deux flores : la flore résidente et la flore transitoire.

2.2.3.1. Flore résidente

Installée de façon prolongée voire permanente, la flore résidente regroupe des germes commensaux se situant au niveau des couches superficielles et profondes, où elle trouve tous les éléments nécessaires à son métabolisme. Elle est composée de bactéries aérobies principalement de cocci à Gram positif (Staphylococcus epidermidis, corynébactéries principalement Propionibacterium acnes, Micrococcus species), et de champignon (pityrosporum). Elle a un rôle de barrière car elle s’oppose à l’implantation d’autres espèces potentiellement pathogènes. Elle est difficile à éliminer et se reconstitue en 4 à 6 heures après un lavage chirurgical des mains.

Cette flore bactérienne varie quotidiennement et quantitativement d’un site à un autre chez un même individu ainsi que d’un individu à un autre et est renouvelée régulièrement. Elle a une faible virulence. Toutefois un geste invasif peut la modifier et induire un processus infectieux [7, 8, 16, 15].

2.2.3.2. Flore transitoire ou superficielle

Est composée le plus souvent de bactéries saprophytes issues de l’environnement (eau, plantes, animaux). Elle peut être aussi composée de bactéries pathogènes ou commensales provenant de certains sites du corps favorables à la croissance microbienne (périnée, creux axillaire, nez, bouche, pharynx) et surtout du tube digestif (colon). Elle varie dans la journée selon les activités et en fonction des variations de l’environnement extérieur et reflète l’écosystème microbien hospitalier comme notamment les bactéries multirésistantes.

(31)

Il s’agit entre autres des entérobactéries (Klebsiella, E. coli, etc.), de Pseudomonas, de bactéries à Gram positif (comme différents cocci en particulier Staphylococcus aureus, Streptococcus) et Candida albicans [7, 8, 16, 15].

2.2.4. La transmission manuportée

Les mains représentent l’outil le plus souvent utilisé par les Hommes.

Elles servent notamment à préparer les repas et manger. Elles nous permettent de nous occuper des autres en occurrence les enfants pour les parents et les malades pour le personnel soignant. Les mains étant tendues vers les malades et soucieuses de leur porter les remèdes, peuvent lui transmettre d’autres maladies ou intoxications si elles sont porteuses de germes.

Selon les études 70 à 90% des infections nosocomiales sont dues à une transmission manuportée de bactéries. Elles sont transmises d’un malade à un autre par contact direct entre patients, entre patients et soignants ou indirect notamment par l’intermédiaire de dispositifs médicaux ou de matériel de soin.

Donc l’impact de l’hygiène des mains sur la réduction du taux des infections nosocomiales est incontournable [6, 16].

3. PREALABLES POUR L’HYGIENE DES MAINS [7, 12]

3.1. Produits et matériel

 Eau potable

 Lavabo avec robinet à commande non manuelle (à défaut robinet à commande manuelle à col long)

 Savon liquide antiseptique avec distributeur (à défaut on peut utiliser le savon antiseptique ou ordinaire en barre à conserver sur un support laissant goutter l’eau)

 Distributeur d’essuie-mains à usage unique (à défaut on peut utiliser une serviette individuelle propre)

 Brosse de préférence souple pour nettoyer les ongles.

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3.2. Règles de base

 Ongles courts et non artificiels et sans vernis à ongle.

 Blouses à manches courtes ou dénuder les mains et avant-bras si la blouse à des manches longues.

 Oter les bijoux (bagues, bracelet et montre) et même alliance.

4. PROCEDURES ET INDICATIONS DU LAVAGE DES MAINS [2, 7, 12, 17, 16, 18, 10]

Il existe trois types de lavage des mains : 4.1. Lavage simple des mains

4.1.1. Objectif

Enlever les souillures et les squames de la main et réduire sa flore transitoire.

4.1.2. Indication

o Avant la prise de service et au départ du service o Après être allé aux toilettes

o Après s’être mouché ou peigné ou après avoir toussé ou éternué

o Avant et après l’acte de manger ou de faire manger (enfant ou malade) o Avant et après l’acte de fumer

o Avant et après un soin de nursing à un malade.

4.1.3. Procédure

 Se mouiller les mains jusqu’aux poignets avec de l’eau courante ;

 étaler le savon ordinaire sur les mains jusqu’aux poignets puis masser au moins pendant 30 secondes en insistant sur les paumes, le dos des mains et les espaces interdigitaux ;

 rincer abondamment les mains jusqu’aux poignets aussi longtemps qu’elles ont été savonnées ;

(33)

 sécher les mains et poignets par tamponnement avec un essuie-main à usage unique ;

 fermer le robinet avec l’essuie-main utilisé ;

 jeter l’essuie-main dans une poubelle sans la toucher.

4.2. Lavage hygiénique des mains ou antiseptique des mains 4.2.1. Objectif

Enlever les souillures et les squames et réduire la flore transitoire (plus efficace que le lavage simple des mains).

4.2.2. Indication

o Avant la prise de service en unité de réanimation ou en néonatologie o Avant et après chaque soin à un malade

o Avant tout geste invasif (cathétérisme, sondage urinaire)

o Avant toutes techniques aseptiques (préparation d’injection, de ponction lombaire, de pansement)

o Après tout geste sale ou septique

o Avant manipulation de tout matériel stérile

o Après manipulation de tout matériel souillé ou contaminé (bassin, urinoir, crachoir)

o Après contact avec un liquide biologique

o Avant et après tout contact avec un patient en isolement o En cas de période d’épidémie dans un service.

4.2.3. Procédure

 Se mouiller les mains jusqu’aux poignets avec de l’eau courante ;

 étaler le savon antiseptique sur les mains jusqu’aux poignets puis savonner pendant 1min au minimum en insistant sur les paumes, le dos des mains et les espaces interdigitaux ;

 rincer abondamment les parties savonnées et s’assurer qu’elles ne portent plus de savon ;

(34)

 sécher les mains et poignets par tamponnement avec un essuie-main à usage unique ;

 fermer le robinet avec l’essuie-main utilisé ;

 jeter l’essuie-main dans une poubelle sans le toucher avec les mains.

NB : la procédure est la même pour le lavage simple des mains hormis l’utilisation de savon antiseptique et la durée de lavage qui est plus longue pour le lavage hygiénique.

4.3. Lavage chirurgical des mains 4.3.1. Objectif

Réduire la flore résidente et éliminer totalement la flore transitoire.

4.3.2. Indication

o Avant tout acte chirurgical, obstétrical ou en radiologie interventionnelle o Avant tout acte à haut risque infectieux pour le malade nécessitant une

asepsie type chirurgical (pose de dispositif médical, de cathéter central, site d’implant)

o Entre 2 interventions chirurgicales de courte durée et de classe de contamination différente

o Entre 2 temps au cours d’une intervention lors du changement de gants.

4.3.3. Procédure

 Se mouiller les mains, les poignets et les avant-bras avec de l’eau courante ;

 masser les mains jusqu’aux avant-bras avec un savon antiseptique pendant au moins 1minute en insistant sur les espaces interdigitaux ;

 rincer abondamment du bout des doigts vers les avant-bras en faisant des mouvements circulaires ;

 mouiller une brosse stérile et mettre du savon antiseptique sur la brosse ;

 brosser les ongles uniquement pendant au moins 30 secondes ;

 rincer abondamment en faisant des mouvements circulaires ;

(35)

 remettre une dose de savon antiseptique dans chaque paume et savonner chaque espace interdigital, chaque doigt, chaque main et avant-bras (1minute pour chaque main et 30 secondes pour chaque avant-bras) ;

 Rincer soigneusement du bout des doigts vers les avant-bras par des mouvements circulaires et en les maintenant au-dessus des coudes ;

 Sécher avec un essuie-main stérile en allant du bout des doigts vers les coudes, un pour chacune des mains.

NB : le brossage concerne uniquement les ongles. Les mains et les avant-bras n’en sont pas concernés pour ne pas laisser des solutions de continuités cutanées à ces niveaux.

(36)

DEUXIEME PARTIE

MATERIEL ET METHODES

(37)

1. CADRE

Notre stage s’est déroulé du 02 juin au 05 septembre 2014 au Laboratoire Central du Service des Explorations Diagnostiques au Ministère de la Santé à Akpakpa.

1.1. Attributions

Le Service des Explorations Diagnostiques est chargé de :

 développer et pratiquer les méthodes d’analyses biologiques dans un but de diagnostic et de recherche ;

 organiser et mettre en œuvre toutes les enquêtes de surveillance épidémiologique des maladies en général et des maladies transmissibles en particulier ;

 pratiquer toutes les analyses de santé publique (hygiène et environnement) en collaboration avec les structures concernées ;

 assurer l’organisation des stages pratiques des élèves et étudiants en provenance des structures agréées de formation, ainsi que le recyclage et la formation en cours d’emploi des techniciens de laboratoire d’analyses biomédicales ;

 étudier et faire appliquer la règlementation sur les conditions d’ouverture et de fonctionnement des laboratoires d’analyses biomédicales publics et privés ;

 organiser et participer aux analyses de santé publique (eaux, air, aliments) et aux investigations toxicologiques diverses.

1.2. Différentes sections de la division du laboratoire central

Le laboratoire central comprend les sections de Bactériologie, de Parasitologie, de Sérologie, de Biochimie et d’Hématologie.

1.2.1. Section de Bactériologie

Elle a pour rôle d’assurer le contrôle et la surveillance des maladies à potentiel épidémique. Outre cette activité, les examens suivants y sont réalisés :

 examen cytobactériologique des urines ;

(38)

 examen cytobactériologique des sécrétions cervico-vaginales ;

 examen cytobactériologique des sécrétions urétrales ;

 examen cytobactériologique des pus et sérosités ;

 spermogramme ;

 spermoculture ;

 coproculture.

Figure : Organigramme de la section de bactériologie.

1.2.2. Section de parasitologie

Les examens suivants y sont pratiqués

 coprologie parasitaire complète ;

 recherche d’amibes, kystes, œufs et parasites ;

 analyse de la goutte épaisse et réalisation de la densité parasitaire ;

 recherche des œufs de bilharzie vésicale ;

 recherche de filaires ;

 test biologique de grossesse.

Chef de Section de Bactériologie

Responsable Matériel et

réactifs

Responsable Manipulations

et contrôle de qualité

Responsable Préparation des milieux

et stérilisation

Responsable Biosécurité et

gestion des déchets

Responsable Entretien

(39)

1.2.3. Section de sérologie

Elle s’occupe, comme la section de bactériologie, du contrôle et de la surveillance des maladies à potentiel épidémique.

De plus les examens suivants y sont réalisés :

 sérodiagnostic de Widal ;

 sérodiagnostic de la syphilis ;

 sérodiagnostic de la rubéole ;

 sérodiagnostic de la chlamydiose ;

 sérodiagnostic de la toxoplasmose ;

 dosage des anticorps antistreptolysine O ;

 recherche de l’antigène du virus de l’hépatite B ;

 recherche de l’anticorps du virus de l’hépatite C.

1.2.4. Section de biochimie

Les paramètres suivants y sont dosés :

 Glycémie

 Urémie

 Créatininémie

 Uricémie

 Triglycérides

 Cholestérol total-HDL-LDL

 Bilirubine totale et directe

 Phosphatase alcaline

 Gamma GT

 Protidémie

 Transaminases (ASAT, ALAT)

 Phosphatase acide

 Amylasémie

 Calcémie

(40)

 Magnésémie

 Phosphorémie

En plus de ces paramètres, l’électrophorèse de l’hémoglobine y est aussi effectuée.

1.2.5. Section d’Hématologie

C’est la section dans laquelle s’effectue les analyses comme :

 Numération formule sanguine

 Vitesse de sédimentation

 Numération des réticulocytes

 Temps de saignement

 Temps de coagulation

 Groupage sanguin ABO et facteur Rhésus

 Test d’Emmel.

2. MATERIEL 2.1. Echantillons

Les échantillons proviennent de l’écouvillonnage des mains de 32 écoliers.

2.2. Milieux de culture

 Bouillon cœur-cervelle

 Gélose EMB

 Gélose de Chapman

 Gélose de Cled

 Gélose BEA

 Gélose DNase

 Gélose au sang frais de mouton à 5%

 Galerie de Leminor.

(41)

2.3. Réactifs et colorants - Violet de Gentiane - Lugol

- Alcool à 90°

- Acide chlorhydrique à 10%

- Fuchsine à 10%

- Eau physiologique - Eau oxygénée

- Réactif de Kovack’s - Plasma lyophilisé de lapin 2.4. Equipement

o Incubateur o Autoclave o Réfrigérateur

o Microscope électrique o Centrifugeuse

o Etuve à 37°C

o Balance de précision.

2.5. Autre matériel o Gants stériles o Eau de javel

o Ecouvillons stériles

o Boîtes de Pétri à usage unique o Tubes à hémolyse stérile o Pipettes Pasteur stériles o Eprouvettes

o Lame et lamelle o Anse de platine

o Brûleur à gaz muni d’un bec Bunsen

(42)

o Portoir o Râtelier

o Jarre d’anaérobiose o Papier buvard

3. METHODES

3.1. Préparation des milieux de culture

Les milieux de culture utilisés ont été préparés suivant les consignes des fabricants (annexe 1).

3.2. Prélèvement

Le prélèvement a été fait par écouvillonnage au niveau des deux mains pour chaque écolier. Il a été réalisé avant et juste après lavage des mains.

 Technique

 Rassembler le matériel essentiel ;

 disposer d’un écouvillon préalablement humidifié à l’eau physiologique stérile ;

 sortir l’écouvillon de son étui ;

 passer l’écouvillon humidifié sur toute la surface de la paume des mains en insistant sur les espaces interdigitaux et sur les ongles avant le lavage des mains ;

 remettre l’écouvillon dans l’étui et fermer ;

 numéroter l’écouvillon ;

 demander aux écoliers de se laver les mains comme d’habitude ;

 refaire le prélèvement juste après le lavage des mains.

Un écouvillon a été utilisé pour chacune des mains d’un écolier.

(43)

Tous les échantillons obtenus ont été acheminés au Laboratoire Central pour analyse.

3.3. Manipulations au Laboratoire 3.3.1. Traitement des écouvillons

Chacun des écouvillons a été imprimé dans 2 ml de bouillon cœur- cervelle afin d’y décharger son contenu. Tous les bouillons ainsi obtenus ont été incubés à l’étuve à 37°C pendant 24 heures.

3.3.2. Traitement des bouillons

Chacun des bouillons a fait l’objet d’un examen à l’état frais et après coloration de Gram.

3.3.2.1. Etat frais

Une goutte de bouillon après agitation a été déposée sur une lame porte objet propre puis recouverte d’une lamelle. L’observation a été réalisée au microscope à l’objectif X40.

3.3.2.2. Etat coloré

Un frottis réalisé à partir du bouillon a été coloré au Gram et observé à l’objectif X100 à l’immersion (voir annexe 2). L’état coloré a permis d’apprécier la morphologie des bactéries, leur regroupement et surtout leur Gram. Deux cas de figures ont été observés : les cocci à Gram positif et les bacilles à Gram négatif.

3.3.3. Isolement et identification 3.3.3.1. Cas des cocci à Gram positif

Ont été ensemencées la gélose de Cled, la gélose de Chapman, la gélose BEA et la gélose au sang frais de mouton à 5%. Après culture, les tests ont été réalisés :

(44)

a) Recherche de la catalase

 Technique

 Déposer une goutte d’eau oxygénée sur une lame propre ;

 prélever à l’aide d’une anse de platine stérile une colonie bactérienne et émulsionner dans l’eau oxygénée.

 Lecture

La réaction positive se traduit par une effervescence.

b) Recherche de la DNase

 Technique

 Ensemencer par stries longitudinales d’environ 3cm la gélose DNase à l’aide d’une anse de platine chargée de la colonie de staphylocoque sélectionné ;

 incuber à l’étuve à 37°C pendant 24 heures.

 Lecture

Elle se fait après 18 à 24 heures d’incubation et consiste à inonder la gélose DNase avec une solution d’acide chlorhydrique à 10%. La présence d’une zone claire autour des stries traduit la présence de DNase.

c) Recherche de la staphylocoagulase libre

 Technique

 Prélever dans un tube à hémolyse 0,5ml du bouillon de 24 heures de la souche à étudier ;

 ajouter 0,5ml de solution de plasma lyophilisé de lapin.

 Lecture

La lecture a été faite toutes les 2 heures pendant les 6 premières heures et 24 heures après. En cas de présence de coagulum dans le tube, la bactérie produit la staphylocoagulase libre. Dans le cas contraire, la recherche de la staphylocoagulase libre est négative.

(45)

d) Sensibilité à la novobiocine 5µg

 Technique

 Ensemencer par inondation la plaque de gélose de Mueller Hinton ;

 incuber à 37°C pendant 15 min ;

 appliquer aseptiquement un disque de novobiocine 5µg sur la surface de la gélose ensemencée ;

 appuyer légèrement pour assurer un contact total avec le milieu ;

 incuber à 37°C pendant 24h.

 Lecture

Un diamètre de la zone d’inhibition supérieur ou égale à 16mm traduit une sensibilité vis-à-vis de la novobiocine 5µg. Seul Staphylococcus aureus est sensible à la novobiocine 5µg.

3.3.3.2. Cas des bacilles à Gram négatif

Nous avons procédé à l’ensemencement de la gélose EMB et à l’incubation à 37°C à l’étuve pendant 24 heures. Après culture, un Gram contrôle à été effectué par la suite. Enfin la galerie de Leminor a été ensemencée et incubée à l’étuve à 37°C pendant 24 heures. Cette galerie est constituée d’urée-indole, de la gélose Kligler-Hajna, de la gélose mannitol-mobilité et de la gélose Citrate de Simmons.

La même méthode a été adoptée lors des deux phases (avant et après lavage des mains).

(46)

TROISIEME PARTIE

RESULTATS ET COMMENTAIRE

(47)

1. RESULTATS

(48)

1.1. Répartition des écoliers selon le sexe Tableau I : Répartition des écoliers selon le sexe

Sexe Effectif %

Masculin 14 43,7

Féminin 18 56,3

Total 32 100,0

Les filles représentent 56,3% de la population d’étude.

(49)

1.2. Répartition des écoliers selon l’âge Tableau II : Répartition des écoliers selon l’âge

Tranche d’âge (en année) Effectif %

[0 ; 5[ 1 3,1

[5 ; 10[ 18 56,3

[10 ; 15[ 13 40,6

Total 32 100,0

Plus de la moitié des écoliers a un âge compris entre 5 et 10 ans.

(50)

1.3. Avant lavage des mains

Tableau III : Répartition des échantillons en fonction des résultats au Gram

Gram

Echantillons

MG MD n = 32 n = 32

Cocci Gram + 3

(9,4%)

2 (6,3%)

Bacilles Gram - 0

(0,0%)

0 (0,0%)

Cocci Gram + / bacilles Gram-

Total

29 (90,6%)

32 (100,0%)

30 (93,7%)

32 (100,0%)

MG = main gauche MD = main droite n = effectif

Plus de 90% des mains droites comme des mains gauches portent à la fois des cocci Gram positif et des bacilles Gram négatif.

(51)

Tableau IV : Répartition des résultats au Gram en fonction du sexe

Gram

Masculin Féminin

MG n=14

MD n=14

MG n=18

MD n= 18

Cocci Gram + 1 (7,1%)

1 (7,1%)

2 (11,1%)

1 (5,6%) Bacille Gram - 0

(0,0%)

0 (0,0%)

Total

13 (92,9%)

14 (100,0%)

13 (92,9%)

14 (100,0%)

16 (88,9%)

18 (100,0%)

17 (94,4%)

18 (100,0%)

La plupart des écoliers avaient les mains chargées de cocci à Gram positif et de bacilles à Gram négatif. Tous les deux sexes sont concernés.

(52)

Tableau V : Répartition des échantillons en fonction du nombre d’espèces bactériennes identifiées et des mains.

Nombre d’espèces bactériennes

Echantillons

MG n = 32

MD n = 32

0 0

(0,0%)

0 (0,0%)

1 3

(9,4%)

2 (6,2%)

2 17

(53,1%)

19 (59,4%)

>2 12 (37,5%)

11 (93,8%)

Total 32

(100,0%)

32 (100,0%)

Plus de la moitié des échantillons (soient 53,1% des mains gauches et 59,4% des mains droites) ont deux espèces bactériennes.

(53)

Tableau VI : Répartition des espèces bactériennes identifiées en fonction des mains.

Germes identifiés Nombre de souches Total MG MD

S. aureus 32

(21,8%)

32 (21,8%)

64 (43,6%)

Streptocoque D 2

(1,4%)

6 (4,1%)

8 (5,5%)

Enterococcus spp 2

(1,4%)

1 (0,6%)

3 (2,0%)

E. coli 20

(13,6%)

17 (11,6%)

37 (25,2%)

K. pneumoniae 14

(9,5%)

15 (10,2%)

29 (19,7%)

P. aeruginosa 3

(2,0%)

3 (2,0%)

6 (4,0%)

Total 73

(49,7%)

74 (50,3%)

147 (100,0%)

MG = main gauche MD = main droite

Un total de six espèces bactériennes ont été isolées et identifiées. Au nombre de celles-ci Staphylococcus aureus vient en tête (43,6%) suivi de Escherichia coli (25,2%) et de Klebsiella pneumoniae (19,7%).

(54)

1.4. Après lavage des mains

Tableau VII : Répartition des échantillons en fonction des résultats au Gram

Gram

Echantillons

MG MD n = 32 n = 32

Cocci Gram + 17

(53,1%)

13 (40,6%)

Bacilles Gram - 0

(0,0%)

1 (3,1%)

Cocci Gram + / bacilles Gram- 11 (34,4%)

15 (46,9%)

Absence de germes 4

(12,5%)

3 (9,4%)

Total 32

(100,0%)

32 (100,0%)

Sur les 32 écoliers, après lavage des mains seuls 12,5% (4/32) et 9,4%

(3/32) ont eu leurs charges bactériennes diminuées respectivement dans la main gauche et dans la main droite.

(55)

Tableau VIII : Répartition des résultats au Gram en fonction du sexe

Gram

Masculin Féminin

MG n=14

MD n=14

MG n=18

MD n= 18

Cocci Gram + 8 (57,1%)

7 (50,0%)

9 (50,0%)

6 (33,3%) Bacille Gram - 0

(0,0%)

0 (0,0%)

1 (5,6%)

Absence de germes

4 (28,6%)

2 (14,3%)

6 (42,9%)

1 (7,1%)

7 (38,9%)

2 (11,1%)

9 (50,0%)

2 (11,1%)

Total 14

(100,0%)

14 (100,0%)

18 (100,0%)

On note une diminution sensible de la charge en bacilles Gram négatif dans les mains aussi bien chez les filles que chez les garçons.

(56)

Tableau IX : Répartition des échantillons en fonction du nombre d’espèces bactériennes identifiées et des mains.

Nombre d’espèces bactériennes

Echantillons

MG n = 32

MD n = 32

0 4

(12,5%)

3 (9,4%)

1 15

(46,9%)

13 (40,6%)

2 13

(40,6%)

16 (50,0%)

>2 0

(0,0%)

0 (0,0%)

Total 32

(100,0%)

32 (100,0%)

Après lavage des mains, aucun écolier ne porte dans ses mains plus de deux espèces bactériennes.

(57)

Tableau X : Répartition des espèces bactériennes identifiées en fonction des mains.

Germes identifiés Nombre de souches Total

MG MD

S. aureus 28

(32,5%)

28 (32,5%)

56 (65,1%)

Streptocoque D 1

(1,2%)

1 (1,2%)

2 (2,4%)

Enterococcus spp 1

(1,2%)

0 (0,0%)

1 (1,2%)

E. coli 5

(5,8%)

7 (8,1%)

12 (13,9%)

K. pneumoniae 5

(5,8%)

9 (10,4)

14 (16,2%)

P. aeruginosa 1

(1,2%)

0 (0,0%)

1 (1,2%)

Total 41

(47,7%)

45 (52,3%)

86 (100,0%)

Malgré la disparition de quelques souches sous l’effet du lavage des mains, les mêmes espèces bactériennes identifiées au départ sont demeurées.

(58)

2. COMMENTAIRE

(59)

Le présent travail a eu pour objectif général d’évaluer la qualité du lavage des mains chez un groupe d’écoliers. Dans ce cadre, une visite inopinée a été rendue à une école primaire de la place pendant la récréation. Les mains de 32 écoliers ont été écouvillonnées avant et juste après lavage non guidé.

Les analyses effectuées avant le lavage des mains ont montré qu’au moins 90% des écoliers avaient dans leurs mains, à la fois des bacilles à Gram négatif et des cocci à Gram positif (Tableau III). L’identification des bacilles à Gram négatif a révélé Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae et Pseudomonas aeruginosa. Quant aux cocci à Gram positif, ils sont constitués de Staphylococcus aureus, de Streptocoque D et d’Enterococcus spp. Ces espèces proviendraient d’une contamination de la flore transitoire des mains. Cette flore plus polymorphe, est composée de micro-organismes ayant contaminés récemment la peau, potentiellement pathogènes et provenant du tube digestif, de l'environnement, de matériel contaminé ou encore du contact avec des individus colonisés ou infectés. Bien que considérée comme transitoire, elle est d’intérêt majeur en contrôle des infections puisqu’elle peut facilement être transmise par les mains, suite à un simple contact, en l’absence d’un lavage correct des mains à l’eau et au savon. La présence des Streptocoques du groupe D et d’Escherichia coli parmi les germes mis en évidence pose un problème d’hygiène chez les écoliers. En effet, selon Cabillic [5], Streptocoques D et Escherichia coli sont les témoins d’une contamination fécale.

Staphylococcus aureus vient en tête des espèces isolées avec 43,6%

(64/147) (tableau VI). Cela pourrait s’expliquer par le fait que Staphylococcus aureus est présente sur la peau humaine.

(60)

Les analyses effectuées après lavage des mains ont montré que seuls 12,5% (4/32) et 9,4% (3/32) des écoliers ont eu leurs charges bactériennes diminuées respectivement dans la main gauche et dans la main droite (Tableau VII). Ces résultats montrent que chez le grand nombre des écoliers, le lavage des mains n’avait eu aucun impact sur les charges bactériennes portées par ces derniers.

Après lavage des mains, nous avons noté une diminution sensible des bacilles à négatif comparativement aux cocci à Gram positif (Tableau III et VII).

Cet état de choses pourrait être lié à la qualité du savon utilisé par ces écoliers.

En effet, ce savon aurait plus d’effet sur la paroi des bacilles à Gram négatif que sur celle des cocci à Gram positif. Il convient alors que les autorités des écoles veillent à la qualité du savon à mettre à la disposition des écoliers pour un lavage satisfaisant des mains. Un bon lavage des mains nécessite la maîtrise de la technique par les écoliers.

(61)

CONCLUSION ET SUGGESTIONS

(62)

CONCLUSION

(63)

Au terme de ce travail, les résultats obtenus avant et après lavage des mains ont montré que les mains des écoliers portent plusieurs espèces bactériennes dont les indicateurs d’une contamination fécale. La comparaison des résultats avant lavage des mains à ceux obtenus après a montré que chez le grand nombre des écoliers, le lavage des mains n’avait eu aucun impact sur les charges bactériennes portées par ces derniers. Malgré l’absence de souches bactériennes responsables des maladies telles que le choléra, les salmonelloses et les shigelloses, il s’avère indispensable de veiller au respect des règles d’hygiène notamment le lavage correct des mains dans le but de réduire la transmission manuportée.

(64)

SUGGESTIONS

(65)

A partir des résultats de cette étude, nous suggérons :

 aux Autorités de l’enseignement primaire de sensibiliser davantage les écoliers sur l’importance et la technique du lavage correct des mains,

 aux maîtres de veiller à ce que les écoliers fassent un lavage satisfaisant des mains.

 qu’une étude soit réalisée sur les connaissances, attitudes et pratiques liées au lavage des mains au Bénin.

(66)

REFERENCES

BIBLIOGRAPHIQUES

(67)

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(France). 3^ème éd. 2001. pp 9-46.

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(69)

QUALITE DU LAVAGE DES MAINS CHEZ UN GROUPE D’ECOLIERS A COTONOU.

LISTE DES ENSEIGNANTS

DU DEPARTEMENT DE GENIE DE

BIOLOGIE HUMAINE

DEDICACE

REMERCIEMENTS

HOMMAGES

LISTE DES ABREVIATIONS

LISTE DES TABLEAUX ET

FIGURES

RESUME

SOMMAIRE

INTRODUCTION

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

MATERIEL ET METHODES

RESULTATS ET COMMENTAIRE

1. RESULTATS

2. COMMENTAIRE

CONCLUSION ET SUGGESTIONS

CONCLUSION

SUGGESTIONS

REFERENCES

BIBLIOGRAPHIQUES

ANNEXES