Cryo-microscopie confocale pour la localisation des ions pariétaux dans les tissus fruits charnus

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Submitted on 5 Jun 2020

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Cryo-microscopie confocale pour la localisation des ions pariétaux dans les tissus fruits charnus

Kévin Vidot, Cedric Gaillard, Sylvain Guyot, René Siret, Camille Rivard, Marc Lahaye

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Kévin Vidot, Cedric Gaillard, Sylvain Guyot, René Siret, Camille Rivard, et al.. Cryo-microscopie confocale pour la localisation des ions pariétaux dans les tissus fruits charnus. 11èmes Journées du Réseau Français des Parois, Jun 2017, Orléans, France. �hal-01605310�

Cryo-microscopie confocale pour la localisation des ions pariétaux dans les tissus fruits charnus

Kevin Vidot

, Cédric Gaillard

, René Siret

, Camille Rivard

, Sylvain Guyot

, Marc Lahaye

a

UR Biopolymères Interactions Assemblages, INRA, 44300 Nantes, France

USC 1422 GRAPPE, INRA, Ecole Supérieure d’Agricultures, SFR 4207 QUASAV, 55 rue Rabelais 49100 Angers, France

Synchrotron SOLEIL, L'Orme des Merisiers, Saint-Aubin, 91192 Gif-sur-Yvette Cedex, France

UAR CEPIA, INRA, 44300 Nantes, France

UR

Biopolymères, Interactions et Assemblages, Bat 305, Domaine de la Motte, 35 653 Le Rheu, France

Les parois cellulaires végétales sont des assemblages complexes largement étudiés car les polysaccharides qui les constituent ont un rôle biologique et structurant majeur [1]. Les propriétés fonctionnelles des polysaccharides dépendent pour partie des macro-éléments minéraux présents dans l’apoplaste tels que le potassium, calcium ou magnésium, lesquels contribuent à la régulation de la turgescence et aux caractéristiques mécaniques des parois cellulaires. Libres ou liés aux métalloprotéines, les oligo-éléments (Fe, Cu, Zn, Mn) participent également au remodelage et à la déconstruction des parois cellulaires. Dans le cas des fruits, ces métaux de transitions joueraient un rôle important sur la qualité en modifiant entre autre leur texture [2]. Les modes d’action et les interactions entre les minéraux et les parois cellulaires sont largement méconnus du fait de leur grande mobilité et pour certain, de leur présence à l’état de traces. Pour s’affranchir de ces deux contraintes majeures, le développement de méthodes de préparation permettant de préserver au mieux les structures natives du matériel végétal très hydraté (80-95%) s’avère nécessaire afin de pouvoir identifier et localiser l’ensemble de ces minéraux sans redistribution. Les méthodes passant par une fixation physique à basse température combinée à une observation à froid sont ici particulièrement recommandées car elles ont l’avantage de préserver la

morphologie du tissu tout en limitant la mobilité des ions minéraux [3]. Cette présentation exposera une stratégie originale combinant fixation physique et cryo-observation par microscopie confocale à balayage laser (MCBL) pour cartographier le contenu minéral de tissus de pomme et de baie de raisin.

Références bibliographiques

[1] P. Albersheim et al (2011) Garland Science. p. 43.[2] Bartley, I.M. and M. Knee (1982), Food Chemistry, 9(1-2): p. 47-58. [3] Mielanczyk, L., et al. (2014), Folia Histochem.

Cytobiol,. 52: p. 1-17.

Mots-clés Cryo-microscopie confocale, Ions minéraux, Paroi cellulaire végétale,

Fluorescence, Pomme, Raisin