a la difusión de variedades
de caña de azúcar
La difusión
y los intercambios
de variedades de caña
de azúcar aprovechan
hoy los progresos
de la biotecnología.
Se ha constituido una
colección de variedades
in vitro para permitir
el acceso rápido a
un material de gran
calidad agronómica
y garantizado sano.
L
a caña de azúcar se m ultiplica p or desqueje, en la que cada v a riedad es un c lo n . La crea c i ó n de una n u e v a v a r i e d a d p o r hibridación es un proceso particular mente largo y costoso para la caña de azúcar. Las razones son ante todo de tipo genético, pues las variedades presentan un genoma m uy c o m p le jo, con 100 a 130 cromosomas resul tantes de varias especies ancestrales. Cada cruce provoca la destructura- c ión com pleta de las características de las variedades parentales y sólo una p ro p o r c ió n ín fim a de los des c e n d ie n te s p resenta un p o t e n c ia l a g ro n ó m ic o . La e v a lu a c ió n de este p o t e n c i a l c o n s t i t u y e la s e g u n d afuente de c o m p le jid a d . El c ic lo de p r o d u c c ió n de la ca ña de a z ú c a r incluye varias cosechas, con una p ri mera etapa d enominada «en virgen», un año después de la plantación de los esquejes, seguida de varios brotes cuyas características están poco rela cionadas entre una etapa y otra, en especial entre la etapa «en virgen» y los brotes sucesivos. Además, en una misma etapa, se observan com porta mientos variables según el m ed io y el año. Así, la selección de los clones más eficaces requiere dispositivos de evaluación particularmente pesados. Los diferentes centros de selección d e l m u n d o p r o d u c e n v a r ie d a d e s a d a p ta d a s a su r e g ió n y e stos
F. PAULET, J.-C . G L A S Z M A N N
C IR A D O ., BP 5 0 3 5 , 3 4 0 3 2 Montpellier Cedex 1, Francia
Brote de las yemas axilares de caña de azúcar.
Foto R. Fauconnier
cultivo
in vitrode caña de azúcar
materiales probados pueden tener un gran v a lo r c o m o genitores en otros p r o g r a m a s de m e j o r a v a r i e t a l . T am bién pueden revelarse adecua dos fuera de su zona de selección y representar así una fuente de renue vo de las variedades en estaciones que no poseen su p ro p io programa de m ejora genética. La c irc u la c ió n de las variedades de caña de azúcar, d ifíc ile s de seleccionar, representa pues un fa c to r de progreso im p o r tante.
El material vegetal transita en forma de esquejes que p ue de n p ro p a g a r enfermedades. Desde 1978, el servi c io de «Cuarentena inte rn a c io n a l» o r g a n i z a d o p o r el C IR A D en M o n tp e llie r (Centro de cooperación i n t e r n a c i o n a l en i n v e s t i g a c i ó n agronómica para el desarrollo) pone a d is p o s ic ió n de num erosos países v a rie d a d e s de interés in d u s tria l o materiales de calidad cercana. Para o b te n e r las garantías fito s a n ita ria s requeridas, se necesitan dos ciclo s de observación de un año, después de lo c u a l los c lo n e s p u e d e n ser enviados a sus usuarios en forma de esquejes (BA U D IN , 1984). D ebido a las exigencias materiales, este servi cio se lim ita a una actividad de trán sito y no puede conservar los clones « lib e r a d o s » d e s p u é s de la c u a rentena.
Frente a estas lim it a c io n e s , se ha d ecidid o constituir una colección de caña de azúcar in vitro posterior al s e r v i c i o de c u a r e n t e n a (P A U L E T y col., 1991).
Este tip o de colección, denom inado «vitroteca», ya existe para diferentes p la n ta s , c o m o la p a p a o la y u c a (ROCCA y col., 1989) y permite reu n i r de m a n e r a p o c o v o l u m i n o s a m a te ria le s p o te n c ia lm e n t e ú tile s , r e p r e s e n t a n d o así u n a fu e n t e de a b a s te c im ie n to rá p id o de m aterial sano. Además, autoriza la aplicación de la crioconservación, un m odo de conservación a m uy largo plazo, útil para preservar recursos genéticos. El recurso a la ele ctroforesis de e n z i mas y a las nuevas herramientas de la b i o l o g í a m o l e c u l a r r e f u e r z a n una a d m in is tr a c ió n rig uro sa de la colección.
A lm acenaje a 18 ° C de las plántulas
in vitro. Foto CIRAD-CA
La producción de
plántulas
in vitro
Las p l á n t u l a s in v i t r o , lla m a d a s « v i t r o p l á n t u l a s » , se o b t i e n e n mediante el cultivo de brotes axilares extraídos de plantas sanas, siguiendo los p r o c e d im ie n t o s d e f in id o s p o r SAUVAIRE y GALZY (1978).El material de base
en invernadero
Se efectúa un d esqueje a p a rtir de plantas liberadas de la cuarentena, g a r a n t iz a d a s sanas. D e s p u é s de h a b e r p r e n d id o , los e squ ejes son transplantados y mantenidos en tier ra. El desqueje provoca un rejuvene cim iento del vegetal, lo que favorece luego el d esa rrollo de los brotes al p o n e r lo s en c u l t i v o in v itr o . Para m i n i m i z a r los ataq ue s de h on go s s a p r o f i t o s , i n d e s e a b le s d e s p u é s
in v i t r o , se r e a liz a n tr a t a m ie n to s
semanales fungicidas e insecticidas sistêmicos en alternancia.
El cultivo in vitro
Las yemas más jóvenes (tres o cuatro por tallo) son extraídas de cañas de cuatro a seis meses, en el invernade ro de M ontpellier, y se ponen en c u l tiv o en una caja de Petri en m e d io MS (MURASHICE y SKOOG, 1962) a 25°C. Luego, se transplantan in d i vidualm ente en tubo al cabo de dos a cuatro semanas, cuando aparecen los nuevos retoños. Al obtenerse 10 b uenas p lá n tu la s , se tra n s p la n ta n s e p a r a d a m e n t e en 10 tu b o s y se a lm a c e n a n a 1 8°C en m e d io MS empobrecido. Estas condiciones fre nan el crecim iento in vitro y, por lo ta n t o , d is m in u y e n el v o lu m e n de m anipulaciones necesarias. La v ig i la n c ia reg ular del n iv e l del m e d io n u tr itiv o y de la desecación de las hojas permite detectar los clones que hay que transplantar prioritariam en te. El intervalo entre dos transplantes puede variar entre seis meses y dos años según las variedades (c ap ac i dad de am acollam iento) y el agota miento del medio.
Yem a de caña de a zú c a r después de 15 días de transplante in vitro.
Foto CIRAD-CA
La util ización
de vitroplántulas
Las vitroplántulas permiten intro du cir rápidamente una nueva variedad en una plantación; pueden convertir se directamente en esquejes o servir para una m u lt ip lic a c ió n acelerada p o r m i c r o p r o p a g a c i ó n in v i t r o (FELDMANN y ROTT, 1991).
El suministro
de vitroplántulas
Apenas se fo rm u la un p e d id o , una parte de las v it r o p lá n t u l a s d is p o nibles en la vitroteca de M ontpellier se vu elve a c o lo c a r a 25°C para la m u lt ip lic a c ió n . Se necesitan entre tres y seis meses para p ro d u c ir una decena de nuevas plántulas por ama- c o lla m ie n to natural. Estas plántulas se t r a n s p l a n t a n e n t o n c e s en un m e d io de a r r a ig a m ie n t o para ser expedidas. Si dispone del laboratorio adaptado, el usuario podrá continuar la m u ltip lic a c ió n siguiendo los mis mos p r o c e d im i e n t o s . El p la z o de espera para el suministro de plántu las se r e d u c e pues a seis meses, mientras que, para r e in t ro d u c ir las variedades solicitadas en un nuevo ciclo de cuarentena, se necesitarían de dos a tres años.El comportamiento
de las plántulas obtenidas
en cultivo in vitro
En el m o m e n t o de la s e p a r a c ió n - pasaje de las condiciones in vitro a las c o n d ic io n e s naturales -, resulta esencial seguir rigurosamente el pro to c o lo sum inistrado para o p tim iz a r el p r e n d im ie n t o en el c a m p o (ver Ficha de separación de v itro p lá n tu las de caña de azúcar). Las vitrop lá n tulas de caña de azúcar transplanta das en el c a m p o ti e n e n u n a apariencia particular, diferente de las p lá n t u la s o b te n id a s de d esq ue je s tradicionales (FELDM ANN y ROTT, 1991). Estas m odificaciones depen den de la variedad, pero se traducen p o r lo g eneral en un a u m e n to del a m a c o lla m ie n to y una d is m in u c ió n d el d iá m e tr o de los ta llo s , lo que produce un rendim iento similar al de los desquejes. Estas d ife re n c ia s se van b o rra nd o rápidam ente durante los ciclos de m ultiplicación.
Estado actual
de la vitroteca
La v itro te c a de caña de a z ú c a r de C IR A D , en M o n t p e llie r , creada en 1982, está co n s titu id a actualm ente
de 363 variedades, la mayoría de las c u a le s se e s ta b le c e y c o n s e rv a a 18°C. El aumento de su volum en ha h e c h o q u e se b u s q u e n d iv e r s a s mejoras.
Contenido de la colección
La colección incluye 343 variedades, alg unas de acceso lib re y otras de sometido a la autorización del obte- nedor (ficha variedades de caña de azúcar conservadas en vitroteca).
Estabilidad genética
y técnica
de crioconservación
Aunque la estabilidad genética pare ce estar garantizada en princip io por el m antenimiento en estado de te jid o o r g a n iz a d o (b ro te o p lá n t u la , sin diferenciación celular) en medios de c u ltivo sin hormonas de crecimiento, es c o n v e n ie n te buscar una té c nic a que permita liberarse de las m anipu laciones en v itro p lá n tu la s y, sobre to d o , l im i t a r las m u l t i p l i c a c i o n e s celulares en condiciones artificiales. Ahora se dispone de una técnica de c r io c o n s e r v a c ió n (D E R E U D D R E , 1994) puesta a punto en la variedad Co 641 5 y que p e rm ite a lm a c e n a r ápex encapsulados en bolas de algi- n a to y s u m e r g id o s en n i t r ó g e n o líquido. Este método, ha sido proba do con éxito en 16 variedades y ha p e r m i t i d o tasas de r e g e n e r a c ió n c o m p r e n d i d a s e n t r e 14 y 9 1 % (G O N Z A L E Z A R N A O y col., 1993; PAULET y col., 1993). En teoría, per mite una conservación de duración indefinida del material vegetal.
Control de la identidad
del material
D ebido al gran número de m anipula ciones entre la llegada de un clon en forma de desquejes y su envío en for ma de vitroplántulas, el control de la identidad de los clones es necesario para d e te c ta r los p o s ib le s errores de e tiq u e ta d o . La ele ctroforesis de enzimas b rinda un m ed io de
verifi-Prendimiento del á p e x a 1 0 días, después de crioconservación.
Foto P. Feldmann
cultivo
in vitrode caña de azúcar
cación. Un estudio p ilo to realizado con 62 variedades reveló 21 bandas p o lim o r f a s , es d e c ir presentes en c ie r ta s v a r ie d a d e s y a u s e n te s en otras. A partir de las 1891 compara c io n e s e fe c tu a d a s (62 v a rie d a d e s comparadas dos a dos), no pudieron distin gu irse ú n ic a m e n te dos pares. Las otras 58 va rie d a d e s presentan una c o m b in a c ió n única de bandas. Esta técnica requiere la extracción de las enzimas a partir de una hoja fres ca joven y, por consiguiente, la dis p o n ib ilid a d de una planta joven. El polim orfism o de longitud de los frag m e n to s de r e s t r i c c i ó n d e l A D N (RFLP) es más difícil de revelar, pero presenta una potencia de d iscrim ina ción m uy superior, ya que sum inis tran una verdadera h uella genética de cada variedad. Contrariamente a la electroforesis de enzimas, el análi sis de los RFLP puede realizarse con hojas secas, de m odo que se pueden c o m p a r a r en c u a l q u i e r m o m e n t o los c l o n e s de la c o l e c c i ó n de M on tpe llie r con otros clones conser vados en el campo en los trópicos.
Conclusión
Las biotecnologías se utilizan a veces para crear una d iv e rs id a d nueva y original, com o es el caso, por ejem plo, de la tran sfo rm ació n genética. En el caso de la colección de varie dades de caña de a z ú c a r d e s c rita aquí, las biotecnologías son a p lic a das para g a r a n tiz a r la in t e g r id a d genética de materiales preciosos y constituyen un m e d io de m antener c ie n to s , e in c lu s o m ile s de v a r ie dades en un espacio m uy red ucido p r o te g ié n d o la s to t a lm e n t e de los in s e c to s , las e n f e r m e d a d e s y las incertidumbres climáticas, así como, en gran parte, de la deriva genética y las mezclas accidentales. Este tipo de d is p o s i t i v o , de inte ré s in m e d ia t o para la difusión de material varietal, tendrá probablemente su lugar en un m a rc o in te r n a c io n a l de c o n s e rv a ción de los recursos genéticos de la caña de azúcar.
Huellas genéticas para las variedades
de caña de azúcar
La revelación del polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción del A D N (aquí se tom a en cuenta el A D N del núcleo y no el A D N del citoplasma) incluye varias etapas:
- la extracción del A D N ;
- la digestión del A D N , es decir su corte en sitios bien determ inados m ediante enzimas llam ad as «de restricción», q ue p ro vo c a la fo r m a c ió n de fragm entos d e longitudes diversas;
- la separación de los fragmentos por electroforesis en gel de agarosa en función de su longitud;
- la transferencia a una m e m bra na de nylon de los fragmentos separados así;
- la «hibridación» m o lecular con una secuencia de A D N particular, llamada «sonda» (marcada previam ente con fósforo 32 por ejemplo): entre los fragmentos presentes en la m em brana, la sonda va a reconocer los que contienen una secuencia que le es simi lar y a fijarse en ellos;
- la revelación de los fragmentos reconocidos m e d ia nte la puesta en contacto de la m e m bra na con una película autorradiográfica que será impresa por la radiactividad de la sonda.
D e este m odo, cada clon se caracteriza por un conjunto de bandas que constituye su huella genética (foto). Se dispone de m u y numerosas sondas. El uso de cinco sondas solamente permitiría distinguir más de 100 0 0 variedades tomadas al azar.
Perfiles de bandas obtenidas p a ra 1 5 variedades de caña de a z ú c a r cuyo A D N ha sido cortado con la enzim a de restricción Hind III, separado por electroforesis e hibridado con la sonda U M C 3 9 .
FotoJ.-C. Glaszmann
de vitroplántulas
de caña de azúcar
Acondicionamiento
de las vitroplántulas
Las v i tr o p lá n t u la s son a c o n d i c i o n a d a s en un m e d io d e a rr a i g a m i e n t o en tub os d e p lá stico e s té r ile s y s e l l a d o s . T ra s t r a n s p l a n t a r s e , se m a n t i e n e n d e tres a c u a t r o s e m a n a s a u n a te m p e r a tu ra d e 2 5 a 3 0 ° C antes del e n v ío .Pasaje fuera de las condiciones
estériles
Es pos ible c u a n d o las v itro p lá n tu la s arraigadas tienen 5 ó 6 raíces d e 2 a 3 ce n tím e tro s . A b r ir los tub os , e x tr a e r las p la n ta s d e l i c a d a m e n t e , e n ju a g a r las raíces c on a g u a , c o rta r las hojas p a r a l i m i t a r la e v a p o r a c i ó n y e s t i m u l a r el arra n q u e d e los brotes.
Tratamiento fungicida
S u m e r g ir las p lá n tu la s en B e n la t e a 1 g r a m o por litro d e p ro d u c to c o m e r c ia l o en A lie tte a
1 g ra m o p o r litro.
Inmersión de las plántulas en la solución mgicida.
transplante de las plántulas
S e p aración d e las v itro p lá n tu la s en Jiffy 7 (pas tillas d e tu r b a c o m p r i m i d a ) . An tes, h a c e r h in cha r los Jiffy 7 d u r a n te 1 0 m in u to s c on la solu ción f u n g ic id a u ti l i z a d a a n te rio rm e n te . H a c e r un a g u je ro en la s u p e rfic ie del jiffy 7 e intro d u c ir en él las raíces. T a p a r y aplastar la turba a lre d e d o r d e la p lá n tu la .
Transplante de las plántulas en Jiffy 7.
V i t r o p l á n t u l a s a r r a i g a d a s , listas p a ra ser separadas.
Las condiciones
de separación
P o n e r las p lá n tu la s s e p a r a d a s al r e s g u a r d o d e l v i e n t o y d e l sol. L im i ta r la d e s e c a c ió n r e c u b r i e n d o c o n Jiffy 7 y p lá s tic o tra n s p a r e n t e h asta la e m i s i ó n d e dos o t r e s n u e v a s h o j a s . En c a s o d e d e s e c a c i ó n , p u l v e r i z a r c o n un p o c o d e agua. M a n t e n e r c on rie gos d ia rios y c o m p l e t a r unas dos o tres s em an as más ta rd e c on una s o l u c i ó n d e t i p o a b o n o f o l i a r ( e j e m p l o : M a i r o l , 2 g r a m o s p o r l i t r o d e p r o d u c t o c o m e r c i a l ) . C o n t r o l a r los a t a q u e s f ú n g i c o s c o n p u lv e r i z a c i o n e s d e B ay le to n 5 a ra z ó n d e 1 g ra m o p o r litro d e p ro d u c t o c o m e r c i a l , u n a v e z por se m a n a.El pasaje al campo
Es p o s ib le al c a b o d e c u a tro a seis s e m a n a s si e l c r e c i m i e n t o es v ig o ro s o . S u m e r g ir el Jiffy 7 c o n su p lá n t u l a en B a y le to n a 1 g r a m o p o r litro, p re p a r a r el te rre n o , h a c e r un a g u je ro p ara c o l o c a r el J i f f y 7 . T e n e r c u i d a d o d e n o d e s h a c e r el terró n y no d a ñ a r las r a íc e s . P o n e r los Jiffy 7 d i r e c t a m e n t e en la tie rra . C o r t a r lig e r a m e n t e las h o j a s p a r a l i m i t a r la d e s e c a c i ó n . Si, al c a b o d e seisPlántulas en Jiffy 7 en mini-invernadero.
Plántulas en invernadero, de 6 a 8 semanas de e dad , en espera de plantación.
sem an as en Jiffy 7, las plá n tu las no están sufi c i e n t e m e n t e vigorosas, c o lo c a rla s en macetas q u e ten g an más sustrato q u e los Jiffy 7 a g o ta d o s . T r a t a r c o n u n i n s e c t i c i d a s i s t ê m i c o (Curate r).
Efectuar el pasaje al c a m p o c u a n d o la t e m p e ratura del suelo sea s up e rio r a 1 8 ° C . Es c o n v e - n i e n t e u n a h u m e d a d e l e v a d a d e l a i r e y se ac o n s e ja p u lv e r iz a r un p o c o d e agu a , incluso si h a y irrigación.
Fotos P. Feldmann
Agriculture et développement Húmero especial - Diciembre de 1994
Variedades
de caña de azúcar
conservadas en vitroteca
Laboratorio d e cultivo in vitro,
CIRAD-CA, BP 5035
34032 Montpellier Cedex 1, Francia.
B 3 7 1 7 2 C B 5 6 - 1 2 6 C o S443 C P 7 0 - 1 1 33 J a 6 4 -1 1 N 5 3 2 1 6 R572 S P 7 0 -3 2 2 5 B 4 3 6 2 C o 3 1 2 C0S5IO C P 7 2 - 3 5 3 Ja64-1 5 N A 5 6 - 7 9 R 7 0 3 6 7 S P 7 0 - 3 3 7 0 B 4 6 3 6 4 Co331 C P 5 2 -4 3 C P 7 2 - 3 5 5 Ja64-20 N C o 3 1 0 R 7 4 1 7 S P 7 1 -7 9 9 B 4 7 2 5 8 C o 4 1 9 C P 5 2 - 4 8 C P 7 2 - 3 5 6 K W T 5 7 - 4 2 3 N C o 3 3 4 R75631 S P 7 1 -6 1 6 3 B 4 9 1 1 9 Co421 CP5 7 -6 0 3 C P 7 2 - 3 7 0 L 6 0 -2 5 N C o 3 7 6 R B 7 0 9 6 S P 7 2 -4 9 2 8 B 5 1 1 2 9 C o 4 4 9 C P 5 9 -7 3 C P 7 2 - 1 31 2 L 6 2 -9 6 P h il5 6 2 2 6 R B 7 0 1 9 4 S P 7 5-1 7 9 B 5 2 1 0 7 C o 4 6 2 CP60-01 C P 7 3 -3 51 L 6 5 -6 9 Ph i I5 8 2 6 0 R B 7 0 5 0 0 7 T u c 6 7 - 2 7 B 6 0 1 25 C o 5 2 7 C P 6 2 - 2 5 8 C P 7 3 - 1 5 4 7 L 6 6 -9 7 Ph i I6 5 5 3 R B 7 0 5 1 4 6 Tuc68-1 8 B 6 3 1 1 8 C o 7 4 0 C P 6 3 - 3 0 6 C P 7 4 - 3 8 3 L 7 2 -8 5 Ph i I6 5 5 9 R B 7 0 5 3 7 5 T u c 6 8 - 1 9 B 6 3 1 1 9 C o 7 7 5 C P 6 3 - 5 8 8 C P 7 4 - 2 0 0 5 L F6 3 -8 6 3 P h il6 6 0 7 R B 7 3 5 2 2 0 T u c 6 9 - 1 1 7 B 6 4 2 7 7 C o 7 8 5 C P 6 5 - 3 5 7 C P 7 7 - 4 1 4 L F 6 6 -2 9 1 8 POJ2878 R B 7 3 5 2 7 5 Tuc71 -5 C 3 3 4 - 6 4 C o 8 4 2 CP66-31 5 C R A 6 0 2 6 M 3 1 / 4 5 P R 1 0 0 7 R B 7 4 8 0 2 2 T u c 7 2 - 1 6 C 3 2 3 - 6 8 C0IO O I C P 6 6 - 3 4 6 E A K 7076 M 5 6 9 / 6 9 P R 1 0 1 6 R D 7 4 1 0 T u c 7 2 -2 3 C B 3 6 -2 4 C o l 1 4 8 C P 6 7 - 4 1 2 F R 8 0 2 3 4 N 1 1 P R 6 1 6 3 2 RP14 8 - 7 0 Tuc74-1 C B 4 0 - 1 3 C0I I57 CP67-41 3 F R 8 0 2 3 6 N 1 2 R397 S17 T u c 7 4 -6 C B 4 1 -7 6 C0I I77 C P 6 7 0 FR 80 4 1 2 N 1 4 R469 SIP58-1 36 T u c 7 4 - 1 0 CB45-1 55 C0I2O2 C P 6 8 - 3 5 0 IA C 4 8 6 5 N 1 5 R472 S P 7 0 -1 0 0 5 T u c 7 4 -2 4 C B 4 6 -4 7 C0I2 3O C P 6 8 - 1 0 2 2 I A C 5 1 2 0 5 N 1 6 R 5 2 6 S P 7 0-1 0 7 8 T u c 7 4 -2 6 C B 4 7 -1 5 C0 6 2I75 C P 6 8 - 1 0 2 6 I A C 5 2 1 5 0 N 1 7 R 5 6 6 S P 7 0-1 081 T u c 7 4 -3 4 C B 4 7 -3 5 5 C o 6 3 0 4 C P 6 8 - 1 0 6 7 I A C 5 8 4 8 0 N 1 8 R 5 6 7 S P 7 0 -1 2 8 4 T u c 7 4 -4 6 C B 4 9 - 2 6 0 C o 6 4 1 5 C P 6 8 - 1 1 54 I A C 6 4 2 5 7 N 1 9 R568 S P 7 0-1 4 2 3 Tuc75-1 C B 5 3 -9 8 C0 6 8O6 C P 6 9 - 1 0 5 9 Ja59-03 N 5 2 2 1 9 R 5 7 0 S P 7 0-1 4 7 8 T u c 7 5 -2 B 6 5 0 4 B 7695 B 7 8 8 2 B 7 9 1 1 8 H 5 6 - 2 7 8 M 6 5 7 / 6 6 M Y 6 4 - 2 6 Q 1 2 6 B 6623 B 7 6 1 0 2 B 7 8 1 3 0 B 7 9 1 3 0 H 5 6 - 4 8 4 8 M 3 0 3 5 / 6 6 NI1 Q 1 2 7 B 6 9 3 7 9 B 7 6 1 1 3 B 7 8 1 7 8 B 7 9 2 2 6 H 5 7 - 5 1 7 4 M 6 9 5 / 6 9 NIF3 Q 1 2 9 B 6 9 5 6 6 B 7 6 1 3 2 B 7 8 2 2 4 B 8 0 0 7 H 5 9 - 3 7 7 5 M E X 6 4 - 1 2 1 4 N I N 2 Q 1 3 0 B 6 9 7 5 8 B 7 6 1 4 6 B 7 8 2 3 7 B 8 0 0 8 H 6 2 -4 6 7 1 M E X 6 5 - 1 4 2 4 Q 7 5 Q 1 3 4 B7 0 4 4 2 B76181 B 7 8 2 4 2 B 8 0 6 6 H 6 5 - 7 0 5 2 M E X 6 6 - 1 2 4 7 Q 8 4 Q 1 3 5 B7 0 4 6 2 B 7 6 1 9 6 B 7 8 2 4 4 B 8093 H 6 6 - 4 9 2 7 M E X 6 8 - 2 0 0 Q 9 0 Q 1 3 7 B7 0 4 8 2 B 7 6 2 4 7 B 7 8 2 4 5 B 8 0 2 7 6 H 6 8 - 1 1 5 8 M E X 6 9 - 2 9 0 Q 9 5 Q 1 3 8 B 7 0 5 2 0 B 7 6 3 9 8 B 7 8 2 4 9 B80361 H 6 8 - 2 2 3 5 M E X 7 0 - 4 8 5 Q 9 6 R K 6 5 -3 7 B70531 B 7 7 8 4 B 7 8 2 6 6 B 8 0 6 8 9 H 6 9 - 8 2 3 5 M0I4 5-O3 Q 1 0 2 SES14 B 7 0 5 3 2 B 7795 B 7 8 2 9 9 BJ7013 H 6 9 - 9 1 0 3 M Q 7 2 - 1 1 75 Q 1 0 3 SES231 B72191 B 7 7 1 2 3 B 7 8 3 5 8 F14 6 H 7 0 - 1 4 4 M Q 7 2 - 4 0 0 5 Q 1 0 8 U S 5 6 - 1 5 -8 B 7 4 2 5 4 B 7 7 1 2 6 B 7 8 3 6 0 F151 H 7 2 - 8 5 9 7 M Q 7 2 - 5 0 0 6 Q 1 0 9 G a lo a B 7 4 3 5 9 B 7 7 3 9 2 B 7 8 3 6 6 F15 6 H 7 3 - 6 1 1 0 M Q 7 2 - 5 0 8 9 Q 1 1 0 Kaba B 7 4 4 7 7 B 7 7 4 1 5 B 7 8 4 3 6 F16 0 H 7 5 - 8 7 7 6 M Q 7 6 - 2 3 Q 1 1 1 M a li B 7 5 3 0 0 B 7 7 5 6 5 B 7 8 4 8 2 F161 H 7 7 - 6 6 9 4 M Q 7 6 - 5 3 Q 1 1 3 M a n a B 7 5 4 1 2 B 7 7 6 3 9 B 7 8 5 6 0 F167 H 7 8 - 7 2 3 4 M Y 5 3 - 5 3 Q 1 1 4 O n o B 7 5 5 1 9 B 7 7 7 4 0 B7 8 6 0 4 F1 75 HJ57-41 M Y 5 3 -1 73 Q 1 1 5 Tabongo B 7 5 5 2 4 B 7802 B 7 8 6 2 8 F 176 M 5 7 4 /6 2 M Y 5 4 - 6 2 Q 1 1 7 Triton B 7 5 5 2 7 B 7 8 1 4 B 7 8 6 9 7 F 178 M 2 3 7 / 6 2 M Y 5 4 - 1 29 Q 1 2 0 Trojan B 7 5 5 3 2 B 7 8 5 2 B 7 8 7 0 0 H 3 7 - 1 9 3 3 M 2 1 7 3 /6 3 M Y 5 5 - 1 4 Q 1 2 1 U b a Naguin B 7 6 3 9 B 7 8 7 7 B 7 9 9 7 H 5 0 - 7 2 0 9 M 3 7 6 /6 4 M Y 5 7 -1 5 Q 1 2 4 Agriculture et développement Número especial - Diciembre de 1994
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Resumen... Abstract... Résumé
F. PAULET, J.-C. GLASZMANN - Las biotecnologías como ayuda a la difusión de variedades de caña de azúcar.
La diffusion y los intercambios de variedades de caña de tzúcar sacan provecho hoy de los progresos realizados en biotecnología. Como complemento del servicio de "cuaren te n a in te r n a c io n a l" o r g a n iz a d o por el CIRAD en M ontpellier, se ha em p ren dido la constitución de una colección de caña de azúcar in vitro. Se ha llevado a cabo la regeneración in vitro de yemas axilares y la conserva ción en letargo de las plántulas obtenidas. Actualmente se rienen almacenadas cerca de 4 0 0 variedades (o clones), con 10 muestras por variedad. Esta "vitroteca" ocupa un espacio reducido y permite suministrar rápidamente plan tas sanas para una amplia gama de material. Esta forma
in vitro también posibilita la aplicación de la crioconserva ción, que es útil para la preservación de recursos genéti cos. La utilización de la electroforesis de enzimas y de las nuevas h e rram ien tas de la biología m olecular (RFLP) refuerza el control y la fiabilidad de la colección. Palabras clave: Saccharum, caña de azúcar, clon, cultivo
in vitro, biología m olecular, electroforesis enzim ática, crioconservación, vitroteca, cuarentena.
F. PAULET, J.-C. GLASZMANN - Biotechnological
support for varietal extension of sugarcane.
Biotechnological advances have benefitted sugarcane varietal extension and exchange. An in vitro sugarcane collection has now been set up as a supplem ent to the "International Quarantine Service" organized by CIRAD in Montpellier (France). In vitro sucker regeneration and latency conservation of the resulting plantlets has been developed. Almost 4 0 0 varieties or clones (1 0 specimens of each) have now been stored. This "vitrotheque" does not take much space and enables distribution of a broad range of healthy plants rapidly. This in vitro plant m ate rial can also be cryopreserved, a useful procedure for genetic resource conservation. Enzyme electrophoresis and other m olecular biology tools (RFPL) are used to control the collection, thus guaranteeing its reliability. Key words: Saccharum, sugorcane, don, in vitro culture, molecular biology, enzyme electrophoresis, cryopreserva- tion, vitrotheque, quarantine.
F. PAULET, J.-C. GLASZMANN - Les biotechnologies en
soutien à la diffusion variétale chez la canne à sucre.
Diffusion et échanges va rié ta u x chez la canne à sucre bénéficient aujourd'hui des progrès en biotechnologie. En complément du service de « quarantaine internationale » organisé par le CIRAD à Montpellier, il a été entrepris de constituer une collection de canne à sucre in vitro. La régénération in vitro de bourgeons axillaires et la conser vation en vie ralentie des plantules obtenues ont été mises au point. Près de 4 0 0 variétés (ou clones) sont maintenant stockées à raison de 1 0 é chantillons chacune. Cette « vitrothèque » occupe un espace réduit et permet de four nir rapidement des plants sains pour une large gam m e de m atériel. Cette form e in vitro rend possible égalem ent l'application de la cryoconservation, utile pour la préser vation des resssources génétiques. Le recours à l'électro- phorèse d'enzymes et aux nouveaux outils de la biologie moléculaire (RFLP) vient renforcer le contrôle et la fiabili té de la collection.
Mots-clés : Saccharum, canne à sucre, clone, culture in vitro, biologie moléculaire, électrophorèse enzymatique, cryoconservation, vitrothèque, quarantaine.
