Afin d’identifier le (ou les) acide(s) gras précurseur(s) de ces alcaloïdes, nous avons dans un premier temps synthétisé des acides gras spécifiquement marqués. Nous avons ainsi préparé les acides [14-

(1)

Thèse de doctorat de HAULOTTE Eveline

« Biosynthèse d’alcaloïdes défensifs de Coccinellidae »

Résumé

Dans le cadre de ce travail, nous avons poursuivi l’étude de la biosynthèse d’alcaloïdes défensifs des coccinelles. Trois espèces ont été plus particulièrement étudiées : Adalia bipunctata (qui produit l’adaline [32]), Coccinella septempunctata (contenant la coccinelline [29]) et Harmonia axyridis (produisant l’harmonine [34]).

Afin d’identifier le (ou les) acide(s) gras précurseur(s) de ces alcaloïdes, nous avons dans un premier temps synthétisé des acides gras spécifiquement marqués. Nous avons ainsi préparé les acides [14-

³

H]myristique, [16-

³

H]palmitique, [18-

³

H]stéarique, [18-

¹³

C]stéarique et [11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16, 16,17,17,18,18,18-

²

H]stéarique.

CH

₂

HOOC

n

CH

₃

N

H H

H

O NH

₂

NH

2

N H

O

C

₅

H

₁₁

+ -

coccinelline

harmonine adaline

[32] [29]

[34]

n = 10, 12 ou 14

Les différents acides gras marqués au tritium sur le méthyle terminal ont ensuite été incorporés successivement chez les trois espèces de coccinelles mentionnées ci-dessus, en utilisant la technique d’incorporation in vitro mise au point par Laurent et al.

⁽¹⁾

Les incorporations chez Adalia bipunctata ont montré que l’acide myristique est incorporé préférentiellement dans l’adaline.

Chez Coccinella septempunctata par contre, l’acide stéarique est incorporé dans la coccinelline environ 25 fois plus efficacement que les acides myristique et palmitique.

Enfin, les incorporations chez Harmonia axyridis ont établi que l’acide stéarique est le précurseur de l’harmonine. De plus, grâce à l’incorporation de l’acide [11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-

²

H]stéarique, le mécanisme de formation de l’amine secondaire a été précisé.

1

Afin d’identifier le (ou les) acide(s) gras précurseur(s) de ces alcaloïdes, nous avons dans un premier temps synthétisé des acides gras spécifiquement marqués. Nous avons ainsi préparé les acides [14-

Thèse de doctorat de HAULOTTE Eveline

« Biosynthèse d’alcaloïdes défensifs de Coccinellidae »

Résumé

Afin d’identifier le (ou les) acide(s) gras précurseur(s) de ces alcaloïdes, nous avons dans un premier temps synthétisé des acides gras spécifiquement marqués. Nous avons ainsi préparé les acides [14-

H]myristique, [16-

H]palmitique, [18-

H]stéarique, [18-

C]stéarique et [11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16, 16,17,17,18,18,18-

H]stéarique.

CH

HOOC

CH

N

H H

H

O NH

NH

N H

O

C

H

+ -

coccinelline

harmonine adaline

[32] [29]

[34]

n = 10, 12 ou 14

Les différents acides gras marqués au tritium sur le méthyle terminal ont ensuite été incorporés successivement chez les trois espèces de coccinelles mentionnées ci-dessus, en utilisant la technique d’incorporation in vitro mise au point par Laurent et al.

Les incorporations chez Adalia bipunctata ont montré que l’acide myristique est incorporé préférentiellement dans l’adaline.

Chez Coccinella septempunctata par contre, l’acide stéarique est incorporé dans la coccinelline environ 25 fois plus efficacement que les acides myristique et palmitique.

Enfin, les incorporations chez Harmonia axyridis ont établi que l’acide stéarique est le précurseur de l’harmonine. De plus, grâce à l’incorporation de l’acide [11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-

H]stéarique, le mécanisme de formation de l’amine secondaire a été précisé.

P. Laurent, J-C. Braekman, D. Daloze, J.M. Pasteels, Insect Biochem. Molec. Biol., 2002, 32, 1017-1023.