ANNEE: 2008 THESE N°: 97
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Présentée et soutenue publiquement le :………..
PAR
Mlle Rajaa BENYAHIA Née le 20 Mai 1982 à Kénitra
Pour l'Obtention du Doctorat en Pharmacie
MOTS CLES: Don de plaquettes – Aphérèse - Indications.
JURY
Mr. M. BENKIRANE PRESIDENT
Professeur d'Hématologie
Mr. A. BELMEKKI RAPPORTEUR
Professeur Agrégé d'Hématologie Mr. A. BOULAHYA
Professeur Agrégé de Chirurgie Cardio-Vasculaire Mr. B. E. LMIMOUNI
Professeur Agrégé de Parasitologie Mr. S. MRANI
Professeur Agrégé de Virologie
DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 : Docteur Ahdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI ADMINISTRATION :
Doyen : Professeur Najia HAJJAJ
Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et Estudiantines Professeur Mohammed JIDDANE Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération
Professeur Naima LAHBABI-AMRANI Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie
Professeur Yahia CHERRAH Secrétaire Général : Monsieur Mohammed BENABDELLAH PROFESSEURS :
Décembre 1967
1. Pr. TOUNSI Abdelkader Pathologie Chirurgicale
Février, Septembre, Décembre 1973
2. Pr. ARCHANE My Idriss* Pathologie Médicale 3. Pr. BENOMAR Mohammed Cardiologie
4. Pr. CHAOUI Abdellatif Gynécologie Obstétrique 5. Pr. CHKILI Taieb Neuropsychiatrie
Janvier et Décembre 1976
6. Pr. HASSAR Mohamed Pharmacologie Clinique
Février 1977
7. Pr. AGOUMI Abdelaziz Parasitologie 8. Pr. BENKIRANE ép. AGOUMI Najia Hématologie 9. Pr. EL BIED ép. IMANI Farida Radiologie
Février Mars et Novembre 1978
10. Pr. ARHARBI Mohamed Cardiologie
11. Pr. SLAOUI Abdelmalek Anesthésie Réanimation
Mars 1979
12. Pr. LAMDOUAR ép. BOUAZZAOUI Naima Pédiatrie
Mars, Avril et Septembre 1980
13. Pr. EL KHAMLICHI Abdeslam Neurochirurgie 14. Pr. MESBAHI Redouane Cardiologie
18. Pr. HAMMANI Ahmed* Cardiologie
19. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajih Chirurgie Cardio-Vasculaire 20. Pr. SBIHI Ahmed Anesthésie Réanimation 21. Pr. TAOBANE Hamid* Chirurgie Thoracique
Mai et Novembre 1982
22. Pr. ABROUQ Ali* Oto-Rhino-Laryngologie
23. Pr. BENOMAR M’hammed Chirurgie-Cardio-Vasculaire 24. Pr. BENSOUDA Mohamed Anatomie
25. Pr. BENOSMAN Abdellatif Chirurgie Thoracique 26. Pr. CHBICHEB Abdelkrim Biophysique
27. Pr. JIDAL Bouchaib* Chirurgie Maxillo-faciale 28. Pr. LAHBABI ép. AMRANI Naïma Physiologie
Novembre 1983
29. Pr. ALAOUI TAHIRI Kébir* Pneumo-phtisiologie 30. Pr. BALAFREJ Amina Pédiatrie
31. Pr. BELLAKHDAR Fouad Neurochirurgie 32. Pr. HAJJAJ ép. HASSOUNI Najia Rhumatologie 33. Pr. SRAIRI Jamal-Eddine Cardiologie
Décembre 1984
34. Pr. BOUCETTA Mohamed* Neurochirurgie 35. Pr. EL OUEDDARI Brahim El Khalil Radiothérapie 36. Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne 37. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation 38. Pr. NAJI M’Barek * Immuno-Hématologie 39. Pr. SETTAF Abdellatif Chirurgie
Novembre et Décembre 1985
40. Pr. BENJELLOUN Halima Cardiologie 41. Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale 42. Pr. EL ALAOUI Faris Moulay El Mostafa Neurologie
43. Pr. IHRAI Hssain * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-Faciale 44. Pr. IRAQI Ghali Pneumo-phtisiologie
45. Pr. KZADRI Mohamed Oto-Rhino-laryngologie
Janvier, Février et Décembre 1987
46. Pr. AJANA Ali Radiologie
47. Pr. AMMAR Fanid Pathologie Chirurgicale 48. Pr. CHAHED OUAZZANI ép.TAOBANE Houria Gastro-Entérologie 49. Pr. EL FASSY FIHRI Mohamed Taoufiq Pneumo-phtisiologie 50. Pr. EL HAITEM Naïma Cardiologie
51. Pr. EL MANSOURI Abdellah* Chimie-Toxicologie Expertise 52. Pr. EL YAACOUBI Moradh Traumatologie Orthopédie 53. Pr. ESSAID EL FEYDI Abdellah Gastro-Entérologie 54. Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne
57. Pr. BENHMAMOUCH Mohamed Najib Chirurgie Pédiatrique 58. Pr. DAFIRI Rachida Radiologie
59. Pr. FAIK Mohamed Urologie
60. Pr. FIKRI BEN BRAHIM Noureddine Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 61. Pr. HERMAS Mohamed Traumatologie Orthopédie
62. Pr. TOULOUNE Farida* Médecine Interne
Décembre 1989 Janvier et Novembre 1990
63. Pr. ABIR ép. KHALIL Saadia Cardiologie 64. Pr. ACHOUR Ahmed* Chirurgicale 65. Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne 66. Pr. AOUNI Mohamed Médecine Interne
67. Pr. AZENDOUR BENACEUR* Oto-Rhino-Laryngologie 68. Pr. BENAMEUR Mohamed* Radiologie
69. Pr. BOUKILI MAKHOUKHI Abdelali Cardiologie 70. Pr. CHAD Bouziane Pathologie Chirurgicale 71. Pr. CHKOFF Rachid Pathologie Chirurgicale 72. Pr. FARCHADO Fouzia ép.BENABDELLAH Pédiatrique 73. Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne 74. Pr. HACHIMI Mohamed Urologie
75. Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique 76. Pr. MANSOURI Fatima Anatomie-Pathologique 77. Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie 78. Pr. SEDRATI Omar* Dermatologie
79. Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation 80. Pr. TERHZAZ Abdellah* Ophtalmologie
Février Avril Juillet et Décembre 1991
81. Pr. AL HAMANY Zaîtounia Anatomie-Pathologique 82. Pr. ATMANI Mohamed* Anesthésie Réanimation 83. Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation 84. Pr. BAYAHIA ép. HASSAM Rabéa Néphrologie 85. Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale 86. Pr. BENABDELLAH Chahrazad Hématologie
87. Pr. BENCHEKROUN BELABBES Abdelatif Chirurgie Générale 88. Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
89. Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie 90. Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie Obstétrique 91. Pr. CHABRAOUI Layachi Biochimie et Chimie 92. Pr. CHANA El Houssaine* Ophtalmologie 93. Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
94. Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie 95. Pr. FAJRI Ahmed* Psychiatrie
96. Pr. JANATI Idrissi Mohamed* Chirurgie Générale 97. Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
98. Pr. NEJMI Maati Anesthésie-Réanimation
102. Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale 103. Pr. BENOUDA Amina Microbiologie
104. Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation 105. Pr. BOUJIDA Mohamed Najib Radiologie
106. Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie 107. Pr. CHAKIR Noureddine Radiologie
108. Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstetrique 109. Pr. DAOUDI Rajae Ophtalmologie
110. Pr. DEHAYNI Mohamed* Gynécologie Obstétrique 111. Pr. EL HADDOURY Mohamed Anesthésie Réanimation 112. Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie
113. Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie 114. Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne 115. Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
116. Pr. OUAZZANI TAIBI Med Charaf Eddine Gynécologie Obstétrique 117. Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
118. Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
Mars 1994
119. Pr. AGNAOU Lahcen Ophtalmologie 120. Pr. AL BAROUDI Saad Chirurgie Générale 121. Pr. ARJI Moha* Anesthésie Réanimation 122. Pr. BENCHERIFA Fatiha Ophtalmologie
123. Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie 124. Pr. BENJELLOUN Samir Chirurgie Générale 125. Pr. BENRAIS Nozha Biophysique
126. Pr. BOUNASSE Mohammed* Pédiatrie 127. Pr. CAOUI Malika Biophysique
128. Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métabolique 129. Pr. EL AMRANI ép. AHALLAT Sabah Gynécologie Obstétrique
130. Pr. EL AOUAD Rajae Immunologie
131. Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato Orthopédie 132. Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
133. Pr. EL IDRISSI LAMGHARI Abdennaceur Médecine Interne 134. Pr. EL KIRAT Abdelmajid* Chirurgie Cardio- Vasculaire 135. Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale
136. Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
137. Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique 138. Pr. HADRI Larbi* Médecine Interne 139. Pr. HDA Ali* Médecine Interne 140. Pr. HASSAM Badredine Dermatologie 141. Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale 142. Pr. JELTHI Ahmed Anatomie Pathologique
143. Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie Orthopédie 144. Pr. MOUDENE Ahmed* Traumatologie Orthopédie 145. Pr. MOSSEDDAQ Rachid* Neurologie
146. Pr. OULBACHA Said Chirurgie Générale 147. Pr. RHRAB Brahim Gynécologie Obstétrique
150. Pr. ABBAR Mohamed* Urologie
151. Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie - Pédiatrique 152. Pr. BELAIDI Halima Neurologie
153. Pr. BARHMI Rida Slimane Gynécologie Obstétrique 154. Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
155. Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie -Obstétrique 156. Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie -Orthopédie 157. Pr. CHAMI Ilham Radiologie
158. Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie 159. Pr. EL ABBADI Najia Neurochirurgie 160. Pr. HANINE Ahmed* Radiologie
161. Pr. JALIL Abdelouahed Chirurgie Générale 162. Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique 163. Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
Mars 1995
164. Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale 165. Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
166. Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique 167. Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique 168. Pr. BELLAHNECH Zakaria Urologie
169. Pr. BEDDOUCHE Amoqrane* Urologie
170. Pr. BENAZZOUZ Mustapha Gastro-Entérologie 171. Pr. CHAARI Jilali* Médecine Interne
172. Pr. DIMOU M'barek* Anesthésie Réanimation
173. Pr. DRISSI KAMILI Mohammed Nordine* Anesthésie Réanimation 174. Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale
175. Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie 176. Pr. FERHATI Driss Gynécologie Obstétrique
177. Pr. HASSOUNI Fadil Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 178. Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie
179. Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie 180. Pr. IBRAHIMY Wafaa Ophtalmologie 182. Pr. BENOMAR ALI Neurologie
183. Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale 184. Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale 185. Pr. EZZAITOUNI Fatima Néphrologie 186. Pr. KABBAJ Najat Radiologie
187. Pr. LAZRAK Khalid (M) Traumatologie Orthopédie 188. Pr. OUTIFA Mohamed* Gynécologie Obstétrique
Décembre 1996
189. Pr. AMIL Touriya* Radiologie
190. Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
191. Pr. BELMAHI Amin Chirurgie réparatrice et plastique 192. Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
193. Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale 194. Pr. EL MELLOUKI Ouafae* Parasitologie
200. Pr. MOULINE Soumaya Pneumo-phtisiologie
201. Pr. OUADGHIRI Mohamed Traumatologie – Orthopédie 202. Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
203. Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie
Novembre 1997
204. Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie – Obstétrique 205. Pr. BEN AMAR Abdesselem Chirurgie Générale 206. Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie 207. Pr. BIROUK Nazha Neurologie
208. Pr. BOULAICH Mohamed O.RL. 209. Pr. CHAOUIR Souad* Radiologie 210. Pr. DERRAZ Said Neurochirurgie 211. Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie 212. Pr. FELLAT Nadia Cardiologie 213. Pr. GUEDDARI Fatima Zohra Radiologie
214. Pr. HAIMEUR Charki* Anesthésie Réanimation 215. Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie – Pédiatrique 216. Pr. KANOUNI NAWAL Physiologie
217. Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
218. Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale 219. Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
220. Pr. NAZZI M’barek* Cardiologie 221. Pr. OUAHABI Hamid* Neurologie
222. Pr. SAFI Lahcen* Anesthésie Réanimation 223. Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie
224. Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
Novembre 1998
225. Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie 226. Pr. KHATOURI Ali* Cardiologie
227. Pr. LABRAIMI Ahmed* Anatomie Pathologique
Novembre 1998
228. Pr. AFIFI RAJAA Gastro - Entérologie 229. Pr. AIT BENASSER MOULAY Ali* Pneumo-phtisiologie 230. Pr. ALOUANE Mohammed* Oto- Rhino- Laryngologie 231. Pr. LACHKAR Azouz Urologie
232. Pr. LAHLOU Abdou Traumatologie Orthopédie 233. Pr. MAFTAH Mohamed* Neurochirurgie 234. Pr. MAHASSINI Najat Anatomie Pathologique 235. Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
236. Pr. MANSOURI Abdelaziz* Neurochirurgie
237. Pr. NASSIH Mohamed* Stomatologie Et Chirurgie Maxillo Faciale 238. Pr. RIMANI Mouna Anatomie Pathologique
239. Pr. ROUIMI Abdelhadi Neurologie
Janvier 2000
245. Pr. CHAOUI Zineb Ophtalmologie
246. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale 247. Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale 248. Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie 249. Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie 250. Pr. EL OTMANYAzzedine Chirurgie Générale 251. Pr. GHANNAM Rachid Cardiologie
252. Pr. HAMMANI Lahcen Radiologie
253. Pr. ISMAILI Mohamed Hatim Anesthésie-Réanimation 254. Pr. ISMAILI Hassane* Traumatologie Orthopédie 255. Pr. KRAMI Hayat Ennoufouss Gastro-Entérologie 256. Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation 257. Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation 258. Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
Novembre 2000
259. Pr. AIDI Saadia Neurologie 260. Pr. AIT OURHROUIL Mohamed Dermatologie 261. Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie 262. Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale 263. Pr. BENCHEKROUN Nabiha Ophtalmologie
264. Pr. BOUSSELMANE Nabile* Traumatologie Orthopédie 265. Pr. BOUTALEB Najib* Neurologie
266. Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
267. Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation 268. Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie
269. Pr. EL IDGHIRI Hassan Oto-Rhino-Laryngologie 270. Pr. EL KHADER Khalid Urologie
271. Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
272. Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques 273. Pr. HSSAIDA Rachid* Anesthésie-Réanimation
274. Pr. MANSOURI Aziz Radiothérapie 275. Pr. OUZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
276. Pr. RZIN Abdelkader* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 277. Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
278. Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale PROFESSEURS AGREGES :
Décembre 2001
279. Pr. ABABOU Adil Anesthésie-Réanimation 280. Pr. AOUAD Aicha Cardiologie
281. Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation 282. Pr. BELMEKKI Mohammed Ophtalmologie
283. Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie 284. Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
285. Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie 286. Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie 287. Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
288. Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie 289. Pr. BENYOUSSEF Khalil Dermatologie
294. Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie 295. Pr. CHAT Latifa Radiologie 296. Pr. CHELLAOUI Mounia Radiologie
297. Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale 298. Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
299. Pr. EL HAJOUI Ghziel Samira Gynécologie Obstétrique 300. Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation 301. Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie 302. Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique 303. Pr. EL MOUSSAIF Hamid Ophtalmologie 304. Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale 305. Pr. EL QUESSAR Abdeljlil Radiologie
306. Pr. ETTAIR Said Pédiatrie 307. Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie 308. Pr. GOURINDA Hassan Chirurgie-Pédiatnique 309. Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale 310. Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation 311. Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique 312. Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
313. Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique 314. Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
315. Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale 316. Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique 317. Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale 318. Pr. NABIL Samira Gynécologie Obstétrique 319. Pr. NOUINI Yassine Urologie
320. Pr. OUALIM Zouhir* Néphrologie 321. Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
322. Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique 323. Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie
324. Pr. TAZI MOUKHA Karim Urologie
Décembre 2002
325. Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique 326. Pr. AMEUR Ahmed* Urologie
327. Pr. AMRI Rachida Cardiologie 328. Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie 329. Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie 330. Pr. BELGHITI Laila Gynécologie Obstétrique
331. Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 332. Pr. BENBOUAZZA Karima Rhumatologie
333. Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
334. Pr. BENZZOUBEIR Nadia* Gastro – Enterologie 335. Pr. BERADY Samy* Médecine Interne
336. Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique 337. Pr. BICHRA Mohamed Zakarya Psychiatrie 338. Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale 339. Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
340. Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique 341. Pr. EL ALJ Haj Ahmcd Urologie
346. Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique 347. Pr. HADDOUR Leila Cardiologie
348. Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie 349. Pr. IKEN Ali Urologie
350. Pr. ISMAEL Farid Traumatologie Orthopédie 351. Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie 352. Pr. KRIOULE Yamina Pédiatrie
353. Pr. LAGHMARI Mina Ophtalmologie
354. Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie 355. Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique 356. Pr. MOUSTAGHFIR Abdelhamid* Cardiologie
357. Pr. MOUSTAINE My Rachid Traumatologie Orthopédie 358. Pr. NAITLHO Abdelhamid* Médecine Interne
359. Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie 360. Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie 361. Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale
362. Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie 363. Pr. RHOU Hakima Néphrologie
364. Pr. RKIOUAK Fouad* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 365. Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
366. Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
367. Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale 368. Pr. ZRARA Ibtisam* Anatomie Pathologique
Janvier 2004
369. Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie 370. Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique 371. Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie 372. Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie 373. Pr. BENRAMDANE Larbi* Chimie Analytique 374. Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation
375. Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 376. Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
377. Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique 378. Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
379. Pr. EL HANCHI Zaki Gynécologie Obstétrique 380. Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie
381. Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie 382. Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale 383. Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
384. Pr. KARMANE Abdelouahed Ophtalmologie
385. Pr. KHABOUZE Samira Gynécologie Obstétrique 386. Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie 387. Pr. LEZREK Mohammed* Urologie
388. Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire 389. Pr. NAOUMI Asmae* Ophtalmologie
390. Pr. SAADI Nozha Gynécologie Obstétrique 391. Pr. SASSENOU Ismail* Gastro-Entérologie 392. Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
395. Pr. ABBASSI Abdelah Chirurgie Réparatrice et Plastique 396. Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
397. Pr. ALAOUI Ahmed Essaid Microbiologie 398. Pr. ALLALI fadoua Rhumatologie 399. Pr. AMAR Yamama Néphrologie
400. Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie 401. Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie 402. Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie 403. Pr. BARAKAT Amina Pédiatrie
404. Pr. BENHALIMA Hanane Stomatologie et Chirurgie Maxillo Faciale 405. Pr. BENHARBIT Mohamed Ophtalmologie
406. Pr. BENYASS Aatif Cardiologie 407. Pr. BERNOUSSI Abdelghani Ophtalmologie 408. Pr. BOUKALATA Salwa Radiologie
409. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Mohamed Ophtalmologie 410. Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique 411. Pr. EL HAMZAOUI Sakina Microbiologie 412. Pr. HAJJI Leila Cardiologie
413. Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie 414. Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie 415. Pr. KARIM Abdelouahed Ophtalmologie 416. Pr. KENDOUSSI Mohamed* Cardiologie
417. Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio Vasculaire 418. Pr. LYACOUBI Mohammed Parasitologie
419. Pr. NIAMANE Radouane* Rgumatologie
420. Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique 421. Pr. REGRAGUI Asmaa Anatomie Pathologique
422. Pr. SBIHI Souad Histo Embryologie Cytogénétique 423. Pr. TNACHERI OUAZZANI Btissam Ophtalmologie
424. Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
Avril 2006
425. Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie 426. Pr. AFIFI Yasser Dermatologie 427. Pr. AKJOUJ Said* Radiologie 428. Pr. BELGNAOUI Fatima Zahra Dermatologie 429. Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hematologie 430. Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L 431. Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
432. Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie – Pédiatrique 433. Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio-Vasculaire 434. Pr. CHEIKHAOUI Younes Chirurgie Cardio-Vasculaire 435. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique 436. Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
437. Pr. ESSAMRI Wafaa Gastro-Entérologie 438. Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
439. Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation 440. Pr. GHADOUANE Mohammed* Urologie
446. Pr. KILI Amina Pédiatrie 447. Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
448. Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique 449. Pr. KHARCHAFI Aziz* Médecine Interne 450. Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie 451. Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie 452. Pr. NAZIH Naoual O.R.L
453. Pr; OUANASS Abderrazzak Psychiatrie 454. Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie 455. Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie 456. Pr. SEFIANI Sana Anatomie Pathologique 457. Pr. SOUALHI Mouna Pneumo-Phtisiologie 458. Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo-Phtisiologie ENSEIGNANTS SCIENTIFIQUES
PROFESSEURS
1. Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie 2. Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
3. Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie – Embryologie 4. Pr. ANSAR M'hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique 5. Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques 6. Pr. BOURJOUANE Mohamed Microbiologie
7. Pr. DRAOUI Mustapha Chimie Analytique 8. Pr. EL GUESSABI Lahcen Pharmacognosie 9. Pr. ETTAIB Abdelkader Zootechnie 10. Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie 11. Pr. HMAMOUCHI Mohamed Chimie Organique 12. Pr. REDHA Ahlam Biochimie
13. Pr. TELLAL Saida* Biochimie 14. Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie 15. Pr. ZELLOU Amina Chimie Organique * Enseignants Militaires
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13
Tableau N°1 Principales protéines de la membrane plaquettaire,
classées en fonction de leur ligand
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15
Tableau N°2 Les principales granules plaquettaires
Page
16
Tableau N°3 Liste des transformations et qualifications applicables
aux CPA.
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53
Tableau N°4 Procédures non terminées selon le motif d’arrêt
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79
Tableau N°5 Nombre de procédures par année
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80
Tableau N°6 Nombre de CPA distribuée par service
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82
Tableau N°7 Nombre de CPA distribués par pathologie
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Fig. N°1
Fig. N°1 : Principaux stades de l’érythropoïèse et
la mégacaryopoïèse
Page
9 Fig. N°2
Fig. N° 2 : Les différentes parties d’un séparateur
de cellules
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24 Fig. N°3
Fig. N°3: Bol de centrifugation à flux
discontinu. Appareil HaemoneticsTM. [18]
Page
26 Fig. N°4
Fig. 6: Processus de prélèvement de plaquettes. Page 40 Fig. N°5
Fig. N°4: Procédure d’indication
transfusionnelle en cas de thrombopénie centrale
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63 Fig. N°6
Fig. N° 5 : Choix du produit plaquettaire en
onco-hématologie Page
66 Fig. N°7
Fig. N°7 : Répartition des procédures à
l’HMIMV Page 78
Fig. N°8
Fig. N° 9 : Procédures non terminées selon le
motif d’arrêt Page 79
Fig. N°9
Fig. N° 10: Nombre de procédures d’aphérèse
plaquettaire par année Page
81 Fig. N°10
Fig. N°11 : Nombre de CPA distribuée par
service Page
83 Fig. N°11
Fig. N° 12 : Nombre de CPA distribué par
pathologie Page
Schéma N° 1
Schéma N° 1 : Représentation schématique d’une plaquette sanguine vue au Microscope Electronique
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12
Schéma N° 2
Schéma N° 2 : Système de séparation par centrifugation à flux discontinu
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28 Schéma N° 3
Schéma N°3 : Système de séparation par centrifugation à flux continu
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31 Schéma N° 4
Schéma N°4 : Système de filtration Page
35
LISTE DES IMAGES
Image N°1
Image N°1: automate MCS3p de séparation par centrifugation à flux discontinu
(Haemonetics)
Page 29
Image N°2
Image N°2 : Automate COBE SpectraR de séparation par centrifugation à flux continu
Page 32
Image N°3
Images N°3 : Automate COBE SpectraR (Séparateur à flux continu)
Page 33
Image N°4
Images N° 4 : Automate COMTEC 205R (Séparateur à flux continu)
Page 33
Image N°5
Image N°5 : séparateur de cellules a filtre Prisma° Page 34
ACD : Acide citrique, Citrate, Dextrose AINS : Anti-Inflammatoires Non-Stéroïdiens BMT : Bone Marrow Transplntation
CCI : Corrected Count Increment C D : Cluster of Differenciation C GR : Concentré de Globules Rouges
CIVD : Coagulation Intravasculaire Disséminée CMV : Cytomégalovirus
CO2 : Dioxyde de Carbone CP : Concentré Plaquettaire
CPA : Concentré Plaquettaire d’Aphérèse CPD : Citrate, Phosphate, Dextrose CPS : Concentré Plaquettaire Standard EDTA : Ethylène Diamine Tetra Acetate
ETS : Etablissement de Transfusion Sanguine GVH : Graft Versus Host Disease
G/L : Giga / Litre
HLA : Human Leucocyte Antigen HPA : Human Platelet Antigen
IFP : Inhibiteurs du Fonctionnement Plaquettaire LAM : Leucémie Aiguë Myéloïde
MCP : Mélange de Concentrés Plaquettaires MGG : May Grünewald Giemsa
M K : Mégacayocyte
M O : Moelle osseuse
N/C : rapport nucléo-cytoplasmique NP : Numération Plaquettaire
PFC : Plasma Frais Congelé
PLT : Plaquette
PRP : Plasma Riche en Plaquettes PSL : Produit Sanguin Labile Rh : Rhésus
RTP : Rendement Transfusionnel Plaquettaire SCF : Stem Cell Factor
TGF : Transforming Growth Factor
TPO : Thrombopoiètine
Première partie :
Rappel sur la mégacaryopoïèse
I-mégacaryopoïèse ... 5
1- Compartiment des progéniteurs ...5
2- Endomitoses ...6
3- compartiment de différenciation ou de maturation ...7
II- les plaquettes sanguines ... 10
1-Morphologie de plaquettes sanguines ... 10
2-Structure et anatomie fonctionnelle des plaquettes ... 13
2-1- Le cytosquelette ... 13
2-2- La membrane plaquettaire ... 13
2-3- Les protéines de la membrane plaquettaire ... 13
2-4- Les granules ... 16
3- Fonctions des plaquettes ... 17
3-1- Rôle dans l’hémostase ... 17
I- Historique ... 20
II- Evolution de la technologie d’aphérèse ... 22
III- Les différentes techniques de séparations ... 23
1-Séparateurs de cellules par centrifugation ... 25
1-1- Séparateurs de cellules à flux discontinue... 25
1-2- Séparateurs de cellules à flux continue ... 30
2- Reins capillaires ... 34
IV-Les caractéristiques du don de plaquettes par technique d’aphérèse ... 38
V- Prélèvement thérapeutique des plaquettes par technique d’aphérèse ... 39
Troisième partie :
Don de plaquettes par techniques d’aphérèse
I- Introduction ... 42II- Le don de plaquettes d’aphérèse ... 43
1- Identification du donneur et du don ... 43
2- Sélection des donneurs ... 44
3- Examen clinique et contrôle biologique à l’occasion du don ... 45
4- Contre- indications au don ... 45
5-Le prélèvement ... 45
1-1- Déleucocytation ... 47 1-2- Irradiation ... 48 1-3- Déplasmatisation ... 48 1-4- Réduction de volume ... 49 1-5- Cryoconservation ... 50 1-6- Préparation pédiatrique ... 50 2- Qualifications... 51 2-1- Qualification « Phénotypée » ... 51 2-2- Qualification « Compatibilité » ... 52 2-3- Qualification « CMV » négatif ... 52
Quatrième partie :
Transfusion des plaquettes
I- Introduction ... 55
II-Seuil transfusionnel ... 55
III- indication de la transfusion de plaquette ... 56 1- Transfusion de plaquettes en chirurgie et obstétriques ... 56 2- En hématologie et en oncologie ... 60 2-1 Thrombopénie centrales ... 60 2-2. Thrombopénies périphériques ... 64 3-Transfusion de plaquettes en néonatologie ... 67
I- Introduction ... 71
I-Matériels et méthodes ... 71 1-Donneur ... 71 2-Matériels ... 71 a- Les séparateurs utilisés ... 71 b- Kit à usage unique ... 72 c- Anticoagulant ... 73 d- Solution de NaCl ... 73 e- Préparation du matériel ... 73 3- Déroulement de l’aphérèse plaquettaire ... 74 a-Phase de prélèvement ... 75 b-Phase de pré-surge ... 75 c- Phase de surge ... 75 d-Phase de retour ... 76 4-Qualification du CPA... 76 5- Conservation ... 77 III-Résultats ... 78 IV-Discussion ... 86 CONCLUSION ... 90 RESUME ... 92 BIBLIOGRAPHIE ... 95
La transfusion de plaquettes a nécessairement dû répondre à la sécurisation et à la notion de seuil transfusionnelle, avec l’évolution vers l’utilisation large de produits mono-donneurs, comme les concentrés de plaquettes d'aphérèse (CPA). L’aphérèse plaquettaire est une technique qui permet l’extraction sélective des plaquettes, d’un donneur sain pour fin de transfusion (aphérèse transfusionnelle), ou pour le traitement de certaines maladies (aphérèse thérapeutique). [2, 1]
Le don de plaquettes par technique d’aphérèse permet d’obtenir, à partir d’un seul donneur et au moyen d’un séparateur, des concentrés plaquettaires, prêts à être étiquetés, stockés et distribués après leur qualification. De ce fait, l’aphérèse représente un progrès considérable dans l’automatisation et la standardisation des produits sanguins labiles. Cela permet de prélever, de séparer, de déleucocyter en même temps. [1, 3, 4]
Ces techniques apparues il y a un peu plus de 20 ans, sont devenues beaucoup plus performantes concernant la qualité des produits préparés, la fiabilité de la technique et le confort pour le donneur. C’est sur le don de plaquettes que les efforts ont été les plus importants, et il est possible aujourd’hui de prélever en 1 heure 30 à 2 heures, sur un seul bras, une dose thérapeutique de plaquettes efficace. Ces prélèvements de plaquettes par aphérèse ont, pour les malades transfusés, un intérêt majeur, celui de limiter les risques transfusionnels immunologiques et infectieux, si on la compare à la même dose obtenue de plusieurs unités de concentrés de plaquettes standards (CPS), produites à partir des prélèvements de sang total. Un autre intérêt existe dans le contrôle systématique de la dose de plaquettes contenues dans les CPA, contrairement aux CPS où il est impossible de les vérifier unitairement. [4]
Comme toute décision médicale, l’acte de transfuser des plaquettes comporte des risques tout comme le fait de ne pas transfuser. Poser une indication et prescrire une transfusion de plaquettes pour appréhender le risque hémorragique réel, reste complexe et doit tenir compte d’un nombre de plus en plus important de paramètres (indication, choix quantitatif et qualitatif du produit, notion de seuil, situation clinique et enfin coût). Il est évident que l’application de ce type de technologie va bouleverser nos pratiques et nécessitera de développer une nouvelle logistique. Un consensus sera donc exigé pour mettre en place ces nouveaux types de don. [1]
L’objectif de ce travail est, d’une part, de décrire les différentes techniques d’aphérèse, ainsi que les avantages et les indications des concentrés plaquettaire d’aphérèse. D’autre part, de rapporter l’expérience du CTS de l’Hôpital Militaires d’Instruction Mohammed V de Rabat, durant une période de 8ans, concernant le don de plaquettes par cette technique.
Première Partie
I. LA MEGACARYOPOÏESE
La mégacaryopoïèse est l’ensemble de phénomènes physiologiques qui aboutissent à la formation de la plaquette et sa régulation. Elle débute quand la cellule pluripotente se détermine en progéniteur mégacaryocytaire, à forte capacité de prolifération, capable de donner des colonies de mégacaryocytes in vitro.
Trois étapes majeures, en partie impliquées, la prolifération puis succession d’endomitoses ou endoduplications du noyau sans division cellulaire, et finalement différenciation progressive par maturation cytoplasmique, les mégacaryocytes (MK) dont sont issues les plaquettes, sont originaires de la moelle osseuse (MO), elles sont en nombre très faible 0,02 - 0, 05% du total des cellules nucléées de la MO. La succession d’endomitoses aboutit à la production des cellules de grande taille jusqu’à 100 -120 µm de diamètre sur frottis de MO. En fin de maturation, le cytoplasme des MK se fragmente en plaquettes (1000-2000 / MK).Le taux des plaquettes sanguines reste constant chez un même individu suite à un mécanisme de régulation particulier faisant intervenir différents facteurs de croissance. (Valeurs normales entre 150 – 400 G / litre).
[5, 6, 7]
1. Compartiment des progéniteurs
Les progéniteurs sont localisés essentiellement dans la MO chez l’adulte, leur nombre est très faible et ne peuvent être étudiés que par des techniques de culture in vitro, puis par la recherche de marqueurs spécifiques. Le compartiment des progéniteurs où se déroule la prolifération à partir d’un progéniteur pluripotent, se différencient en BFU-E / MK qui est un progéniteur
bipotent, commun aux lignées mégacaryocytaire et érythroblastique, sous l’influence de SCF (Stem Cell Factor) et de TPO (Thrombopoiètine). Le compartiment des progénéteur est représenté par BFU-MK et CFU-MK : [5, 6, 7, 8]
BFU-MK ou progéniteur mégacaryopoïèse précoce , c’est une cellule
diploïde, non reconnaissables morphologiquement, mise en évidence en culture in vitro sur milieu semi solide (agar, méthyle-cellulose), en présence de facteurs stimulants ou nutritifs, par sa capacité à donner des colonies de plus de 50 cellules en 21 jours, ils exprime les marqueurs CD34+ HLA DR- CD38-, Gp IIb +.
CFU-MK ou progéniteur mégacaryocytaire tardif, leurs colonies sont
de petites tailles (15-30 cellules en 12 jours), exprimant les marqueurs CD34+ HLA DR+, CD38 ±, et Gp IIb+. [9]
2. Endomitoses
Après l’arrêt de la prolifération, la ploïdisation augmente (2N 128N), les divisions nucléaires sans division cellulaire donnent naissance à des cellules de grande taille, Le noyau grandit de plus en plus, devient contourné et sa chromatine se densifie. La maturation cytoplasmique débute au stade 2N mais ne devient importante qu’après l’arrêt des endomitoses, en suite apparaîtront successivement des protéines, des lysosomes, des granules, des membranes internes. Cette étape s’interpénètre avec l’étape de différenciation. [6,9, 10]
3. Compartiment de différenciation ou de maturation
Le Promégacaryoblaste est une cellule transitionnelle issue des CFU-MK, sa capacité proliférative est très réduite ou nulle, représente environ 10% de l’ensemble des MK, morphologiquement non identifiable, c’est une petite cellule d’apparence lymphoïde. Le niveau de ploïdie est faible 2N à 4N. [5 ,6]
C’est à ce stade que les endomitoses vont débuter, générant des cellules de ploïdie pouvant atteindre 128 N (majorité de cellules à 8N, 16 N et 32N). Il contient de la PPO. Apparaissent également diverses protéines parmi eux le facteur von Willebrand, le facteur 4 plaquettaire, GP IIb-IIIa (CD41), GP Ib (CD42).
A la fin des endomitoses la différenciation cytoplasmique débute et apparaissent les divers mégacaryocytes reconnaissables morphologiquement.
Le Mégacaryoblaste ou MK stade I, est reconnaissable morphologiquement, sa ploïdie augmente (8 N) et débute la maturation cytoplasmique, sur un étalement de MO au MGG, il mesure 20 à 30 µm de diamètre, avec un rapport nucleo-cytoplasmique élevé, un noyau rond (souvent d’aspect bilobé), une chromatine fine et un cytoplasme très basophile sans granulations. On constate une poursuite des endomitoses.
Au stade du Mégacaryocyte basophile ou MK stade II ou promégacaryocyte, la ploïdie atteint son maximum et la synthèse d’ADN cesse (la majorité des MK a une ploïdie de 16N), son noyau commence à se lobuler et la quantité de cytoplasme augmente, le rapport nucléo-cytoplasmique diminue, le cytoplasme abondant reste basophile et quelques granulations apparaissent (40 à 80 µm de diamètre). [5, 7]
Au stade du Mégacaryocyte granuleux ou MK stade III, les organelles plaquettaires et le système de membranes de démarcation délimitant des territoires plaquettaires commencent à s’organiser, sur un étalement de MO au MGG, on distingue de grandes cellules (50 à 100 µm de diamètre), le rapport N/C diminue, le noyau devient multilobé et la chromatine plus dense, le cytoplasme perd une partie de sa basophilie, devenant acidophile et riche en granulations.
Au stade du Mégacaryocyte mature ou MK stade IV ou plaquettogène ou encore thrombocytogène, les granulations se regroupent en petits paquets dans le cytoplasme, ébauches des futures plaquettes.
La Morphologie au MGG montre des cellules de taille variable (50 à 120 µm de diamètre) en fonction du cytoplasme restant, noyau multilobé, dense, pycnotique et le cytoplasme dont la teinte évoque celle des plaquettes. La libération des plaquettes à partir du mégacaryocyte mature se réalise essentiellement par émission de pseudopodes (longs prolongements cytoplasmiques ou platelet processes) qui traversent la paroi des sinusoïdes de la moelle osseuse et se fragmentent dans la lumière de ces derniers sous la forme de plaquettes. D’autres hypothèses sont proposées, soit un passage des MK à travers la paroi des sinusoïdes, puis migration et arrêt au niveau des capillaires pulmonaires où ils se rompent, ou même une rupture des MK dans l’environnement médullaire lui-même. La durée totale de maturation est de 8 jours.
II. LES PLAQUETTES SANGUINES
La plaquette sanguine est le plus petit élément figuré du sang issue de la plus grande cellule médullaire, c’est une cellule anucléée discoïde provenant de la fragmentation du cytoplasme des mégacaryocytes, chaque mégacaryocyte produit 1000 à 2000 plaquettes. Les plaquettes sanguines sont distribuées principalement dans le compartiment sanguin, la numération plaquettaire normale est de 150 – 400 G/L, constante tout au long de la vie. Par ailleurs environ 30% de la masse plaquettaire de l’organisme est séquestrée de manière réversible dans la rate.
Leur durée de vie est de 7 à 8 jours, et à l’état normal, les plaquettes vieillies sont éliminées par les macrophages du système des phagocytes mononuclées de la moelle osseuse, de la rate et du foie. Leur structure et leur contenu conditionnent leur efficacité, comme le montrent à la fois leurs déficits quantitatifs et qualitatifs.
1. Morphologie des plaquettes sanguines
Sur un étalement sanguin coloré au MGG, ce sont les cellules les plus petites des éléments figurés du sang, elles sont hétérogènes en taille et en forme, souvent arrondis ou ovalaires, de 2 à 3 µm de diamètre, leur cytoplasme est clair, légèrement basophile, et contient des granulations azurophiles. A partir d’un échantillon de sang prélevé sur tube contenant un anticagulant (EDTA ou citrate) on observe souvent les granulations regroupées en position centrale (granulomère) et un liseré clair périphérique agranulaire (le hyalomère).
A l’état normal, il existe un certain degré d’anisocytose, mieux reflété par la mesure du volume de chaque plaquette et leur graphe de distribution (proposé par de nombreux automates c’est l’Index de distribution des plaquettes ou IDP). La majorité des plaquettes ont un volume compris entre 2 et 20 fl, définissant un Volume Moyen Plaquettaire (VMP) normal de 7 à 10 fl.
En contraste de phase elles apparaissent discoïdes, émettent des prolongements et s’étalent après contact avec le verre (prélèvement citraté). La morphologie des plaquettes se modifie lorsqu’elles sont activées, elles deviennent sphériques, émettent des pseudopodes et les granules se centralisent. En microscope électronique elles apparaissent également discoïdes, on peut en outre distinguer les différents composants de la plaquette, les divers types de granulations, le système membranaire connecté à la surface (système canaliculaire) apparaissant sous forme de vésicules intra cytoplasmiques, les tubules, les lysosomes, les grains de glycogène, et les mitochondries.
Schéma N° 1 : Représentation schématique d’une plaquette sanguine vue au Microscope Electronique
2. Structure et anatomie fonctionnelle des plaquettes 2.1. Le cytosquelette
Il regroupe les divers composants structuraux de la plaquette, un faisceau de 8 à 24 microtubules (tubuline) en périphérie interne de la plaquette, permettant de maintenir la structure discoïde de la plaquette au repos (désassemblage lors de l’activation), un réseau de microfilaments d’actine, des filaments intermédiaires de vimentine. [8, 9 ,10]
2.2. La membrane plaquettaire
La membrane plaquettaire présente la structure trilaminaire classique, avec deux feuillets lipidiques externe et interne de composition différente, maintenant une couche riche en glycoprotéines. Outre la membrane « externe », il existe un système canaliculaire connecté à la surface. La membrane comprend des protéines (60% du total membranaire), et des lipides (15%), qui sont constitués essentiellement de phospholipides, de phosphatidylcholine (PC) et de phingomyéline (SM), qui sont majoritairement situés dans le feuillet externe, tandis que les phosphatidyléthanolamine (PE), les phosphatidylsérine (PS) et les phosphatidylinositol (PI) sont majoritaires dans le feuillet interne. [8, 9 ,10]
2.3. Les protéines de la membrane plaquettaire
Les glycoprotéines (GP) permettent l’adhésion des plaquettes à la matrice extracellulaire, intervenant lors de l’activation, et l’agrégation des PLT entre elles. Plus de 40 molécules protéiques ont été identifiées à la surface plaquettaire, dont les complexes Ib-IX et IIb-IIIa sont les représentants majeurs.
La GP Ib (CD42b) interagit avec la GP IX en formant un complexe qui fixe le facteur de von Willebrand (vWF) collé au sous endothélium, aboutissant à l’adhésion stable de la plaquette. La GP Ib constitue également un site de fixation pour la thrombine et la GP V formera des liaisons covalentes avec le complexe Ib-IX. La formation du complexe Ib-IX-vWF active l’actine binding protein, permettant la polymérisation de l’actine.
Les GP IIb (CD41) et GP IIIa (CD61) forment le complexe majeur (CD41a) de la membrane plaquettaire, leur structure de base requiert du calcium, Elles peuvent se lier au fibrinogène, mais aussi au facteur de von Willebrand et à d’autres molécules (fibronectine, thrombospondine). Le GP IIb-IIIa est le support des allo-Ag HP A-1, HPA-4 et HPA-3, et le complexe IIb-IIb-IIIa participe au transport du fibrinogène vers les granules alpha.
La GP Ia (CD49b) est le récepteur pour le collagène, il intervient à la phase initiale de l’adhésion au sous endothélium. La GP IIa (CD29) qui forme un complexe avec GP Ic (CD49e) et est le récepteur pour la fibronectine. La GP IIa constitue avec GP Id (CD49f) le récepteur de la laminine.
La GP IV (CD36 ou GP IIIb), est un récepteur du collagène et la thrombospondine. Le tableau 1 résume les principales protéines de la membrane plaquettaire.
Tableau N°1 : Principales protéines de la membrane plaquettaire, classées en fonction de leur ligand
Principales protéines de la membrane plaquettaire, classées en fonction de leur ligand
Ligand principal Protéine Autres dénominations
collagène intégrine α2β1 CD49b collagène GP VI GMP 140, PADGEM collagène (thrombospondine) GP IV CD36 fibronectine intégrine α5β1 CD49e laminine intégrine α6β1 CD49f fibrinogène (vWF) Intégrine αIIbβ3 GP IIb-IIIa (CD41 + CD61= CD41b ) facteur von Willebrand
(thrombine)
GP Ib-IX-V CD42a, b, c
thrombine PAR récepteurs couplés à la prot. G
2.4. Les granules
Lors de l’activation plaquettaire, ces granulations vont s’unir à la membrane externe ou celle du système connecté en surface, leur contenu se déverse à l’extérieur par exocytose. Outre ces quatre types de granules, la plaquette contient quelques petites mitochondries, des vésicules crénelées et de petits amas de glycogène. Le tableau N°2 résume le contenu, la structure et le rôle des différentes granules. [10, 11,12]
Tableau N°2: Les principales granules plaquettaires
granules Structure Rôle
granules ovalaires 0,3-0,5 diamètre de µm, d’aspect grisé, avec des structures tubulaires, et présence de nucléoïde (8-10 /PLT).
Réservoir du thromboglobuline, facteur IV plaquettaire, vWF, fibrinogéne, IgG, libérés lors de l’activation du PLT.
Granules denses Ovales ou arrondies, mesurant 0,2 à 0,3 µm de Ils sont au nombre de 4 à 5 par PLT. denses aux électrons .ils contient l’ATP, Ca++, et sérotonine.
Lors de l’activation des plaquettes, l’ATP est hydrolysé, permettant la polymérisation de l’actine.
Lysosome Arrondies, 0,2 µm de diamètre, contenant
hydrolases acides,
phosphatase acide cathepsine D, collagénase, proélastase.
l’initiation de la lyse des thrombi, rôle dans la fibrinolyse.
Microperoxyso mes
Ce sont des microgranules contenant de la catalase.
leur fonction précise est inconnue.
3. Fonctions des plaquettes 3.1 Rôle dans l’hémostase
Hémostase primaire
Les interactions entre la paroi vasculaire lésée et les plaquettes, puis entre les plaquettes elles même, puis entre les plaquettes et les facteurs de coagulation mettent en jeu les divers composants de la plaquette. [9, 13]
Coagulation plasmatique
La redistribution en surface des phospholipides anioniques de la partie interne de la membrane de la PLT sert de base à l’activation de facteurs de coagulation (Va et Xa), ce qui débute la génération de thrombine. [9, 13]
Fibrinolyse
Plus limité, et cette fonction étant plus en rapport avec les cellules endothéliales.
3.2 Autres fonctions
Inflammation
Les plaquettes peuvent majorer la réaction inflammatoire par la sécrétion de facteurs de perméabilité vasculaire, leur aptitude à promouvoir le chimiotactisme des polynucléaires neutrophiles (P-sélectine), et par la synthèse des prostaglandines. [9, 14]
Immunologique
Les plaquettes ont à leur surface un récepteur pour les immunoglobines E (IgE). Elles peuvent être activées par les complexes antigène-Anticorps. [9]
Action sur la paroi vasculaire
Les plaquettes sécrètent le PDGF, stimulant de la prolifération des fibres musculaires lisses. [9]
Deuxième Partie
I. HISTORIQUE
L’aphérèse est un mot d’origine Grecque qui signifie « pour emporter de ». En Transfusion sanguine c’est une technique d’intervention sur le sang, dont le champ d’application recouvre tout autant le don du sang, les prélèvements thérapeutiques des cellules et /ou de substance circulantes, et le domaine de thérapie cellulaire.
Le don d’aphérèse permet d’obtenir, à partir d’un seul donneur à l’aide d’un séparateur, un ou plusieurs produits prêts à être étiquetés, stockés et distribués (plaquettes, plasma, globule rouge). Cela permet de prélever, de séparer, de déleucocyter en même temps. Toutes ces phases qui étaient chronologiques deviennent donc contemporaines.
L’histoire de l’aphérèse a commencé avec la médecine antique et la pratique des saignées. Elle a été citée dans l’histoire égyptienne et grecque soutenue par la superstition, la croyance religieuse et la théorie humorale, mais elle n’a connu un réel développement qu’au cours du 20éme
siècle avec une avancée flamboyante au cours du 21éme siècle grâce à l’avènement de nouvelles procédures sophistiquées. [15]
Au vingtième siècle, le progrès technologique et la recherche médicale ont permis la collecte du sang et la séparation de ses différents composants, ce qui a donné naissance à une thérapie appelée Hémaphérèse ou Aphérèse.
La première application d’un échange plasmatique a été réalisée en 1914 sur un modèle animal en séparant le plasma urémique du sang entière de chiens par centrifugation.
Au cours de la deuxième guerre mondiale, les blessés militaires ont eu besoin de plasma, Edwin Cohn a adapté le séparateur, au lavage pour séparer le plasma du sang entier satisfaisant ce besoin.
Dans les années 1950, l’aphérèse a été faite la plupart du temps par procédés manuels à flux discontinu, le sang entier étant tiré du donneur dans une première étape, le plasma est stocké et les cellules rouges du sang sont réinjectées au donneur secondairement.
Au début des années 1960, la nouvelle technologie médicale a permis le développement des machines à débit continu de l’hémaphérèse, rendant possible la séparation des composants du sang et le retour des cellules rouges dans un système. [16]
A partir des années 1970, les transfusions sélectives commencent à apparaître, qui apportent au malade uniquement l’élément du sang dont il a besoin. Les poches en plastique remplacent les flacons en verre, les séparateurs de cellules rendent possible les plasmaphérèses et les cytaphérèse, et les progrès du fractionnement permettent la préparation de protéines du plasma, l’albumine, les facteurs de coagulation, et les immunoglobulines. [17]
Vers la fin du vingtième siècle, les compagnies Cobe, Fenwal, Fresenius, Haemonetics, Therakos et autres firmes développent des machines sophistiquées qui ont révolutionné l’industrie.
II. EVOLUTION TECHNOLOGIE D’APHERESE
Les premiers séparateurs de cellules opérationnels sont apparus dans les années 1970–1975, bien que ce concept ait été décrit avant 1970. Au départ, ils étaient destinés à épurer des globules blancs en excès, puis à recueillir des granulocytes à l’aide de bols réutilisables. L’intérêt de l’utilisation de ces machines s’est ensuite focalisé sur le recueil des plaquettes avec un dispositif à usage unique, à cette époque, le produit était contaminé en globules blancs et en globules rouges.
La première évolution technologique s’est faite dans le sens d’une purification du produit : produit désérythrocyté, partiellement déleucocyté.
Une deuxième évolution a été caractérisée par la poursuite de la purification, la déleucocytation et l’augmentation du rendement grâce à l’introduction de logiciels avec une programmation qui étaient, soit les prédicteurs de rendement, soit pilotant directement les paramètres de la procédure.
La dernière évolution avait comme objectif une réduction du volume extracorporel, avec une augmentation du rendement grâce à des dispositifs de contrôle d’interface performants, et une connexion informatique permettant de recueillir les données de la procédure, une modification du dispositif dans le sens d’une plus grande sécurisation, en ajoutant une poche d’échantillonnage généralisés sur tous les dispositifs, avec un protecteur d’aiguille et l’amélioration des techniques de déleucocytation. [2, 18 ,19]
III. LES DIFFERENTES TECHNIQUES DE SEPARATIONS
Trois techniques sont actuellement couramment utilisées, il s'agit de séparateurs de cellules, dont le principe est basé sur la centrifugation à flux discontinu ou continu, ou encore les reins capillaires qui utilisent la filtration comme principe de séparation. [18]
Ces techniques permettant d’obtenir des produits purifiés adaptés aux indications transfusionnelles spécifiques (plaquettes, plasma, globule rouge), ces produits ont des caractéristiques précises liées à une standardisation des procédures, et surtout, le sang anti-coagulé à base de citrate dès le prélèvement, en respectant un ratio fixe (1/9 à1/12). Les moniteurs de séparation possèdent une partie de centrifugation où existe une cavité avec le moteur de centrifugation, une partie verticale avec un écran de contrôle (souvent tactile) et de programmation, une partie plus ou moins horizontale où se trouvent des pompes péristaltiques assurant la partie opérationnelle de la procédure, suivant le type de séparateurs, on aura 2 à 6 pompes (voir schémas N° 3).[4, 22 ,23]
Le séparateur fonctionne avec un dispositif médical à usage unique (DMU) spécifique qui est « captif ». La procédure est l’application d’un programme de préparation à un DMU solidarisé, et comporte le bol de centrifugation, les tubulures, les aiguilles, les poches, les filtres, et les solutés connectables (sérum physiologique, l’anticoagulant)
La procédure correspond à un don qui génère un produit suivant le type de programmation et de séparateur, elle procède par étapes, en vérifiant que le séparateur de cellules est qualifié, la mise en place du DMU et solutés de NaCl et d’un anticoagulant le plus souvent l’ACD Formule A, après vérification de
son intégrité, puis la mise en route des tests de sécurité sur le DMU, la connexion du donneur et prise d’échantillons, déroulement de la procédure et finalement déconnexion du donneur.[4, 24, 25]
On distingue deux types de séparateurs, une catégorie utilisant la centrifugation et l’autre le filtre pour la séparation.
1-Séparateur de cellules par centrifugation 1.1. Séparateurs à flux discontinue
Il s’agit de la plus ancienne technique utilisée, traitant le sang total de façon séquentielle. Elle présente l’avantage de ne nécessiter qu’un accès veineux, et l’inconvénient du volume extracorporel qui est élevé, de l’ordre de 400 à 800 ml, parfois mal toléré au point de vue hémodynamique. Le débit de pompe de circulation extracorporelle idéalement de100 ml/min dirige le sang total vers un bol de centrifugation tournant entre 1400 et 4800 tr/min. La force de gravité peut atteindre 1300 G à la rotation maximale. Cette technique présente l’inconvénient de demander un temps de 20% supérieur aux autres techniques. [2,23, 27]
Ces séparateurs sont d’usage simple, pratiques, légers, et faible encombrement, le fractionnement du sang total est réalisé dans un bol de centrifugation (dispositif médical à usage unique DMU) par des cycles répétitifs. Chacun de ces cycles va être composé de trois phases:
Phase de remplissage du bol
Le bol a un volume variable selon son usage, soit pédiatrique (155 ml) ou adulte (250 ml). Il est à noter, cependant, l’apparition de bols de centrifugation à volume variable. Pendant le remplissage, le sang est centrifugé, on observe la séparation des différents éléments constitutifs du sang. On notera la présence d’un capteur de pression qui vérifie que le débit de prélèvement n’est pas trop élevé ni trop faible. Il vérifie également qu’il n’y a pas d’anomalies, de débit des veines ou des tubulures du DMU. Les capteurs optiques D1 à ultrasons vérifient l’absence de bulles d’air dans le sang total prélevé. S’il apparait une bulle d’air,
le système est interrompu. Le capteur optique D2 détecte la fin du remplissage du bol. Cette phase du cycle est alors terminée. [2,24 ,26]
Fig. N°3 : Bol de centrifugation à flux discontinu. Appareil HaemoneticsTM.
Phase de prélèvement
Le plasma est le premier à sortir du bol, suivi du Buffy Coat qui est un mélange de leucocytes et de plaquettes, puis des érythrocytes. Les différentes parties du sang sont séparés grâce à un capteur optique D3. Celui-ci permet le
routage des différents constituants dans les poches appropriées, Les constituants à réinjecter au donneur sont stockés dans une poche (à l’avant de l’automate sur l’Image N°6), et sont pesés. Les plaquettes sont stockées dans des poches de 200 ml. Lorsque le bol est vide, cette phase du cycle est terminée. [2, 27, 28]
Phase de réinjection des autres composants au donneur
Les capteurs optiques D1 vérifient l’absence de bulles d’air. Si ces capteurs observent la présence de bulles d’air, le mécanisme de réinjection est interrompu. En effet, les bulles d’air sont très dangereuses pour le donneur. Le capteur de pression vérifie que le débit de réinjection n’est pas trop élevé pour les veines du donneur. [2, 27, 29]
Détecteur Optique D1 Détecteur de pression Anticoagulant Pompes Détecteur à galets optique D3 Détecteur Optique D2 Bol de Centrifugation Prélévement Réinjection
Schéma N° 2 : Système de séparation par centrifugation à flux discontinu Donneur
Substitut
ACD
CPA CPA
Image N°1: automate MCS3p de séparation par centrifugation à flux discontinu (Haemonetics)
Emplacement Du bol Peson Poche de constituant à réinjecter Poche de constituant à Retirer au donneur Pompes à galets Anticoagulant Capteurs D1
Sang total entrant Dans le circuit Extracorporel
![Le concept de typage génique_ des spermatozoïdes a été propose en 1 988 par l'équipe de N. Arnheim [ 1 ] . Il repose sur l 'analyse directe du contenu génétique des spermato](data:image/gif;base64,R0lGODlhAQABAIAAAP///wAAACH5BAEAAAAALAAAAAABAAEAAAICRAEAOw==)