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Unité. Objectif. travail. B : Stations de. laser

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Academic year: 2022

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Procédures et réservations

Les réservations débutent le vendredi à 11h pour les réservations de la semaine suivante.

Pour les réservations provenant des utilisateurs à l'extérieur du site HDQ ... ceux-ci doivent communiquer avec l'adjointe aux opérations par courriel ou téléphone afin de vérifier les disponibilités du système souhaité et de procéder à sa réservation (anne.loranger@crchudequebec.ulaval.ca).

(voir ci-après : Avis aux utilisateurs de l’unité d’imagerie cellulaire: procédures inhérentes à un fonctionnement optimal)

Systèmes et champs d’applications

Confocal à balayage FV1000 (Olympus)

Acquisition d’images 3D, 4D pour spécimens fixés ou vivants, FRAP.

Modes d’acquisition: DIC et épifluorescence.

Tarif de formation et d’aide technique : 45$/h Tarif d’utilisation : 15$/h

Microscope inversé semi-motorisé, lasers Argon (457/488/515 nm) et diodes (405/559/633 nm), 4 détecteurs, unité FLIM de synchronisation, chambre environnementale.

(3)

             

             

                 

   

Confocal à disque rotatif

ULTRAVIEW ERS (PerkinElmer)

Acquisition d’images 4D pour spécimens vivants.

Modes d’acquisition: contraste de phase (ou Zernicke), DIC et épifluorescence.

Tarif de formation et d’aide technique : 45$/h Tarif d’utilisation : 15$/h

Microscope inversé automatisé, laser Krypton-Argon (Ex 488/568/647 nm), caméra Hamamatsu EMCCD, chambre environnementale. Logiciel d’acquisition : Volocity.

Confocal à balayage MRC1024 (Bio-Rad)

Acquisition d’images 3D pour spécimens fixés.

Modes d’acquisition: contraste de phase (ou Zernicke) et épifluorescence.

Tarif de formation et d’aide technique : 45$/h Tarif d’utilisation : 15$/h

Microscope inversé semi-automatisé, laser Krypton-Argon (Ex 488/568/647 nm), 2 photomultiplicateurs.

(4)

   

Microscopie séquentielle TE2000 (Nikon)

Acquisition d’images 4D pour spécimens vivants (temps réel sur des périodes de 24 h et plus).

Modes d’acquisition: contraste de phase (ou Zernicke) et épifluorescence.

Tarif de formation et d’aide technique : 45$/h Tarif d’utilisation : <24h 8$/h; >24h 5$/h

Microscope inversé motorisé, lampes halogène et mercure, caméra Photometrics CCD Coolsnap HQ monochrome, chambre environnementale.

Microscopie H-TIRF (Nikon)

Acquisition d’images pour spécimens vivants et fixés.

Modes d’acquisition: contraste interférentiel (SRIC), épifluorescence et réflexion totale interne (TIRF).

Tarif de formation et d’aide technique : 45$/h Tarif d’utilisation : 15$/h

Microscope inversé motorisé, diodes (405/488/561/635 nm), autoalignement, module Ti-LAPP, caméra Andor iXon Ultra897, chambre environnementale.

(5)

                               

1- L'assistant dédié à l'Unité (Carl St-Pierre, technologue) ou l’adjointe aux opérations (Anne Loranger, PhD) doivent être consulté pour:

 

Toute utilisation de l’instrumentation par les nouveaux utilisateurs;

Une formation d’initiation obligatoire avant la première utilisation d’un équipement ;

Tout ajustement ou toute mise en fonction d’un équipement;

La mise en place d’un appareil ou d’une pièce d’équipement (objectifs, filtres…) ;

En l’absence de l’assistant, évitez toute tentative ou initiative et consultez l'adjointe aux opérations de l’Unité afin d’établir la meilleure alternative.

 

«Avis aux utilisateurs de l'Unité d'imagerie cellulaire.

 

Procédures inhérentes à un fonctionnement optimal.»

Système de microinjection

: pour cellules adhérentes. (Microscope inversé, micromanipulateur et microinjecteur Eppendorf, moteur en Z, caméra Photometrics CCD Coolsnap HQ monochrome, chambre environnementale)

Tarif de formation : 45$/h. Tarif d’utilisation : 8$/h.

Système droit d’imagerie digitalisée

: acquisitions d’images 2D pour spécimens fixés en mode fond clair, fond noir, contraste de phase, DIC et/ou épifluorescence.

Tarif de formation : 45$/h. Tarif d’utilisation : 8$/h.

Microscopes droit et inversé de routine

: acquisition digitalisée d’images en mode fond clair, contraste de phase et épifluorescence.

Tarif de formation : 45$/h. Tarif d’utilisation : 8$/h.

Préparation des spécimens

: cryostat, microtome, vibratome et binoculaire.

Tarif d’utilisation : 5$/h.

Stations de travail

: Ordinateurs pour le traitement et l’analyse d’images 4D, la déconvolution et la reconstruction 3D (Metamorph, Volocity, Autoquant)

Tarif de formation : 45$/h. Tarif d’utilisation : 8$/h.

(6)

2‐  Afin  de préserver  la  haute  performance des systèmes,  le  moindre  bris  des  appareils  doit  être  signalé  immédiatement  à  l'assistant  ou  à  l’adjointe. 

3‐  Avant  de  commencer  un  protocole,  assurez‐vous  auprès  de  l'assistant  ou de l’adjointe que les systèmes sont disponibles et que vous respectez  en tout point leur vocation respective. 

4‐  Les  feuilles  de  réservation  sont  affichées  le  vendredi  à  11h  pour  les  réservations  de  la  semaine  suivante.  Seule  l'inscription  de  votre  nom  sur  ces  feuilles  vous  permet  d'obtenir  le  système  souhaité.  Par  souci  d'équité  entre  tous  les  utilisateurs,  aucun  arrangement  interpersonnel  n'est accepté. 

Pour les réservations provenant des utilisateurs à l'extérieur du CRHDQ  ...  ceux‐ci  doivent  communiquer  avec  l'adjointe  aux  opérations  par  courriel  ou  téléphone  afin  de  vérifier  les  disponibilités  du  système  souhaité et de procéder à sa réservation. 

 

5‐  Afin d’assurer l’équité entre tous les utilisateurs, chaque réservation se  limite à une période de 2 heures consécutives. 

Une plus longue période devra être discutée avec l’assistant ou l’adjointe avant d'être inscrite sur la feuille de réservation.

Assurez-vous que votre nom soit inscrit sur la feuille de réservation, ainsi que les demandes particulières (objectifs, température ...).

En cas d’annulation, informez l'assistant ou l’adjointe et enlevez votre nom immédiatement.

Si un utilisateur ne s’est pas présenté après 15 minutes suivant le début de sa période de réservation et ce, sans en aviser l’assistant ou l’adjointe, sa réservation est annulée et donnée à un autre utilisateur.

6- Pour toute utilisation le soir ou la fin de semaine, avisez l'assistant ou

l’adjointe afin que les systèmes soient préparés en conséquence.

(7)

7- Afin d’éviter une surcharge des disques durs, toutes les données saisies à l’Unité (via les différents systèmes d’acquisition) sont à la charge des laboratoires concernés. Les fichiers sont conservés pour une période maximale d’un mois.

Une exception : le TE2000

Ce système d’acquisition en temps réel générant des banques de données de 15 Go et plus par expérience, il est convenu de transférer immédiatement les données à la fin de l’expérimentation et d’effacer ceux-ci du disque dur.

8- Les normes de sécurité en vigueur pour les laboratoires sont les mêmes pour l’Unité.

 

POLITIQUE DE RÉSERVATION PROPRE AUX MICROTOME et CRYOSTAT

Afin de maximiser le temps d'utilisation de ces appareils, voici quelques consignes à retenir et à respecter :

 

Afin d’assurer l’équité entre tous les utilisateurs, chaque réservation se limitera à une demi-journée par jour par utilisateur.

La réservation du matin débute à 8h et celle de l'après-midi à 13h.

Une plus longue période devra être discutée avec l’assistant ou l’adjointe avant d'être inscrite sur la feuille de réservation.

   

POLITIQUE DE RÉSERVATION PROPRE AUX SYSTÈMES DE TYPE CONFOCAL (MRC1024, FV1000, ULTRAVIEW ERS et TIRF)

Afin de maximiser le temps d’utilisation de ces appareils et de permettre l’équité entre les utilisateurs :

La période quotidienne de réservation débute à 8h00.

À la sortie des feuilles de réservation, soit le vendredi précédant la

semaine à venir, les prises de réservation sont d’un maximum de trois

heures par jour par utilisateur.

(8)

Ces trois heures peuvent être prises en un seul bloc ou fragmentées (ex. 2 heures et 1 heure). Ces blocs doivent être précédés et suivis de périodes de 2 heures.

Lorsque le protocole l’exige et après consultation auprès de l’assistant ou de l’adjointe, un utilisateur peut réserver une période maximale d’une journée complète/semaine en un seul bloc.

La journée précédant votre réservation, si des périodes sont disponibles pour le lendemain, il vous est permis de les réserver dès 16h.

Si toutes les périodes sont réservées, la liste d’attente vous donne priorité si une plage se libère.

Aucun arrangement ou changement interpersonnel n'est accepté.

Prendre note que les priorités de réservation pour ces systèmes sont : MRC1024 … acquisition d’images 3D pour spécimens fixés. FV1000 … les techniques spécialisées exigeant la déconvolution spectrale, l’utilisation du laser 405nm à l’acquisition ou à l’activation pour les techniques de FRAP, de FRET ou de photoactivation/photoconversion. ULTRAVIEW … les protocoles pour cellules vivantes dont la viabilité cellulaire et les processus dynamiques rapides sont un pré-requis.

   

Les images de ce site sont gracieusement fournies par les laboratoires des chercheurs  suivant : Jacques Huot, Marc‐Étienne Huot, Patrick Laprise, Josée Lavoie et Normand 

Marceau. 

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