• Aucun résultat trouvé

Profils d'expression des microARN dans les sarcomes : des données brutes aux applications cliniques

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2021

Partager "Profils d'expression des microARN dans les sarcomes : des données brutes aux applications cliniques"

Copied!
313
0
0

Texte intégral

(1)Profils d’expression des microARN dans les sarcomes : des données brutes aux applications cliniques Daniel Pissaloux. To cite this version: Daniel Pissaloux. Profils d’expression des microARN dans les sarcomes : des données brutes aux applications cliniques. Médecine humaine et pathologie. Université Claude Bernard - Lyon I, 2012. Français. �NNT : 2012LYO10323�. �tel-00997015�. HAL Id: tel-00997015 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00997015 Submitted on 27 May 2014. HAL is a multi-disciplinary open access archive for the deposit and dissemination of scientific research documents, whether they are published or not. The documents may come from teaching and research institutions in France or abroad, or from public or private research centers.. L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destinée au dépôt et à la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, émanant des établissements d’enseignement et de recherche français ou étrangers, des laboratoires publics ou privés..

(2) ȱ. ȱȱ N°ȱd’ordreȱ:ȱ323ȱ–ȱ2012ȱ. ȱ. ȱ. ȱ. ȱ. ȱ. ȱ. ȱ ȱ. ȱ ȱ. ȱ. Annéeȱ2012ȱ. ȱ ȱ. THÈSEȱDEȱL’UNIVERSITÉȱDEȱLYONȱ ȱ Délivréeȱparȱ. ȱ L’UNIVERSITÉȱCLAUDEȱBERNARDȱLYONȱ1ȱ ȱ ECOLEȱDOCTORALEȱ BIOLOGIEȱMOLÉCULAIREȱINTÉGRATIVEȱETȱCELLULAIREȱ ȱ DIPLÔMEȱDEȱDOCTORATȱ (arrêtéȱduȱ7ȱaoûtȱ2006)ȱ ȱ Disciplineȱ:ȱcancérologieȱ soutenueȱpubliquementȱleȱ18ȱdécembreȱ2012ȱparȱ. ȱ M.ȱDanielȱPISSALOUXȱ ȱ ȱ TITREȱ:ȱ ȱ. Profilsȱd’expressionȱdesȱmicroARNȱdansȱlesȱsarcomesȱ:ȱ desȱdonnéesȱbrutesȱauxȱapplicationsȱcliniquesȱ ȱ ȱ DirecteurȱdeȱThèseȱ:ȱPrȱJeanȬYvesȱBLAYȱ CodirecteurȱdeȱThèseȱ:ȱDrȱLaurentȱALBERTIȱ ȱ ȱ. ȱ. ȱ. ȱ. JURYȱ:ȱȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ. ȱ M.ȱBernardȱASSELAINȱ ȱ M.ȱJeanȬMichelȱCOINDREȱ M.ȱMichelȱRIVOIREȱ ȱȱ ȱ M.ȱLaurentȱALBERTIȱȱ ȱ M.ȱJeanȬYvesȱBLAYȱ ȱ ȱ M.ȱSébastienȱSALASȱȱ ȱ ȱ. Rapporteurȱ Rapporteurȱ Présidentȱ Examinateurȱ Examinateurȱ Examinateurȱ.

(3) REMERCIEMENTSȱ ȱ•Ȃ’œœžŽȱŽȱŒŽœȱŠ——·ŽœȱŽȱ‘¸œŽǰȱŸ˜’Œ’ȱŸŽ—žȱ•Žȱ–˜–Ž—ȱŽȱ›Ž–Ž›Œ’Ž›ȱ˜žŽœȱ•Žœȱ ™Ž›œ˜——Žœȱšž’ȱ–Ȃ˜—ȱŽ—˜ž›·ȱŽȱŠ’·ȱ¥ȱ–Ž—Ž›ȱ¥ȱ‹’Ž—ȱŒŽȱ™›˜“ŽǯȱŠȱ•’œŽȱŽœȱ•˜—žŽǰȱ–Š’œȱ “ŽȱŸ˜ž›Š’œȱ–ȂŠŠŒ‘Ž›ȱ¥ȱ—Ȃ˜ž‹•’Ž›ȱ™Ž›œ˜——Žǯȱ ȱŽœȱ™›Ž–’Ž›œȱ›Ž–Ž›Œ’Ž–Ž—œȱŸ˜—ȱ˜žȱ—Šž›Ž••Ž–Ž—ȱ¥ȱ–˜—ȱ’›ŽŒŽž›ȱŽȱ‘¸œŽǰȱ •Žȱ›˜ŽœœŽž›ȱ

(4) ŽŠ—ȬŸŽœȱ•Š¢ǰȱ™˜ž›ȱ–ȂŠŸ˜’›ȱ˜žȱȂŠ‹˜›ȱŽ—Œ˜ž›Š·ȱ¥ȱŽ—›Ž™›Ž—›ŽȱŒŽȱ ›ŠŸŠ’•ȱŽȱ‘¸œŽǰȱ–Š’œȱ·Š•Ž–Ž—ȱ™˜ž›ȱœ˜—ȱ·Œ˜žŽȱŽȱœŽœȱŒ˜—œŽ’•œȱŠŸ’œ·œȱ™Ž—Š—ȱ˜žŽœȱ ŒŽœȱŠ——·Žœǯȱ

(5) Žȱ—Žȱ•Žȱ›Ž–Ž›Œ’Ž›Š’ȱ“Š–Š’œȱŠœœŽ£ȱ™˜ž›ȱ•Žȱ¢—Š–’œ–ŽȱŽȱ•Šȱ–˜’ŸŠ’˜—ȱšžȂ’•ȱ Šȱœžȱ–Žȱ›Š—œ–Ž›Žǯȱ

(6) Žȱ ›Ž–Ž›Œ’Žȱ Ÿ’ŸŽ–Ž—ȱ –˜—ȱ Œ˜’›ŽŒŽž›ȱ Žȱ ‘¸œŽǰȱ •Žȱ ˜ŒŽž›ȱ Šž›Ž—ȱ •‹Ž›’ǰȱ ™˜ž›ȱ–ȂŠŸ˜’›ȱŠŒŒžŽ’••’ȱŠžȱœŽ’—ȱŽȱœ˜—ȱ•Š‹˜›Š˜’›ŽǰȱŠŸŠ—ȱ–¹–ŽȱšžŽȱ“Žȱ—ŽȱŒ˜––Ž—ŒŽȱŒŽȱ ›ŠŸŠ’•ȱ Žȱ ‘¸œŽǯȱ Ž›Œ’ȱ ȂŠŸ˜’›ȱ Œ›žȱ Ž—ȱ –˜’ȱ Žȱ Žȱ –ȂŠŸ˜’›ȱ ˜——·ȱ •Ȃ˜™™˜›ž—’·ȱ Žȱ ›ŠŸŠ’••Ž›ȱŠ—œȱž—ȱ›Š—ȱ•Š‹˜›Š˜’›ŽȱŽȱ›ŽŒ‘Ž›Œ‘ŽǯȱŽ›Œ’ȱ·Š•Ž–Ž—ȱŽȱ–ȂŠŸ˜’›ȱ•Š’œœ·ȱ ž—Žȱ ›Š—Žȱ •’‹Ž›·ȱ Ȃ˜›Š—’œŠ’˜—ǰȱ Žȱ ȂŠŸ˜’›ȱ Ž¡Œžœ·ȱ –Žœȱ —˜–‹›ŽžœŽœȱ Š‹œŽ—ŒŽœȱ •˜›œšžŽȱ–˜—ȱ›ŠŸŠ’•ȱŽȱ›˜ž’—Žȱ™›Ž—Š’ȱ•ŽȱŽœœžœǯȱ

(7) Žȱ’Ž—œȱ·Š•Ž–Ž—ȱ¥ȱŠ›ŽœœŽ›ȱ–Žœȱ›Ž–Ž›Œ’Ž–Ž—œȱŠž¡ȱ–Ž–‹›ŽœȱŽȱ–˜—ȱ“ž›¢ȱŽȱ ‘¸œŽȱDZȱ •Žȱ ˜ŒŽž›ȱ Ž›—Š›ȱ œœŽ•Š’—ȱ Žȱ •Žȱ ›˜ŽœœŽž›ȱ

(8) ŽŠ—Ȭ’Œ‘Ž•ȱ ˜’—›Žǰȱ šž’ȱ –Ȃ˜—ȱ Š’ȱ •Ȃ‘˜——Žž›ȱ ȂŠŒŒŽ™Ž›ȱ Žȱ “žŽ›ȱ ŒŽȱ ›ŠŸŠ’•ȱ Ž—ȱ Š—ȱ šžŽȱ ›Š™™˜›Žž›œǰȱ •Žȱ ˜ŒŽž›ȱ ·‹Šœ’Ž—ȱ Š•Šœǰȱ šž’ȱ Šȱ ŠŒŒŽ™·ȱ Ȃ¹›Žȱ Ž¡Š–’—ŠŽž›ȱ Žȱ ŒŽŽȱ ‘¸œŽǰȱ Š’—œ’ȱ šžŽȱ •Žȱ ›˜ŽœœŽž›ȱ’Œ‘Ž•ȱ’Ÿ˜’›Žǰȱšž’ȱŠȱŠŒŒŽ™·ȱŽȱ™›·œ’Ž›ȱŒŽȱ“ž›¢ǯȱ

(9) Žȱ ›Ž–Ž›Œ’Žȱ •Žȱ ›˜ŽœœŽž›ȱ •Š’—ȱ ž’œ’Žž¡ȱ Žȱ –ȂŠŸ˜’›ȱ ŠŒŒžŽ’••’ȱ Šžȱ œŽ’—ȱ Žȱ •Ȃž—’·ȱ –’¡ŽȱȱŽȱȱ›ŽŒ‘Ž›Œ‘Žȱȱ ȱȱŗŖśŘȱȬȱȱȱśŘŞŜǰȱȱŽȱȱ•Žȱȱ˜ŒŽž›ȱȱ‘›’œ˜™‘ŽȱȱŠž¡ǰȱȱŠžȱȱ œŽ’—ȱŽȱ•Ȃ·šž’™Žȱ’‹•ŠŽȱŽȱ•Šȱž–Žž›ȱŽȱŽȱœ˜—ȱ—Ÿ’›˜——Ž–Ž—ȱ ––ž—’Š’›Žǯȱ Žȱ›ŠŸŠ’•ȱŽȱ‘¸œŽȱŠ¢Š—ȱ··ȱ›·Š•’œ·ȱŽ—ȱŠ—ȱšžŽȱœŠ•Š›’·ȱžȱŽ—›Žȱ·˜—ȱ·›Š›ǰȱ “Žȱ ’Ž—œȱ ¥ȱ ›Ž–Ž›Œ’Ž›ȱ •Žȱ ›˜ŽœœŽž›ȱ ¢•Ÿ’Žȱ ·›’Ž›ǰȱ ’›ŽŒŽž›ȱ ·—·›Š•ȱ žȱ Ž—›Žȱ ·˜—ȱ ·›Š›ǰȱŽȱ˜—œ’Žž›ȱ Ž›Ÿ·ȱŠ•·›’Š—ȬŽœœŠŒǰȱ’›ŽŒŽž›ȱŽœȱŽœœ˜ž›ŒŽœȱ ž–Š’—Žœǰȱšž’ȱ –Ȃ˜—ȱ Šž˜›’œ·ȱ ¥ȱ ŽŽŒžŽ›ȱ ŒŽȱ ›ŠŸŠ’•ȱ Žȱ ‘¸œŽȱ Ž—ȱ ™Š›Š••¸•Žȱ ¥ȱ –Žœȱ ˜‹•’Š’˜—œȱ Ȃ —·—’Žž›ȱ’˜•˜’œŽǯȱ

(10) Žȱ œ˜ž‘Š’Žȱ ·Š•Ž–Ž—ȱ ›Ž–Ž›Œ’Ž›ȱ •Žœȱ ˜ŒŽž›œȱ ˜–’—’šžŽȱ Š—Œ‘¸›ŽȬ’—ŒŽȱ Žȱ ——ŽȬŠ•·›’Žȱ ŽŒ˜žŸŽ•ŠŽ›Žǰȱ ™˜ž›ȱ •Žœȱ ›Žœ™˜—œŠ‹’•’·œȱ šž’ȱ –Ȃ˜—ȱ ··ȱ Œ˜—’·Žœȱ Šžȱ œŽ’—ȱ žȱ·™Š›Ž–Ž—ȱŽȱ’˜™Š‘˜•˜’ŽǰȱŽȱ™˜ž›ȱ–ȂŠŸ˜’›ȱœ˜žŽ—žȱ˜žȱŠžȱ•˜—ȱŽȱ–Šȱ‘¸œŽǯȱ Ž›Œ’ȱ ‹ŽŠžŒ˜ž™ȱ ¥ȱ

(11) ŽŠ—Ȭ‘’••’™Žȱ ’Œ‘˜ǰȱ –˜—ȱ ™Š›Ž—Š’›Žȱ Žȱ ˜žœȱ •Žœȱ “˜ž›œǰȱ Žȱ —˜Š––Ž—ȱŽȱ–Žœȱ•˜—žŽœȱœ˜’›·ŽœȱŠžȱŽ—›ŽǰȱŠŸŽŒȱšž’ȱ“Žȱ™›Ž—œȱ˜ž“˜ž›œȱ‹ŽŠžŒ˜ž™ȱ Žȱ™•Š’œ’›ȱ¥ȱ›ŽŠ’›Žȱ•Žȱ–˜—Žǯȱ

(12) ȂŽœ™¸›ŽȱŠŸ˜’›ȱ™žȱȂŠ’Ž›ȱ¥ȱ›Ž–™•’›ȱŽœȱ˜‹“ŽŒ’œȱǷȱ.

(13) ȱ

(14) Žȱ ›Ž–Ž›Œ’Žȱ ˜žȱ ™Š›’Œž•’¸›Ž–Ž—ȱ •ȂŽ—œŽ–‹•Žȱ Žœȱ –Ž–‹›Žœȱ Žœȱ ·šž’™Žœȱ œŠ›Œ˜–ŽœȱŠŸŽŒȱšž’ȱ“ȂŠ’ȱŽžȱ•Ȃ˜ŒŒŠœ’˜—ȱŽȱ›ŠŸŠ’••Ž›ȱDZȱ–Ž›Œ’ȱ¥ȱŠ›’—ŽǰȱŽ•’—Žǰȱ—‘˜—¢ǰȱ. ·•˜ÊœŽǰȱ —·•’šžŽǰȱ ’‹Šǰȱ ·ŸŽ›’—Žǰȱ ‘˜–Šœȱ Žȱ

(15) Ž——’Ž›ȱ ™˜ž›ȱ •Žž›ȱ Š’Žȱ ™›·Œ’ŽžœŽǰȱ Žȱ ˜žœȱ•Žœȱ‹˜—œȱ–˜–Ž—œȱšžŽȱ“ȂŠ’ȱ™žȱ™ŠœœŽ›ȱŽ—ȱ•Žž›ȱŒ˜–™Š—’Žǯȱ ȱ Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ˜žŽœȱ •Žœȱ ™Ž›œ˜——Žœȱ žȱ Ž—›Žȱ Žȱ ȂŠ’••Žž›œǰȱ šž’ȱ ˜—ȱ Œ›˜’œ·ǰȱ ˜žȱ šž’ȱ Œ›˜’œŽ—ȱ›·ž•’¸›Ž–Ž—ȱ–Šȱ›˜žŽǰȱŽȱŠŸŽŒȱšž’ȱ“ȂŠ™™›·Œ’Žȱ‹ŽŠžŒ˜ž™ȱŽȱ›ŠŸŠ’••Ž›ȱDZȱ–Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ›··›’Œȱ Žȱ Šž•’—Žǰȱ ¥ȱ •˜›Ž—ŒŽǰȱ ›··›’šžŽȱ Žȱ ’Šǰȱ Žȱ ¥ȱ Ž—˜Éȱ ™˜ž›ȱ •Žž›œȱ ’——˜–‹›Š‹•Žœȱ Œ˜—œŽ’•œȱ Ž—ȱ Œ¢˜·—·’šžŽȱ –˜•·Œž•Š’›Žǰȱ –Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ž›·•’Žȱ ™˜ž›ȱ œŠȱ Ž—’••ŽœœŽǰȱ œŠȱ ‹˜——Žȱ ‘ž–Žž›ȱ Žȱ œŽœȱ ŒŠ·œȬŒ˜˜”’Žœǰȱ –Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ›Š—³˜’œŽǰȱ •Šȱ ›Ž’—Žȱ žȱ –ž•’¦Œ‘Žǰȱ –Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ’’Ž›ǰȱ •Žȱ –ŠÉ›Žȱ Žœȱ ŸŽŒŽž›œǰȱ Žȱ –Ž›Œ’ȱ ¥ȱ ›’”ȱ ™˜ž›ȱ œ˜—ȱ ŠŒŒžŽ’•ȱ Œ‘Š•Žž›Žž¡ȱ¥ȱ˜Ž›Š–ǯȱ ȱ Ž›Œ’ȱ·Š•Ž–Ž—ȱ¥ȱ˜žœȱ•ŽœȱŒ˜••¸žŽœȱŠŸŽŒȱ•ŽœšžŽ•œȱ“Žȱ›ŠŸŠ’••Žȱšž˜’’Ž——Ž–Ž—ȱ Š—œȱ•Šȱ“˜’ŽȱŽȱ•Šȱ‹˜——Žȱ‘ž–Žž›ȱǷȱŠ›•¸—Žǰȱ ·›Š•’—Žȱǻ¡ŘǼǰȱŠ—›’—Žǰȱž›·•’Žǰȱ•˜’Žǰȱ –Š—’—Žǰȱ ¢›’••Žǰȱ ›—Šžǰȱ ‘›’œ’—Žǰȱ œŠ‹Ž••Žǰȱ Š›’ŽȬŸŽǰȱ ——ŽȬ œŠ‹Ž••Žǰȱ Š•œ˜ž–ǰȱ Š’‘Šǰȱ Š•‘’Šǰȱ ›’’Žǰȱ •Š’›Žǰȱ ·ŸŽ›’—Žǰȱ ‘’Ž››¢ȱ Žȱ ˜žŽȱ •Šȱ ‹Š—Žȱ Žȱ •Šȱ ’˜™Š‘˜•˜’Žǯǯǯȱ ȱ —ȱ›Š—ȱ–Ž›Œ’ȱŠž¡ȱ’·›Ž—œȱ˜›Š—’œ–Žœȱǻ˜—’ŒŠ—Žǰȱǰȱ ȱŽȱ •Žœȱ–’œȱŽȱ•Ȃ—’ŸŽ›œ’·ȱŽȱ¢˜—ǼȱŽȱ¥ȱ•Žž›œȱŠ–’—’œ›ŠŽž›œȱǻŠ›Šǰȱ’–˜—ȱŽȱŠ›’—ŠǼȱ ™˜ž›ȱ•Žž›œȱœ˜ž’Ž—œȱ’—Š—Œ’Ž›œȱ–ȂŠ¢Š—ȱ™Ž›–’œȱŽȱ›·Š•’œŽ›ȱŒŽœȱ›ŠŸŠž¡ǯȱ ȱ

(16) Žȱ’Ž—œȱ¥ȱ›Ž–Ž›Œ’Ž›ȱ–ŠȱŠ–’••ŽȱŽȱ–Šȱ‹Ž••ŽȬŠ–’••Žȱ™˜ž›ȱ•Žž›ȱœ˜ž’Ž—ǯȱ—ȱ›Š—ȱ –Ž›Œ’ȱ ¥ȱ –˜—ȱ ™¸›Žǰȱ ›Š—³˜’œǰȱ šž’ȱ –ȂŠȱ ˜ž“˜ž›œȱ Ž—Œ˜ž›Š·ȱ Š—œȱ ŒŽŽȱ Ÿ˜’Žǰȱ Š’—œ’ȱ šžŽȱ ™˜ž›ȱœŽœȱŒ˜—œŽ’•œȱ“ž’Œ’Žž¡ǯȱ—ȱ›Š—ȱ–Ž›Œ’ȱ·Š•Ž–Ž—ȱ¥ȱ–Šȱ‹Ž••ŽȬ–¸›Žǰȱ·Š›’ŒŽǰȱšž’ȱ –ȂŠȱ™Ž›–’œȱŽȱ’—’›ȱŒŽȱ›ŠŸŠ’•ȱŽȱ‘¸œŽȱŠ—œȱ•Žœȱ–Ž’••Žž›ŽœȱŒ˜—’’˜—œǯȱ ȱ Ž›Œ’ȱ¥ȱ–ŽœȱŽž¡ȱ›Š—œȱŠ–˜ž›œȱǷȱŠŒ‘Šǰȱ–˜—ȱ’•œǰȱ–Ž›Œ’ȱ™˜ž›ȱŠȱ“˜’ŽȱŽȱŸ’Ÿ›Žǰȱ ’—Žœ›žŒ’‹•ŽȱŽȱŒ˜—Š’ŽžœŽǰȱŽȱ–Ž›Œ’ȱȂŠŸ˜’›ȱŠŒŒŽ™·ȱ–Žœȱ—˜–‹›ŽžœŽœȱŠ‹œŽ—ŒŽœȱœŠ—œȱ –ȂŽ—ȱŽ—’›ȱ›’žŽž›ǯȱ—’—ǰȱ–Ž›Œ’ȱ¥ȱ•Šȱ™Ž›œ˜——Žȱšž’ȱ–ȂŠȱ˜ž“˜ž›œȱœ˜žŽ—žȱŽȱŠŸŽŒȱšž’ȱ “ȂŠ’ȱ·“¥ȱ™Š›Œ˜ž›žȱž—ȱ‹˜—ȱ‹˜žȱŽȱŒ‘Ž–’—ȱŠ—œȱ•ŠȱŸ’ŽǰȱŠ—ŽœœŠǯȱŽ›Œ’ȱ’—’—’–Ž—ȱ™˜ž›ȱ ˜žȱ˜—ȱŠ–˜ž›ǰȱŠȱŒ˜–™›·‘Ž—œ’˜—ȱŽȱŠȱŒ˜—’Š—ŒŽǯȱ ȱ ȱ ȱ. ȱ ȱ.

(17) ȱ. SOMMAIREȱ ȱ 11ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗ  ȱȱ  ȱ1  ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘ 1ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśȱ ȱ INTRODUCTIONȱBIBLIOGRAPHIQUEȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱş ǯ  ȱȱ ȱȱȱȂȱǯȱŗŖ 1. LesȱrhabdomyosarcomesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŖ ŗǯŗǯȱŽœŒ›’™’˜—ȱŽȱ·™’·–’˜•˜’ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŖ ŗǯŘǯȱ’Š—˜œ’ŒȱŽȱŒ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŗ Ȭ ›·œŽ—Š’˜—ȱŒ•’—’šžŽȱŽȱ’Š—˜œ’šžŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŗ Ȭ •Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŘ ŗǯřǯȱŠ›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ‹’˜•˜’šžŽœȱŽœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗś Ȭ —Š˜–˜™Š‘˜•˜’Žȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗś Ȭ Š›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ·—·’šžŽœȱŽȱ–˜•·Œž•Š’›ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŜ ŗǯŚǯȱŠ›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ‹’˜•˜’šžŽœȱŽœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŝ Ȭ —Š˜–˜™Š‘˜•˜’Žȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŝ Ȭ Š›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ·—·’šžŽœȱŽȱ–˜•·Œž•Š’›ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŞ ŗǯśǯȱŸ·—Ž–Ž—œȱ·—·’šžŽœȱœŽŒ˜—Š’›Žœȱ™›·œŽ—œȱŠ—œȱ•ŽœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŗ Ȭ Ÿ·—Ž–Ž—œȱŠŸ˜›’œŠ—ȱ•Šȱœž›Ÿ’ŽȱŒŽ••ž•Š’›ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŘ Ȭ Ÿ·—Ž–Ž—œȱŠŸ˜›’œŠ—ȱ•Šȱ™›˜•’·›Š’˜—ȱŒŽ••ž•Š’›ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŘ Ȭ ž›Žœȱ·Ÿ·—Ž–Ž—œȱŒ˜—›’‹žŠ—ȱ¥ȱ•Šȱž–˜›’Ž—¸œŽȱŽœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘř ŗǯŜǯȱŽȱ’Š—˜œ’Œȱ’·›Ž—’Ž•ȱȱŸŽ›œžœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŚ ŗǯŝǯȱŠŒŽž›œȱ™›˜—˜œ’šžŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŝ ŗǯŞǯȱ›Š’Ž–Ž—ȱŽœȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŞ 2. LesȱostéosarcomesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŖ ŘǯŗǯȱŽœŒ›’™’˜—ȱȱŽȱ·™’·–’˜•˜’ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŖ ŘǯŘǯȱ’Š—˜œ’ŒȱŽȱŒ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŗ Ȭ ›·œŽ—Š’˜—ȱŒ•’—’šžŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŗ Ȭ —Š˜–˜™Š‘˜•˜’ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŘ Ȭ Š›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ·—·’šžŽœȱŽȱ–˜•·Œž•Š’›ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŚ Řǯřǯȱ›Š’Ž–Ž—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřś Ȭ ›Š’Ž–Ž—ȱŒ˜—ŸŽ—’˜——Ž•ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřś Ȭ ‘’–’˜‘·›Š™’ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŜ Ȭ ˜žŸŽ••Žœȱœ›Š·’Žœȱ‘·›Š™Žž’šžŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřŞ ŘǯŚǯȱ’œšžŽœȱŽȱŽŽœȱœŽŒ˜—Š’›Žœȱžȱ›Š’Ž–Ž—ȱ¥ȱ•Ȃ’˜œŠ–’Žȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱřş ŘǯśǯȱŸ˜•ž’˜—ȱŽȱŠŒŽž›œȱ™›˜—˜œ’šžŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚŖ Ȭ ·Œ’’ŸŽœȱŽȱ–·ŠœŠœŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚŖ Ȭ ŠŒŽž›œȱ™›˜—˜œ’šžŽœȱŒ•’—’šžŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚŖ Ȭ ŠŒŽž›œȱ™›˜—˜œ’šžŽœȱ–˜•·Œž•Š’›ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚŗȱ ȱ ȱ ȱ.

(18) ȱ ǯ ȱ ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚř 1. Définitionȱetȱmodeȱd’actionȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚř ŗǯŗǯȱ·’—’’˜—ȱŽȱ·Œ˜žŸŽ›ŽȱŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚř ŗǯŘǯȱ’˜Ž—¸œŽȱŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚŜ ŗǯřǯȱ›’—Œ’™ŽȱŽȱ•Ȃ’—Ž›ŠŒ’˜—ȱŽ—›Žȱ•Žœȱ–’Œ›˜ȱŽȱ•Žœȱȱ–ŽœœŠŽ›œȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŚş ŗǯŚǯȱ·ŒŠ—’œ–Žœȱ™˜œȬ›Š—œŒ›’™’˜——Ž•œȱ›·ž•·œȱ™Š›ȱ•Žœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŗ Ȭ ·ž•Š’˜—ȱŽȱ•Šȱ›ŠžŒ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŘ Ȭ ·ž•Š’˜—ȱŽȱ•ŠȱœŠ‹’•’·ȱŽœȱȱ–ŽœœŠŽ›œȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśř 2. MicroARNȱetȱcancerȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśř Řǯŗǯȱ·›·ž•Š’˜—ȱŽȱ•ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ȱŠ—œȱ•ŽœȱŒŠ—ŒŽ›œȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśř ŘǯŘǯȱ˜Ž—’Ž•ȱŒ•’—’šžŽȱŽœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŝ Ȭ ’Š—˜œ’ŒȱŽȱŒ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŝ Ȭ —’ŒŠŽž›œȱ™›˜—˜œ’šžŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŞ Ȭ ’Œ›˜ȱŒ’›Œž•Š—œȱDZȱ‹’˜–Š›šžŽž›œȱ—˜—ȱ’—ŸŠœ’œȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśŞ Ȭ —’ŒŠŽž›œȱ™›·’Œ’œȱȂž—Žȱ›·™˜—œŽȱŠžȱ›Š’Ž–Ž—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱśş Řǯřǯȱ’•’œŠ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ȱŽ—ȱŠ—ȱšžŽȱœ›Š·’Žȱ‘·›Š™Žž’šžŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŖ ǯ  ȱ  ȱ ȱ Ȃ ȱ ȱ  ȱ Ȃ ȱ ȱ ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŚ 1. Technologiesȱpourȱl’étudeȱdesȱprofilsȱd’expressionȱdesȱmicroARNȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŚ ŗǯŗǯȱžŒŽœȱ¥ȱ˜•’˜—žŒ•·˜’ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŚ Ȭ ·’—’’˜—ȱŽȱ‘’œ˜›’šžŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŚ Ȭ ›’—Œ’™ŽȱŽȱ˜—Œ’˜——Ž–Ž—ȱŽœȱ™žŒŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜŜ ŗǯŘǯȱȱšžŠ—’Š’ŸŽȱ¥ȱ–˜¢Ž—ȱ·‹’ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜş Ȭ ·’—’’˜—ȱŽȱ‘’œ˜›’šžŽȱŽȱ•ŠȱȱšžŠ—’Š’ŸŽǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŜş Ȭ ›’—Œ’™ŽȱŽȱ•ŠȱȱšžŠ—’Š’ŸŽȱŠ™™•’šž·ŽȱŠž¡ȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝŗ 2. Méthodesȱdeȱnormalisationȱdesȱdonnéesȱd’expressionȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝř ŘǯŗǯȱŽȱ‹Žœ˜’—ȱŽȱ—˜›–Š•’œŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝř Ȭ ›’—Œ’™Žœȱ·—·›Šž¡ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝř Ȭ ·ŽŒ’˜—ȱžȱ¢™ŽȱŽȱ‹’Š’œȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝś ŘǯŘǯȱ·‘˜ŽœȱŽȱ—˜›–Š•’œŠ’˜—ȱ•˜‹Š•ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝŞ Ȭ ·’Š—Žȱ˜žȱ–˜¢Ž——ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŝŞ Ȭ ·‘˜ŽȱžȱŽ•ŠȬŽ•ŠȱȱŽȱŒ‘˜’¡ȱŽȱ•ȂŽ—˜¸—ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞŖ Řǯřǯȱ·‘˜ŽœȱŽȱ—˜›–Š•’œŠ’˜—ȱ•˜ŒŠ•ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞŗ Ȭ ˜›–Š•’œŠ’˜—ȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞŘ Ȭ ˜›–Š•’œŠ’˜—ȱ™Š›ȱ•ŽœȱšžŠ—’•ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞř 3. Outilsȱstatistiquesȱpourȱl’analyseȱdesȱprofilsȱd’expressionȱdesȱmicroARNȱǯǯȱŞś řǯŗǯȱ’•›ŠŽȱŽœȱ·Œ‘Š—’••˜—œȱŽȱŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞś řǯŘǯȱ·‘˜ŽœȱȂŠ—Š•¢œŽȱ—˜—ȱœž™Ž›Ÿ’œ·ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞŝ Ȭ •Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ‘’·›Š›Œ‘’šžŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞŞ Ȭ —Š•¢œŽȱŽ—ȱŒ˜–™˜œŠ—Žœȱ™›’—Œ’™Š•ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŞş řǯřǯȱŽœœȱœŠ’œ’šžŽœȱŠ™™•’šž·œȱŠž¡ȱŠ—Š•¢œŽœȱœž™Ž›Ÿ’œ·ŽœȱDZȱȬŽœȱŽȱȱǯǯǯǯȱşŗȱ ȱ ȱ ȱ.

(19) RÉSULTATSȱEXPÉRIMENTAUXȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱşř  ȱȱ ȱ1 ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱşŚ 1 ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱşŚ  ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱşŜ ǯ  ȱ ȱ  ȱ Ȃȱ 1  ȱ Ȃȱ ȱ 1ȱ ȱȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŖŚ 1. Desȱ Ctsȱ brutsȱ àȱ l’interprétationȱ biologiqueȱ:ȱ importanceȱ duȱ traitementȱ des donnéesȱprimairesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŖŚ ›’Œ•Žȱ ȱ Ž—ȱ œ˜ž–’œœ’˜—ȱ DZȱ Ž’—’—ȱ ‘Žȱ ˜™’–Š•ȱ Š—Š•¢œ’œȱ –Ž‘˜˜•˜¢ȱ ˜›ȱ –’ȱ ™›˜’•’—ȱžœ’—ȱŠšŠ—țȱ˜ ȱŽ—œ’¢ȱ››Š¢œȱǻǼȱ ’‘ȱ›˜£Ž—ȱŠ—ȱ˜›–Š•’—Ȭ’¡Žȱ ™Š›Š’—ȬŽ–‹ŽŽȱœŠ–™•ŽœǯȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŖŜ 2. ValidationȱparȱcomparaisonȱavecȱlesȱpucesȱmicroARNȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚŖ Řǯŗǯȱ›·œŽ—Š’˜—ȱŽȱ•Šȱ™•ŠŽ˜›–ŽȱŽȱ™žŒŽȱ¥ȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚŖ ŘǯŘǯȱ—Š•¢œŽȱŽœȱ›·œž•ŠœȱŽœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ˜‹Ž—žœȱœž›ȱ™žŒŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚŗ Řǯřǯȱ˜—Œ•žœ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚŜ ǯ 1  ȱ Ȃȱ 1ȱ  1 ȱ ȱ ȱ    ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚŝ ›’Œ•Žȱ ȱ DZȱ –’Œ›˜Ȭȱ ™›˜’•Žœȱ ’—ȱ ˜œŽ˜œŠ›Œ˜–Šȱ Šœȱ Šȱ ™›Ž’Œ’ŸŽȱ ˜˜•ȱ ˜›ȱ ’˜œŠ–’Žȱ ›Žœ™˜—œŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŚş ǯ ȱ ȱ  ȱ  ȱ ȱ ȱ    ȱ   ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŜŗ 1. Difficultésȱliéesȱàȱlaȱdétectionȱdesȱtranscritsȱ raresȱ:ȱessaiȱdeȱ développement d’uneȱtechnologieȱdeȱpuceȱàȱADNcȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŜŗ ›’¡ȱŘŖŗŖȱŽœȱ–’œȱŽȱ•Ȃ—’ŸŽ›œ’·ȱŽȱ¢˜—ǰȱ˜·ȱ™Š›ȱ  ǰȱŠ—œȱ•ŠȱŒŠ·˜›’Žȱ Š—˜ŽŒ‘—˜•˜’Žȱ Žȱ ·—·’šžŽȱ ˜•·Œž•Š’›Žǰȱ ‘Š›–ŠŒ˜·—˜–’šžŽǰȱ ™˜ž›ȱ •Žȱ œž“Žȱ Žȱ ‘¸œŽȱ DZȱ ·ŸŽ•˜™™Ž–Ž—ȱ Ȃž—Žȱ ™žŒŽȱ ¥ȱ ȱ Žȱ ’Š—˜œ’Œȱ Žœȱ œŠ›Œ˜–Žœȱ ¥ȱ ›Š—œ•˜ŒŠ’˜—ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŜŘ 2. ClassificationȱdesȱrhabdomyosarcomesȱgrâceȱauxȱprofilsȱmicroARNȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŞś ›’Œ•Žȱ ȱDZȱ’ȱ™›˜’•’—DZȱ‘˜ ȱ˜ȱ‹¢™Šœœȱ‘ŽȱŒž››Ž—ȱ’’Œž•’Žœȱ’—ȱ‘Žȱ’Š—˜œ’œȱŠ—ȱ ›ŽŠ–Ž—ȱ˜ȱœŠ›Œ˜–ŠœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŗŞŜ 3. CaractérisationȱgénomiqueȱdesȱrhabdomyosarcomesȱàȱtranscritsȱraresȱǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖŖ řǯŗǯȱŽŒ‘Ž›Œ‘ŽȱŽȱŒŠœȱ›Š›Žœȱ›¦ŒŽȱŠž¡ȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ȱǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖŖ řǯŘǯȱŽŒ‘Ž›Œ‘ŽȱŽœȱ›Š—œŒ›’œȱ›Š›Žœȱ™Š›ȱŽŒ‘—’šžŽȱ  ȱŽȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖŘ řǯřǯȱŠ›ŠŒ·›’œŠ’˜—ȱ·—˜–’šžŽȱ™Š›ȱŽŒ‘—’šžŽȱ ȱœž›ȱ™žŒŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖř Ȭ žŽȱŽȱŒŠœȱDZȱȱŽ–‹›¢˜——Š’›Žȱ¥ȱ›Š—œŒ›’ȱ›Š›ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖŚ Ȭ žŽȱŽȱŒŠœȱDZȱȱŠ•Ÿ·˜•Š’›Žȱ¥ȱ›Š—œŒ›’ȱ›Š›ŽȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖŜ   ȱȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŖş ›’Œ•Žȱ ȱŽ—ȱœ˜ž–’œœ’˜—ȱDZȱž˜Œ›’—Žȱ›˜•Žȱ˜›ȱ ŠœŜǰȱ¢›˜řȱŠ—ȱ¡•ȱ’—ȱ•Ž’˜–¢˜œŠ›Œ˜–Šœ ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŗŖȱ.

(20) DISCUSSIONȱETȱPERSPECTIVESȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘřŞ ǯ ȱ ȱ ȱ 1 ȱ ȱ   ȱ   ȱ ȱ ȱ   ȱ ȂȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘřş 1. BiaisȱbiologiquesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘřş 2. Biaisȱdeȱmanipulationsȱetȱd’analyseȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŚŚ ǯ   ȱȱ ȱȂ ȱȱ ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘśŚ 1. AléasȱtechnologiquesȱetȱévolutionsȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘśŚ 2. LimitesȱbiologiquesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŜŗ Řǯŗǯȱ’–’ŽœȱŽȱ•ŠȱŒ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱŠŒžŽ••ŽȱŽœȱ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŜŗ ŘǯŘǯȱ˜–™•Ž¡’·ȱ·—˜–’šžŽȱŽœȱ˜œ·˜œŠ›Œ˜–ŽœȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŜř ǯ  ȱȱ1ȱȱ ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŜŝ 1. Profilsȱd’expressionȱdesȱmicroARNȱetȱvoiesȱmétaboliquesȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŜŝ 2. Développementȱd’outilsȱcliniquesȱdeȱroutineȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŝŖ 3. PoursuiteȱgénéraleȱdesȱprojetsȱenȱcoursȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŝŘ 11ȱ    ȱǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯǯȱŘŝś.

(21) RESUMEȱenȱfrançaisȱ Lesȱsarcomesȱsontȱdesȱtumeursȱmalignesȱdesȱtissusȱconjonctifs,ȱȱreprésentantȱmoinsȱdeȱ1%ȱ desȱtumeursȱmalignesȱdeȱl’adulte,ȱmaisȱprèsȱdeȱ8%ȱdeȱl’ensembleȱdesȱcancersȱpédiatriques.ȱEnȱ raisonȱ deȱ leurȱ rareté,ȱ deȱ leurȱ grandeȱ variétéȱ histologiqueȱ etȱ deȱ leurȱ potentielȱ évolutifȱ hétérogène,ȱlesȱsarcomesȱsontȱdesȱpathologiesȱdifficilesȱàȱtraiter,ȱtantȱsurȱleȱplanȱdiagnostique,ȱ pronostiqueȱ queȱ thérapeutique.ȱ Cesȱ dernièresȱ années,ȱ l’avènementȱ deȱ techniquesȱ d’analyseȱ pangénomiquesȱ parȱ biologieȱ moléculaireȱ aȱ permisȱ d’améliorerȱ laȱ priseȱ enȱ chargeȱ cliniqueȱ desȱ sarcomes,ȱmaisȱlesȱmicroARNȱsontȱdesȱbiomarqueursȱémergentsȱencoreȱpeuȱutilisés.ȱ Auȱ coursȱ deȱ ceȱ travailȱ deȱ thèse,ȱ nousȱ avonsȱ choisiȱ d’étudierȱ laȱ valeurȱ desȱ profilsȱ d’expressionȱ desȱ microARNȱ dansȱ lesȱ rhabdomyosarcomesȱ etȱ lesȱ ostéosarcomes.ȱ ȱ Lesȱ donnéesȱ brutesȱdesȱprofilsȱd’expressionȱontȱétéȱobtenuesȱàȱl’aideȱd’uneȱtechnologieȱàȱmoyenȱdébitȱbaséeȱ surȱdesȱréactionsȱdeȱPCRȱquantitative.ȱNousȱavonsȱtoutȱd’abordȱdéveloppéȱuneȱméthodologieȱ d’analyseȱ permettantȱ d’obtenirȱ desȱ donnéesȱ d’expressionȱ précises,ȱ reproductiblesȱ etȱ àȱ forteȱ valeurȱajoutée,ȱàȱpartirȱdeȱmatérielȱbiologiqueȱhétérogène.ȱDansȱunȱsecondȱtemps,ȱnousȱavonsȱ montréȱ queȱ lesȱ profilsȱ d’expressionȱ desȱ microARNȱ permettentȱ d’améliorerȱ laȱ priseȱ enȱ chargeȱ cliniqueȱ desȱ deuxȱ typesȱ deȱ sarcomesȱ étudiésȱ:ȱ ilȱ estȱ possibleȱ d’affinerȱ laȱ classificationȱ nosologiqueȱ desȱ rhabdomyosarcomes,ȱ etȱ deȱ prédireȱ laȱ réponseȱ desȱ ostéosarcomesȱ àȱ laȱ chimiothérapieȱnéoȬadjuvante.ȱLaȱrechercheȱdeȱnouvellesȱapplicationsȱcliniquesȱliéesȱauxȱprofilsȱ d’expressionȱ desȱ microARNȱ doitȱdoncȱ êtreȱ poursuivie,ȱ etȱ peutȱ désormaisȱ l’êtreȱ grâceȱ àȱ l’outilȱ robusteȱqueȱnousȱavonsȱdéveloppéȱauȱcoursȱdeȱcetteȱthèse.ȱ TITREȱenȱanglaisȱ. Expression profiles of microRNAs in sarcomas: from raw data to clinical applications. RESUMEȱenȱanglaisȱ Sarcomasȱareȱmalignantȱsoftȱtissueȱtumors,ȱaccountingȱforȱ1%ȱofȱadultȱtumorsȱandȱ8%ȱofȱallȱ pediatricȱ malignancies.ȱ Sarcomasȱ areȱ rare,ȱ andȱ displayȱ aȱ varietyȱ ofȱ histologicalȱ subtypesȱ andȱ clinicalȱ characteristics.ȱ Therefore,ȱ everydayȱ managementȱ isȱ difficultȱ inȱ termsȱ ofȱ diagnosis,ȱ prognosisȱ andȱ treatment.ȱ Recently,ȱ theȱ developmentȱ ofȱ pangenomicȱ molecularȱ techniquesȱ improvedȱtheȱclinicalȱmanagementȱofȱsarcomas,ȱbutȱtheȱuseȱofȱmicroRNAsȱasȱbiomarkersȱisȱstillȱ beingȱinvestigated.ȱ Inȱ theȱ presentȱ work,ȱ weȱ studiedȱ theȱ valueȱ ofȱ microRNAȱ expressionȱ profilesȱ inȱ rhabdomyosarcomasȱandȱosteosarcomas.ȱRawȱdataȱofȱexpressionȱprofilesȱwereȱobtainedȱusingȱaȱ mediumȱ throughputȱ technologyȱ basedȱ onȱ quantitativeȱ PCR.ȱ Weȱ firstȱ developedȱ anȱ analysisȱ methodologyȱ toȱ gainȱ accurate,ȱ reproducibleȱ andȱ relevantȱ expressionȱ data,ȱ startingȱ fromȱ heterogeneousȱ samples.ȱ Furthermore,ȱ weȱ showedȱ thatȱ microRNAȱ expressionȱ profilesȱ canȱ improveȱtheȱclinicalȱmanagementȱofȱbothȱsarcomaȱentities:ȱtheyȱareȱhelpfulȱtoȱupgradeȱtheȱfineȱ nosologicalȱ classificationȱofȱ rhabdomyosarcomas,ȱ andȱ theyȱareȱ ableȱ toȱ predictȱ theȱ responseȱ ofȱ osteosarcomasȱ toȱ neoadjuvantȱ chemotherapy.ȱ Searchingȱ forȱ newȱ clinicalȱ applicationsȱ toȱ microRNAȱexpressionȱprofilesȱmustȱbeȱpursued.ȱ DISCIPLINEȱȱ. Cancérologieȱ. MOTSȬCLESȱ. MicroARN,ȱ cancer,ȱ sarcomes,ȱ profilsȱ d’expression,ȱ rhabdomyosarcomes,ȱ ostéosarcomes,ȱPCRȱquantitative,ȱnormalisationȱ. INTITULEȱETȱADRESSEȱDEȱL’U.F.R.ȱOUȱDUȱLABORATOIREȱ EquipeȱCiblageȱdeȱlaȱTumeurȱetȱdeȱsonȱEnvironnementȱImmunitaireȱ CentreȱdeȱRechercheȱenȱCancérologieȱdeȱLyonȱ(CRCL),ȱUMRȱINSERMȱ1052ȱȬȱCNRSȱ5286ȱ CentreȱLéonȱBérard,ȱ28ȱrueȱLaënnec,ȱ69373ȱLyonȱcedexȱ08ȱ 1ȱȱ.

(22) ȱ. LISTEȱDESȱPRINCIPALESȱABRÉVIATIONSȱ ABCȱ ABCB1ȱ aCGHȱ ACPȱ ADICAPȱ ADNȱ ADNcȱ AGOȱ AMȱ ANMȱ ANOVAȱ APȬ2ȱbetaȱ ARMSȱ ARNȱ ARNiȱ ARNmȱ ATCCȱ BCL2ȱ CCND1ȱ CDKȱ CDK4ȱ CDK6ȱ CDKN1Aȱ CDKN2Aȱ CGHȱ CINSARCȱ CITȱ CONTICANETȱ Ctȱ NJNJCtȱ DDIT3ȱ DGCR8ȱ Eȱ E2F1ȱ EDTAȱ EGFRȱ EJCȱ ERBB2ȱ ERMSȱ. FamilleȱdesȱtransporteursȱABCȱ(ABCB1ȱàȱABCB6)ȱ ATPȬbindingȱcassette,ȱsubȬfamilyȱBȱ(MDR/TAP),ȱmemberȱ1ȱ Arrayȱcomparativeȱgenomicȱhybridizationȱ Analyseȱenȱcomposantesȱprincipalesȱ Associationȱpourȱleȱdéveloppementȱdeȱlȇinformatiqueȱenȱcytologieȱ etȱanatomieȱpathologiqueȱ Acideȱdésoxyribonucléiqueȱ Acideȱdésoxyribonucléiqueȱcomplémentȱ Familleȱdesȱprotéinesȱargonautesȱ(AGO1ȱàȱAGO4)ȱ ReprésentationȱgraphiqueȱdeȱtypeȱAMȱ AcadémieȱNationaleȱdeȱMédecineȱ Analysisȱofȱvarianceȱ Activatingȱenhancerȱbindingȱproteinȱ2ȱbetaȱ Alveolarȱrhabdomyosarcomaȱ Acideȱribonucléiqueȱ Acideȱribonucléiqueȱinterférenceȱ Acideȱribonucléiqueȱmessagerȱ AmericanȱTypeȱCultureȱCollectionȱ BȬcellȱCLL/lymphomaȱ2ȱ CyclinȱD1ȱ Cyclinȱdependentȱkinaseȱ Cyclinȱdependentȱkinaseȱ4ȱ Cyclinȱdependentȱkinaseȱ6ȱ Cyclinȱdependentȱkinaseȱinhibitorȱ1Aȱ(P21)ȱ Cyclinȱdependentȱkinaseȱinhibitorȱ2Aȱ(P16,ȱP14)ȱ Comparativeȱgenomicȱhybridizationȱ Complexityȱindexȱinȱsarcomasȱ Carteȱd’IdentitéȱdesȱTumeurs®ȱ Connectiveȱtissueȱcancerȱnetworkȱ Cycleȱthresholdȱ MéthodeȱduȱdeltaȱdeltaȱCtȱ DNAȬdamageȬinducibleȱtranscriptȱ3ȱ DiGeorgeȱsyndromeȱcriticalȱregionȱgeneȱ8ȱ Efficacitéȱ(deȱlaȱPCRq)ȱ E2Fȱtranscriptionȱfactorȱ1ȱ Acideȱéthylèneȱdiamineȱtétraacétiqueȱ Epidermalȱgrowthȱfactorȱreceptorȱ EuropeanȱJournalȱofȱCancerȱ vȬerbȬb2ȱerythroblasticȱleukemiaȱviralȱoncogeneȱhomologȱ2ȱ Embryonalȱrhabdomyosarcomaȱ 2ȱ. ȱ.

(23) ȱ FFPEȱ FGFR1ȱ FISHȱ FOXOȱ FOXO1ȱ ȱ FOXO4ȱȱ ȱ GISTȱ ȱ GOȱ ȱ HESȱ HRASȱ ICRȱ IGFȬ1Rȱ IGF2ȱ ȱ IHCȱ ȱ IFOȱ ȱ IL1ȱ ȱ IRMȱ ȱ IRSGȱ ȱ KEGGȱ ȱ KITȱ ȱ KRASȱ ȱ LMSȱ ȱ LNAȱ ȱ LOESSȱ ȱ LOHȱ ȱ LOWESSȱ ȱ MAPKȱ ȱ MAP3K5ȱ ȱ MDM2ȱ ȱ MDM4ȱ ȱ MDRȱ ȱ MINDACTȱȱ MREȱ ȱ MYCȱ ȱ MYCNȱ ȱ nARMSȱ NCOAȱ NCOA1ȱ ȱ NCOA2ȱ ȱ NF1ȱ ȱ NOSȱ ȱ NRASȱ ȱ OMSȱ ȱ. Formalinȱfixed,ȱparaffinȱembeddedȱ Fibroblastȱgrowthȱfactorȱreceptorȱ1ȱ Hybridationȱinȱsituȱfluorescenteȱ FamilleȱdesȱgènesȱFOXOȱ(FOXO1,ȱFOXO4)ȱ ForkheadȱboxȱO1ȱ(FKHR)ȱ ForkheadȱboxȱO4ȱ(MLLT7)ȱ GastroȬintestinalȱstromalȱtumorȱ Geneȱontologyȱ Hématoxyline,ȱéosine,ȱsafranȱ vȬHaȬrasȱHarveyȱratȱsarcomaȱviralȱoncogeneȱhomologȱ InternationalȱClassificationȱofȱRhabdomyosarcomaȱ InsulinȬlikeȱgrowthȱfactorȱ1ȱreceptorȱ InsulinȬlikeȱgrowthȱfactorȱ2ȱ Immunohistochimieȱ Ifosfamideȱ Interleukinȱ1ȱ Imagerieȱparȱrésonanceȱmagnétiqueȱ IntergroupȱRhabdomyosarcomaȱStudyȱGroupȱ KyotoȱEncyclopediaȱofȱGenesȱandȱGenomesȱ vȬkitȱHardyȬZuckermanȱ4ȱfelineȱsarcomaȱviralȱoncogeneȱhomologȱ vȬKiȬras2ȱKirstenȱratȱsarcomaȱviralȱoncogeneȱhomologȱ Léiomyosarcomeȱ Lockedȱnucleicȱacidȱ Locallyȱestimatedȱscatterplotȱsmoothingȱ Lossȱofȱheterozygosityȱ Locallyȱweightedȱscatterplotȱsmoothingȱ FamilleȱdesȱgènesȱMitogenȬactivatedȱproteinȱkinaseȱ MitogenȬactivatedȱproteinȱkinaseȱkinaseȱkinaseȱ5ȱ p53ȱE3ȱubiquitinȱproteinȱligaseȱhomologȱ Mdm4ȱp53ȱbindingȱproteinȱhomologȱ multiȬdrugȱresistanceȱ MicroarrayȱInȱNodeȱnegativeȱDiseaseȱmayȱAvoidȱChemoTherapyȱ MicroRNAȱresponseȱelementȱ vȬmycȱmyelocytomatosisȱviralȱoncogeneȱhomologȱ vȬmycȱmyelocytomatosisȱviralȱrelatedȱoncogeneȱ(NȬmyc)ȱ TranslocationȬnegativeȱalveolarȱrhabdomyosarcomaȱ FamilleȱdesȱgènesȱNCOAȱ(NCOA1,ȱNCOA2)ȱ Nuclearȱreceptorȱcoactivatorȱ1ȱ Nuclearȱreceptorȱcoactivatorȱ2ȱ Neurofibrominȱ1ȱ Notȱotherwiseȱspecifiedȱ neuroblastomaȱRASȱviralȱ(vȬras)ȱoncogeneȱhomologȱ OrganisationȱMondialeȱdeȱlaȱSantéȱ 3ȱ. ȱ.

(24) ȱ OSȱ ȱ pARMSȱ PAXȱ PAX3ȱ ȱ PAX3ȬFOXO1ȱ PAX3ȬFOXO4ȱ PAX3ȬNCOA1ȱ PAX3ȬNCOA2ȱ PAX7ȱ ȱ PAX7ȬFOXO1ȱ PCRȱ ȱ PCRqȱ ȱ PTENȱ ȱ RASȱ ȱ RB1ȱ ȱ RISCȱ ȱ RMSȱ RQȱ RTȱ RTȬPCRȱ SAIȱ ȱ SIOPȱ ȱ siARNȱ ȱ SNPȱ ȱ SQSTM1ȱ ȱ SS18ȱ ȱ TFAP2Bȱ ȱ TGFΆȱ ȱ TLDAȱ ȱ TMAȱ ȱ TNFȱ ȱ TNFRSF11Aȱ TP53ȱ TRBPȱ ULSȱ UNAȱ UTRȱ VEGFȱ VEGFRȱ Wntȱ XPO5ȱ ȱ. ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ. Ostéosarcomeȱ TranslocationȬpositiveȱalveolarȱrhabdomyosarcomaȱ FamilleȱdesȱgènesȱPAXȱ(PAX3,ȱPAX7)ȱ Pairedȱboxȱ3ȱ TranscritȱdeȱfusionȱconstituéȱdesȱgènesȱPAX3ȱetȱFOXO1ȱ TranscritȱdeȱfusionȱconstituéȱdesȱgènesȱPAX3ȱetȱFOXO4ȱ TranscritȱdeȱfusionȱconstituéȱdesȱgènesȱPAX3ȱetȱNCOA1ȱ TranscritȱdeȱfusionȱconstituéȱdesȱgènesȱPAX3ȱetȱNCOA2ȱ Pairedȱboxȱ7ȱ TranscritȱdeȱfusionȱconstituéȱdesȱgènesȱPAX7ȱetȱFOXO1ȱ Polymeraseȱchainȱreactionȱ Quantitativeȱpolymeraseȱchainȱreactionȱ Phosphataseȱandȱtensinȱhomologȱ FamilleȱdesȱgènesȱRASȱ(HRAS,ȱKRAS,ȱNRAS)ȱ Retinoblastomaȱ1ȱ RNAȬinducedȱsilencingȱcomplexȱ Rhabdomyosarcomeȱ Quantitéȱrelativeȱ Reverseȱtranscriptionȱ ReverseȱtranscriptionȱȬȱPolymeraseȱchainȱreactionȱ Sansȱautresȱindicationsȱ SociétéȱInternationaleȱdȇOncologieȱPédiatriqueȱ SmallȱinterferingȱRNAȱ Singleȱnucleotideȱpolymorphismȱ Sequestosomeȱ1ȱ Synovialȱsarcomaȱtranslocation,ȱchromosomeȱ18ȱ TranscriptionȱfactorȱAPȬ2ȱbetaȱ Transformingȱgrowthȱfactor,ȱbetaȱ1ȱ(TGFB1)ȱ TaqMan®ȱLowȱDensityȱArrayȱ Tissueȱmicroȱarrayȱ Tumorȱnecrosisȱfactorȱ Tumorȱ necrosisȱ factorȱ receptorȱ superfamily,ȱ memberȱ 11a,ȱ NFKBȱ activatorȱ(RANK)ȱ TumorȱproteinȱP53ȱ TARȱ(HIVȬ1)ȱRNAȱbindingȱproteinȱ2ȱ Universalȱlinkageȱsystemȱ Unlockedȱnucleicȱacidȱ Untranslatedȱregionȱ Vascularȱendothelialȱgrowthȱfactorȱ Vascularȱendothelialȱgrowthȱfactorȱreceptorsȱ FamilleȱdesȱgènesȱwinglessȬtypeȱMMTVȱintegrationȱsiteȱ Exportinȱ5ȱ ȱ 4ȱ. ȱ.

(25) ȱ. ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ 1ȱ ȱ. śȱ ȱ.

(26) 1ȱ. Žœȱ ™›Ž–’¸›Žœȱ ŽœŒ›’™’˜—œȱ Žȱ ŒŠ—ŒŽ›ȱ ˜—ȱ ··ȱ ›Š™™˜›·Žœȱ ™Š›ȱ •Žœȱ ·¢™’Ž—œȱ ǻŠ™™›˜¡’–Š’ŸŽ–Ž—ȱ ŗśŖŖȱ Š—œȱ ŠŸŠ—ȱ

(27) ǯǯǼǰȱ Žȱ •Šȱ ˜žŽȱ ™›Ž–’¸›Žȱ Ž—Š’ŸŽȱ Žȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Žȱ ŒŽœȱ–Š•Š’Žœȱ Šȱ ··ȱ ŽŽŒž·Žȱ ™Š›ȱ ’™™˜Œ›ŠŽǰȱ Ž—Ÿ’›˜—ȱ ŚŖŖȱ ŠŸŠ—ȱ

(28) ǯǯȱ ǻŽ’œœǰȱ ŘŖŖŖǼǯȱ Šȱ ™›’œŽȱ Ž—ȱ Œ‘Š›Žȱ Žœȱ ŒŠ—ŒŽ›œȱ Šȱ ·Ÿ˜•ž·ȱ ›¸œȱ •Ž—Ž–Ž—ȱ Šžȱ Œ˜ž›œȱ Žœȱ œ’¸Œ•ŽœǰȱŽȱŒȂŽœȱœŽž•Ž–Ž—ȱ¥ȱ™Š›’›ȱŽœȱŠ——·ŽœȱŗşśŖȱšžŽȱ•ŽœȱŠŸŠ—Œ·ŽœȱŽŒ‘—˜•˜’šžŽœȱŽ—ȱ ‹’˜•˜’ŽȱŒŽ••ž•Š’›ŽȱŽȱ–˜•·Œž•Š’›Žȱ˜—ȱ™Ž›–’œȱž—ŽȱŠŒŒ·•·›Š’˜—ȱŽœȱŒ˜——Š’œœŠ—ŒŽœǯȱŽœȱ ŒŠ—ŒŽ›œȱ œ˜—ȱ Šž“˜ž›Ȃ‘ž’ȱ Ž—ȱ Œ˜ž›œȱ Žȱ ŒŠ›ŠŒ·›’œŠ’˜—ȱ ·—˜–’šžŽȱŽ¡‘Šžœ’ŸŽǰȱ ›¦ŒŽȱ ¥ȱ Žœȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žœȱ ’—Žœȱ Žȱ ‹’˜•˜’Žȱ –˜•·Œž•Š’›Žȱ ™Ž›–ŽŠ—ȱ Žȱ ›Š’Ž›ȱ •ȂŽ—œŽ–‹•Žȱ Žœȱ ’—˜›–Š’˜—œȱ‹’˜•˜’šžŽœȱŽœȱŒŽ••ž•Žœȱž–˜›Š•ŽœȱŽ—ȱž—ŽȱœŽž•ŽȱŽ¡™·›’Ž—ŒŽǯȱ ›¦ŒŽȱ¥ȱŒŽœȱ —˜žŸŽ••Žœȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žœǰȱ •Žœȱ Œ˜—ŒŽ™œȱ Œ•Šœœ’šžŽœȱ Žȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ œ˜—ȱ ‹˜ž•ŽŸŽ›œ·œǰȱ Žȱ —˜žœȱ—ȂŠŸ˜—œȱ“Š–Š’œȱ··ȱŠžœœ’ȱ™›˜Œ‘ŽœȱŽȱ™˜žŸ˜’›ȱ›·Š•’œŽ›ȱž—ŽȱŠ—Š•¢œŽȱŽ¡‘Šžœ’ŸŽȱžȱ ·—˜–Žȱ ž–˜›Š•ȱ ¥ȱ •Šȱ ŠŸŽž›ȱ Žȱ •Ȃ’Ž—’’ŒŠ’˜—ȱ Žȱ •Šȱ ŒŠ›Žȱ Ȃ’Ž—’·ȱ Žœȱ ž–Žž›œȱ ǻ ǰȱŽ••ŽȱšžŽȱœ˜ž‘Š’·Žȱ™Š›ȱ•Žȱ™›˜›Š––Žȱ›Š—³Š’œȱžȱ–¹–Žȱ—˜–ȱ’—’’·ȱŽ—ȱŘŖŖŖȱŽȱ ’—Š—Œ·ȱ™Š›ȱ•Šȱ’žŽȱŒ˜—›Žȱ•ŽȱŒŠ—ŒŽ›Ǽǯȱ Žœȱ ŽŒ‘—’šžŽœȱ ™Ž›–ŽŠ—ȱ •ȂŠ—Š•¢œŽȱ Žȱ •ȂŽ—œŽ–‹•Žȱ žȱ ·—˜–Žǰȱ žȱ ›Š—œŒ›’™˜–Žȱ Žȱ žȱ ™›˜·˜–Žȱ ˜—ȱ ·‹˜žŒ‘·ȱ œž›ȱ Žȱ —˜žŸŽ••Žœȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—œȱ —˜œ˜•˜’šžŽœǰȱ Žȱ œž›ȱ Žȱ –ž•’™•Žœȱ Š™™•’ŒŠ’˜—œȱ Šžȱ ’Š—˜œ’Œǰȱ Šžȱ ™›˜—˜œ’Œȱ Žȱ Šžȱ ›Š’Ž–Ž—ȱ Žœȱ ž–Žž›œȱ ›¦ŒŽȱ ¥ȱ •Šȱ ·Œ˜žŸŽ›Žȱ Œ˜—Œ˜–’Š—Žȱ Žȱ —˜–‹›Žž¡ȱ ‹’˜–Š›šžŽž›œȱ Ȃ’—·›¹ǯȱ —ȱ ™Š›’Œž•’Ž›ǰȱ •Ȃ·žŽȱ žȱ ›Š—œŒ›’™˜–Žȱ ž–˜›Š•ȱ ™Š›ȱ •Ȃ·Š‹•’œœŽ–Ž—ȱŽœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱȱ–ŽœœŠŽ›œȱǻ–ǼȱŠȱ·—˜›–·–Ž—ȱ Š’ȱ™›˜›ŽœœŽ›ȱ•Šȱ›ŽŒ‘Ž›Œ‘Žȱ˜—Š–Ž—Š•Žȱœž›ȱ•ŽȱŒŠ—ŒŽ›ǰȱ–Š’œȱŒŽœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ œ˜—ȱŽ—ȱŒ˜ž›œȱȂ·ŸŠ•žŠ’˜—ȱŠ—œȱŽœȱŽœœŠ’œȱŒ•’—’šžŽœȱŽȱœ˜—ȱŽ—Œ˜›Žȱ™Žžȱž’•’œ·œȱ™˜ž›ȱ •Šȱ™›’œŽȱŽ—ȱ Œ‘Š›ŽȱŒ•’—’šžŽȱ Žȱ ›˜ž’—ŽȱŽœȱ™Š’Ž—œȱǻ’ Š›’ǰȱ ŘŖŗŘǼǯȱ—ȱ™Žžȱ˜žŽ˜’œȱ Œ’Ž›ȱ Žž¡ȱ œ’—Šž›Žœȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ –ȱ ™›˜–ŽŽžœŽœȱ ŠŒžŽ••Ž–Ž—ȱ Ž—ȱ Œ˜ž›œȱ Ȃ·ŸŠ•žŠ’˜—ȱDZȱ•Šȱœ’—Šž›ŽȱȂ–œŽ›Š–ǰȱŸ’Šȱ•Ȃ·žŽȱ ȱǻ’Œ›˜Š››Š¢ȱ —ȱ˜Žȱ —ŽŠ’ŸŽȱ ’œŽŠœŽȱ –Š¢ȱ Ÿ˜’ȱ ‘Ž–˜‘Ž›Š™¢Ǽǰȱ šž’ȱ ™Ž›–Ž›Š’ȱ Žȱ –’Žž¡ȱ ›Š’Ž›ȱ •Žœȱ ™Š’Ž—œȱ ™˜›Žž›œȱ Ȃž—ȱ ŒŠ—ŒŽ›ȱ žȱ œŽ’—ȱ Ž—ȱ œ’žŠ’˜—ȱ Š“žŸŠ—Žȱ ǻŸŠ—ȱ Žȱ ’“ŸŽ›ȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŘŖŖŘǼǰȱŽȱ•Šȱœ’—Šž›Žȱ ȱǻ˜–™•Ž¡’¢ȱ’—Ž¡ȱ’—ȱœŠ›Œ˜–ŠœǼǰȱȱ™Ž›–ŽŠ—ȱŽȱ™›·’›Žȱ •Žȱ›’œšžŽȱ–·ŠœŠ’šžŽȱŠ—œȱ•ŽœȱœŠ›Œ˜–Žœȱǻ‘’‹˜—ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŗŖǼǯȱŽȱ–Š—’¸›Žȱ·—·›Š•Žǰȱ Ŝȱ ȱ.

(29) 1ȱ. ˜—ȱ ˜‹œŽ›ŸŽȱ Šž“˜ž›Ȃ‘ž’ȱ ž—Žȱ ·–˜Œ›Š’œŠ’˜—ȱ Žȱ •Ȃž’•’œŠ’˜—ȱ Žȱ ŒŽœȱ ŽŒ‘—’šžŽœȱ Ȃ·Š‹•’œœŽ–Ž—ȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ǯȱ Ž•Šȱ Ž—›ŠÉ—Ž›Šȱ ›¸œȱ ŒŽ›Š’—Ž–Ž—ȱ •Žž›ȱ ž’•’œŠ’˜—ȱŽ—ȱ›˜ž’—ŽȱŠ—œȱž—ȱžž›ȱ™›˜Œ‘Žǯȱ Žœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ǰȱŒ˜—›Š’›Ž–Ž—ȱ¥ȱŒŽž¡ȱŽœȱ–ǰȱœ˜—ȱ Ž—Œ˜›Žȱ™Žžȱ·ž’·œǰȱŽ—ȱ™Š›’ŽȱŽ—ȱ›Š’œ˜—ȱŽȱ•Šȱ·Œ˜žŸŽ›Žȱ›·ŒŽ—ŽȱŽȱŒŽœȱŽ—’·œǰȱ–Š’œȱ Šžœœ’ȱ ™Š›ŒŽȱ šžŽȱ •Žœȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žœȱ ȂŠ—Š•¢œŽȱ —Žȱ œ˜—ȱ ™Šœȱ Ž—Œ˜›Žȱ œŠ‹’•’œ·Žœǯȱ Žȱ —˜žŸŽŠž¡ȱ ¸—Žœȱ Žȱ –’Œ›˜ȱ œ˜—ȱ ·Œ˜žŸŽ›œȱ šž˜’’Ž——Ž–Ž—ȱDZȱ •Žœȱ ‹ŠœŽœȱ Žȱ ˜——·ŽœȱŠŒžŽ••Žœȱ —Žȱœ˜—ȱ˜—Œȱ™ŠœȱŽ¡‘Šžœ’ŸŽœȱŽ—ȱŽ›–ŽœȱŽȱ¸—Žœȱ·Œ›’œǰȱ Žȱ —Žȱ•Žȱ œ˜—ȱ™Šœȱ·Š•Ž–Ž—ȱŽ—ȱŽ›–ŽœȱŽȱŒ’‹•Žœȱ–ȱ™˜Ž—’Ž••Žœǯȱ’œœŠ—ȱ¥ȱž—ȱ˜žȱŠž›Žȱ —’ŸŽŠžȱ Š—œȱ •Šȱ ŒŽ••ž•Žȱ ž–˜›Š•Žǰȱ •Ȃ·žŽȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ȱ Žœȱ ž—ȱ Ž››Š’—ȱ ȂŽ¡™•˜›Š’˜—ȱ šž’ȱ ™˜ž››Š’ȱ Š™™˜›Ž›ȱ Žœȱ ›·™˜—œŽœȱ •¥ȱ ˜ùȱ ȂŠž›Žœȱ Š—Š•¢œŽœȱ Œ’‹•Š—ȱ•Ȃǰȱ•Ȃȱ˜žȱ•Žœȱ™›˜·’—Žœȱ—Ȃ˜—ȱ™ŠœȱŽ—Œ˜›Žȱ™žȱŠ™™˜›Ž›ȱŽȱ›·™˜—œŽœǯȱȱ Ž›–Žǰȱ •Ȃ’—·›Š’˜—ȱ Žȱ ŒŽœȱ ’·›Ž—œȱ —’ŸŽŠž¡ȱ ȂŠ—Š•¢œŽȱ ™˜ž››Š’ȱ ™Ž›–Ž›Žȱ ž—Žȱ ŒŠ›ŠŒ·›’œŠ’˜—ȱ˜™’–Š•ŽȱŽȱŒ‘ŠšžŽȱ¢™Žȱž–˜›Š•ǯȱ ȱ Š—œȱ ŒŽȱ Œ˜—Ž¡Žǰȱ —˜›Žȱ ›ŠŸŠ’•ȱ œŽȱ ™›˜™˜œŽȱ Žȱ ·’—’›ȱ •Žœȱ –˜Š•’·œȱ ˜™’–Š•Žœȱ ȂŠ—Š•¢œŽȱŽœȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽȱŒŽœȱ–’Œ›˜ǰȱŠ’—ȱŽȱ•ŽœȱŽ¡™•˜›Ž›ȱŠ—œȱŽž¡ȱ ¢™Žœȱ Žȱ ž–Žž›œȱ –Š•’—Žœȱ Žœȱ ’œœžœȱ Œ˜—“˜—Œ’œǰȱ •Žȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žȱ Žȱ •Ȃ˜œ·˜œŠ›Œ˜–Žǯȱ ˜žœȱ ŠŸ˜—œȱ Œ‘˜’œ’ȱ Žȱ ›ŠŸŠ’••Ž›ȱ œž›ȱ ŒŽœȱ Žž¡ȱ ¢™Žœȱ Žȱ œŠ›Œ˜–Žœȱ Ž—ȱ ›Š’œ˜—ȱ Ȃž—ȱ ˜›ȱ ›ŽŒ›žŽ–Ž—ȱ •˜ŒŠ•ȱ •’·ȱ Šžȱ ™Š—Ž•ȱ ™•ž›’’œŒ’™•’—Š’›Žȱ ȂŽ¡™Ž›œȱ ™›·œŽ—œȱ Šžȱ Ž—›Žȱ ·˜—ȱ ·›Š›ǰȱ –Š’œȱ ·Š•Ž–Ž—ȱ ™Š›ŒŽȱ šžŽȱ ŒŽȱ œ˜—ȱ Žœȱ ž–Žž›œȱ ’’Œ’•Žœȱ ¥ȱ ™›Ž—›Žȱ Ž—ȱ Œ‘Š›Žȱ œž›ȱ •Žȱ ™•Š—ȱ Œ•’—’šžŽǯȱ Žȱ ™Š›ȱ •Žž›ȱ ›Š›Ž·ȱ Žȱ •Žž›ȱ ’ŸŽ›œ’·ǰȱ ŒŽœȱ œŠ›Œ˜–Žœȱ Œ˜—œ’žŽ—ȱ Žȱ ‹˜—œȱ –˜¸•Žœȱ Ȃ·žŽǰȱ ™˜ž›ȱ •ŽœšžŽ•œȱ ’•ȱ Žœȱ ™˜œœ’‹•Žȱ ȂŠ™™˜›Ž›ȱ ž—Žȱ ›·Ž••Žȱ ™•žœȬŸŠ•žŽȱ Š—œȱ •Žȱ ŒŠ›Žȱ Žȱ •Šȱ ™›’œŽȱ Ž—ȱ Œ‘Š›Žȱ Œ•’—’šžŽȱ Žœȱ ™Š’Ž—œǯȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ȱ ˜—ȱ ··ȱ ·Š‹•’œȱ Šžȱ –˜¢Ž—ȱ Ȃž—Žȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žȱ ’Žȱ ¥ȱ –˜¢Ž—ȱ ·‹’ȱ ‹Šœ·Žȱ œž›ȱ •Šȱ ȱ šžŠ—’Š’ŸŽȱ ǻšǼǰȱ ¥ȱ ™Š›’›ȱ Ȃ·Œ‘Š—’••˜—œȱž–˜›Šž¡ȱŒ˜—Ž•·œȱ˜žȱ’—Œ•žœȱŽ—ȱ™Š›Š’—Žǯȱ Žȱ›ŠŸŠ’•ȱŽȱ‘¸œŽȱŠȱ˜žȱȂŠ‹˜›ȱŒ˜—œ’œ·ȱ¥ȱ–˜—›Ž›ȱšžȂ’•ȱ·Š’ȱ™˜œœ’‹•Žǰȱ¥ȱ™Š›’›ȱ Žœȱ˜——·Žœȱ‹›žŽœȱ·•’Ÿ›·Žœȱ™Š›ȱ•ŽœȱŠ™™Š›Ž’•œǰȱȂ˜‹Ž—’›ȱŽœȱ˜——·Žœȱ‹’˜•˜’šžŽ–Ž—ȱ ŝȱ ȱ.

(30) 1ȱ. œ’—’’ŒŠ’ŸŽœǰȱ›Ž™›·œŽ—Š’ŸŽœȱŽœȱ—’ŸŽŠž¡ȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱŽœȱ–’Œ›˜ǰȱŽȱž’•’œŠ‹•Žœȱ ™Š›ȱŽœȱ˜ž’•œȱȂŠ—Š•¢œŽȱ™ž’œœŠ—œȱŠŠ™·œȱ¥ȱŽœȱ™›˜‹•·–Š’šžŽœȱŽȱ·–Ž–‹›Ž–Ž—ȱ ŽȱŽȱ·Œ˜žŸŽ›ŽȱŽȱ‹’˜–Š›šžŽž›œǯȱ˜ž›ȱŒŽ•Šǰȱ—˜žœȱŠŸ˜—œȱ·ŸŽ•˜™™·ȱž—Žȱ–·‘˜ŽȱŽȱ —˜›–Š•’œŠ’˜—ȱ Žȱ ȂŠ—Š•¢œŽȱ Žœȱ ˜——·Žœȱ Ž—ȱ —˜žœȱ ’—œ™’›Š—ȱ Žœȱ –·‘˜Žœȱ ›Š’’˜——Ž••Ž–Ž—ȱ ž’•’œ·Žœȱ ™˜ž›ȱ Žœȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žœȱ Žȱ ¢™Žȱ ™žŒŽœȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ǰȱ Ž—ȱ ™›Ž—Š—ȱ œ˜’—ȱ Žȱ ›·ž’›Žȱ Šžȱ –Š¡’–ž–ȱ •Žœȱ ‹’Š’œȱ ‹’˜•˜’šžŽœȱ Žȱ ŽŒ‘—’šžŽœǯȱ Š—œȱ ž—ȱ œŽŒ˜—ȱŽ–™œǰȱ—˜žœȱŠŸ˜—œȱŠ™™•’šž·ȱŒŽŽȱ–·‘˜ŽȱȂŠ—Š•¢œŽȱŠž¡ȱ™›˜’•œȱȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ȱ ˜‹Ž—žœȱ ¥ȱ ™Š›’›ȱ Žȱ ž–Žž›œȱ Žȱ ¢™Žȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žȱ ˜žȱ ˜œ·˜œŠ›Œ˜–Žǰȱ Žȱ ·ŸŠ•ž·ȱ •Šȱ ŒŠ™ŠŒ’·ȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ȱ ¥ȱ ›·œ˜ž›ŽȱŽœȱ™›˜‹•·–Š’šžŽœȱ™›˜™›Žœȱ¥ȱŒ‘ŠšžŽȱŽ—’·ǯȱ’—œ’ǰȱ—˜žœȱŠŸ˜—œȱ–˜—›·ȱšžȂ’•ȱ ·Š’ȱ ™˜œœ’‹•Žȱ ȂŠ’—Ž›ȱ •Šȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Žœȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žœȱ ›¦ŒŽȱ Šž¡ȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ǰȱ Žȱ šžŽȱ ŒŽœȱ ™›˜’•œȱ ™Ž›–ŽŠ’Ž—ȱ ·Š•Ž–Ž—ǰȱ Œ‘Ž£ȱ •Žœȱ ˜œ·˜œŠ›Œ˜–ŽœǰȱŽȱ™›·’›Žȱ•Šȱ›·™˜—œŽȱ¥ȱ•ŠȱŒ‘’–’˜‘·›Š™’Žǯȱ ȱ Š—œȱ •Ȃ’—›˜žŒ’˜—ȱ ‹’‹•’˜›Š™‘’šžŽǰȱ —˜žœȱ Š‹˜›Ž›˜—œȱ •Šȱ ‹’˜•˜’Žȱ Žœȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žœȱ Žȱ Žœȱ ˜œ·˜œŠ›Œ˜–Žœǰȱ Ž—ȱ ’—œ’œŠ—ȱ œž›ȱ •Žœȱ ™›˜‹•·–Š’šžŽœȱ Œ•’—’šžŽœȱ ™˜ž›ȱ •ŽœšžŽ••Žœȱ •Ȃ·žŽȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ȱ —˜žœȱ Šȱ ™Ž›–’œȱ ȂŠ™™˜›Ž›ȱ Žœȱ ›·™˜—œŽœǯȱ ˜žœȱ ™›·œŽ—Ž›˜—œȱ Ž—œž’Žȱ •Šȱ —Šž›Žǰȱ •Žȱ ›â•Žȱ Žȱ •Žœȱ ˜—Œ’˜—œȱ ™‘¢œ’˜•˜’šžŽœȱ Žœȱ –’Œ›˜ǰȱ Š’—œ’ȱ šžŽȱ •Žž›œȱ ’–™•’ŒŠ’˜—œȱ Š—œȱ •Žœȱ ™›˜ŒŽœœžœȱ ž–˜›Šž¡ǯȱ —’—ǰȱ —˜žœȱ Š‹˜›Ž›˜—œȱ •Žœȱ ŽŒ‘—˜•˜’Žœȱ Œ˜ž›Š––Ž—ȱ ž’•’œ·Žœȱ ™˜ž›ȱ •Ȃ·Š‹•’œœŽ–Ž—ȱ Žœȱ ™›˜’•œȱ ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱ Žœȱ –’Œ›˜ǰȱ Žȱ •Žœȱ ™›’—Œ’™Š•Žœȱ –·‘˜ŽœȱŽȱ—˜›–Š•’œŠ’˜—ȱŽȱȂŠ—Š•¢œŽȱœŠ’œ’šžŽȱšž’ȱ™ŽžŸŽ—ȱ•Žž›ȱ¹›ŽȱŠ™™•’šž·Žœǯȱ ȱ ȱ. Şȱ ȱ.

(31) ȱ. ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ ȱ  ȱ    ȱ ȱ. şȱ ȱ.

(32)  ȱȬȱŠ›’Žȱ ȱ. ǯ.  ȱȱ ȱȱȱȂȱ. ȱ. 1. Lesȱrhabdomyosarcomesȱ ŗǯŗǯ ȱŽœŒ›’™’˜—ȱŽȱ·™’·–’˜•˜’Žȱ Žœȱ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–ŽœȱǻǼȱœ˜—ȱŽœȱž–Žž›œȱ–Š•’—ŽœȱŽœȱ’œœžœȱ–˜žœȱšž’ȱ œŽȱ ·ŸŽ•˜™™Ž—ȱ ¥ȱ ™Š›’›ȱ Žȱ ŒŽ••ž•Žœȱ –·œŽ—Œ‘¢–ŠŽžœŽœȱ Žȱ •Šȱ •’—·Žȱ –žœŒž•Š’›Žȱ œšžŽ•Ž’šžŽȱ ǻŠ›‘Š–ǰȱ ŘŖŖŗǼǯȱ Žȱ —˜–ȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žȱ ·›’ŸŽȱ Žœȱ –˜œȱ ›ŽŒœȱ ›‘Š‹˜œǰȱ œ’—’’Š—ȱ ‹ŠžŽŽǰȱ Ž—ȱ ›··›Ž—ŒŽȱ Šž¡ȱ ’‹›Žœȱ –žœŒž•Š’›Žœǰȱ Žȱ –žœǰȱ œ’—’’Š—ȱ –žœŒ•Žǯȱ—ȱȱžȱ·Œ›’ȱ™˜ž›ȱ•Šȱ™›Ž–’¸›Žȱ˜’œȱ™Š›ȱŽ‹Ž›ȱŽ—ȱŗŞśŚǰȱ¥ȱ™›˜™˜œȱȂž—Žȱ –ŠœœŽȱŽȱ•Šȱ•Š—žŽȱ™›·œŽ—Š—ȱŽœȱŒŽ••ž•Žœȱ–žœŒž•Š’›Žœȱœ›’·Žœȱ¥ȱ’·›Ž—œȱœŠŽœȱŽȱ ’·›Ž—Œ’Š’˜—ǰȱ Œ‘Ž£ȱ ž—ȱ ‘˜––Žȱ Žȱ Řŗȱ Š—œȱ ǻŽ‹Ž›ǰȱ ŗŞśŚǼǯȱ —ȱ œ’¸Œ•Žȱ ™•žœȱ Š›ǰȱ ˜žȱ ˜——Šȱ ž—Žȱ ·’—’’˜—ȱ ‘’œ˜•˜’šžŽȱ ™•žœȱ ™›·Œ’œŽȱ Žȱ •Šȱ –˜›™‘˜•˜’Žȱ ™Š›’Œž•’¸›Žȱ Žœȱ ›‘Š‹˜–¢˜‹•ŠœŽœȱǻ˜žǰȱŗşŚŜǼǯȱ Žœȱȱœ˜—ȱ•ŽœȱœŠ›Œ˜–ŽœȱŽœȱ’œœžœȱ–˜žœȱ•Žœȱ™•žœȱŒ˜ž›Š—œȱŒ‘Ž£ȱ•ȂŽ—Š—ȱDZȱ’•œȱ ›Ž™›·œŽ—Ž—ȱŽ—Ÿ’›˜—ȱ•Šȱ–˜’’·ȱŽœȱœŠ›Œ˜–ŽœȱŽœȱ’œœžœȱ–˜žœȱ™·’Š›’šžŽœȱǻŠœ˜›ŽȱŽȱ Š•ǯǰȱ ŘŖŖŜDzȱ ˜ •ŠŽ›ȱŽȱ Š•ǯǰȱ ŘŖŗŘǼǯȱŽȱœ˜—ȱŒŽ™Ž—Š—ȱŽœȱž–Žž›œȱ›Š›Žœǰȱ›Ž™›·œŽ—Š—ȱ œŽž•Ž–Ž—ȱ Ž—Ÿ’›˜—ȱ Śǰśȱ Ɩȱ Žȱ •Šȱ ˜Š•’·ȱ Žœȱ ŒŠ—ŒŽ›œȱ ™·’Š›’šžŽœȱ ǻŽŠ™‘Š›ȱ Š—ȱ ˜Ž‹Ž›ǰȱŘŖŖŝDzȱ ž‘ȱŠ—ȱ”Š™Ž”ǰȱŘŖŗŖǼǯȱȂ’—Œ’Ž—ŒŽȱŠ——žŽ••ŽȱŽœȱȱŽœȱȂŽ—Ÿ’›˜—ȱ śȱ ŒŠœȱ ™Š›ȱ –’••’˜—ȱ ȂŽ—Š—œȱ Žȱ –˜’—œȱ Žȱ ŗśȱ Š—œǰȱ Šž¡ȱ ŠœȬ—’œȱ Œ˜––Žȱ Ž—ȱ ›Š—ŒŽȱ ǻ˜––Ž•ŽȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖşDzȱ ˜ •ŠŽ›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŗŘǼǯȱ ȱ Ȃ·’˜•˜’Žȱ Žȱ •Žœȱ ŠŒŽž›œȱ Žȱ ›’œšžŽœȱ œ™·Œ’’šžŽœȱ œ˜—ȱ –Š•ȱ Œ˜——žœǯȱ žŽ•šžŽœȱ ·žŽœȱœž¸›Ž—ȱž—Žȱ’—Œ’Ž—ŒŽȱ™•žœȱ’–™˜›Š—ŽȱŽœȱȱŒ‘Ž£ȱ•Žœȱ’—’Ÿ’žœȱŽ¡™˜œ·œȱ ¥ȱ Žœȱ ›Š’Š’˜—œȱ ’—ȱ žŽ›˜ȱ ǻ ›žŽ›–Š—ȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŘŖŖşǼǰȱ Œ‘Ž£ȱ •Žœȱ Ž—Š—œȱ Š¢Š—ȱ ›Ž³žȱ Žœȱ Š—’‹’˜’šžŽœȱ ™Žžȱ Š™›¸œȱ •Šȱ —Š’œœŠ—ŒŽȱ ǻ Š›•Ž¢ȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŗşŞŞǼȱ Žȱ Œ‘Ž£ȱ ŒŽž¡ȱ ˜—ȱ •Žœȱ ™Š›Ž—œȱŒ˜—œ˜––Š’Ž—ȱŽœȱ›˜žŽœȱ™Ž—Š—ȱ•Šȱ›˜œœŽœœŽȱǻ ›žŽ›–Š—ȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşşřǼǯȱ Žȱ ·ŸŽ•˜™™Ž–Ž—ȱ Žœȱ ȱ Žœȱ Šœœ˜Œ’·ȱ ¥ȱ ž—ȱ ŒŽ›Š’—ȱ —˜–‹›Žȱ Žȱ œ¢—›˜–Žœȱ Š–’•’Šž¡ȱ ›Š›Žœȱ •’·œȱ Šžȱ ŒŠ—ŒŽ›ȱ Ž•œȱ šžŽȱ •Šȱ —Žž›˜’‹›˜–Š˜œŽȱ Žȱ ¢™Žȱ ŗȱ ǻŠœž’ȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŗŖȱ ȱ.

(33)  ȱȬȱŠ›’Žȱ ȱ. ŗşşřǼǰȱŒŠ›ŠŒ·›’œ·Žȱ™Š›ȱŽœȱ–žŠ’˜—œȱŽ›–’—Š•Žœȱžȱ¸—Žȱŗȱǻ ˜•‹Ž›ȱŠ—ȱ˜••’—œǰȱ ŗşşŗǼǰȱ •Žȱ œ¢—›˜–Žȱ Žȱ ’Ȭ›Šž–Ž—’ȱ ǻ’ȱ Š—ȱ ›Šž–Ž—’ǰȱ

(34) ›ǯǰȱ ŗşŜşǼǰȱ ŒŠ›ŠŒ·›’œ·ȱ ™Š›ȱ Žœȱ –žŠ’˜—œȱ Ž›–’—Š•Žœȱ žȱ ¸—Žȱ śřȱ ǻ’••Ž›ȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŗşşśǼǰȱ •Žȱ œ¢—›˜–Žȱ Žȱ ŽŒ” ’‘Ȭ ’ŽŽ–Š——ȱǻ–’‘ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖŗǼǰȱ•’·ȱ¥ȱž—Žȱ·›·ž•Š’˜—ȱŽȱ•ȂŽ¡™›Žœœ’˜—ȱžȱ¸—Žȱ Řȱ ǻŽ’”ȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşşŚǼǰȱŠ’—œ’ȱšžŽȱ•Žȱœ¢—›˜–ŽȱŽȱ˜œŽ••˜ȱǻ ›’™™ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖŘǼǰȱŒŠ›ŠŒ·›’œ·ȱ ™Š›ȱŽœȱ–žŠ’˜—œȱŽ›–’—Š•Žœȱžȱ¸—Žȱ ȱǻ˜”’ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖśǼǯȱ ȱ ŗǯŘǯ ȱ’Š—˜œ’ŒȱŽȱŒ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Ȭȱ ›·œŽ—Š’˜—ȱŒ•’—’šžŽȱŽȱ’Š—˜œ’šžŽȱ ’Ž—ȱšžŽȱ•Žœȱȱ™ž’œœŽ—ȱŠ™™Š›ŠÉ›ŽȱŠ—œȱ˜žŽœȱ•Žœȱ™Š›’ŽœȱžȱŒ˜›™œȱǻŽ¡•Ž›ȱ ŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖŜǼǰȱ•Žœȱ•˜ŒŠ•’œŠ’˜—œȱ™›··›Ž—’Ž••ŽœȱœŽȱœ’žŽ—ȱŠžȱ—’ŸŽŠžȱŽȱ•Šȱ¹ŽȱŽȱžȱŒ˜žǰȱ Žȱ •ȂŠ™™Š›Ž’•ȱ ž›˜·—’Š•ȱ Žȱ Žœȱ –Ž–‹›Žœǯȱ ›˜’œȱ ·žŽœȱ Žȱ •Ȃ —Ž››˜ž™ȱ ‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Šȱ ž¢ȱ ›˜ž™ȱ ǻ  Ǽȱ ˜—ȱ –˜—›·ȱ šžŽȱ řśȱ Ɩȱ Žœȱ ž–Žž›œȱ œŽȱ ·ŸŽ•˜™™Š’Ž—ȱ Šžȱ —’ŸŽŠžȱ Žȱ •Šȱ ¹Žȱ ǻ™›’—Œ’™Š•Ž–Ž—ȱ Š—œȱ •Ȃ˜›‹’Žȱ Žȱ Ž—ȱ •˜ŒŠ•’œŠ’˜—ȱ ™Š›Š–·—’—·ŽǼȱ ˜žȱ œž›ȱ •Šȱ —žšžŽǰȱ Ž—Ÿ’›˜—ȱ ŘŚȱ Ɩȱ Šžȱ —’ŸŽŠžȱ Žȱ •ȂŠ™™Š›Ž’•ȱ ž›˜·—’Š•ȱ ǻŸŽœœ’Žȱ Žȱ ™›˜œŠŽǰȱ ™Š›ŠŽœ’Œž•Š’›Žǰȱ ŸŠ’—ȱ Žȱ ž·›žœǼǰȱ ŗşȱ Ɩȱ œž›ȱ •Žœȱ –Ž–‹›Žœȱ Žȱ ŘŘȱƖȱ Š—œȱȂŠž›Žœȱœ’ŽœȱǻŠž›Ž›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşŞŞDzȱŠž›Ž›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşşřDzȱ›’œȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşşśǼǯȱ Žœȱ ȱ Š™™Š›’Ž——Ž—ȱ Šžȱ ›˜ž™Žȱ Žœȱ ž–Žž›œȱ ¥ȱ ™Ž’Žœȱ ŒŽ••ž•Žœȱ ›˜—Žœȱ ‹Šœ˜™‘’•ŽœǯȱȂŠ—Š•¢œŽȱ ‘’œ˜™Š‘˜•˜’šžŽȱ œȂŠŠŒ‘Žȱ ¥ȱ ’Ž—’’Ž›ȱ •Žœȱ ŒŠ›ŠŒ·›’œ’šžŽœȱ Žȱ •Šȱ •’—·Žȱ –žœŒž•Š’›Žȱ œšžŽ•Ž’šžŽȱ Ž—ȱ ž’•’œŠ—ȱ Žœȱ ŽŒ‘—’šžŽœȱ ŸŠ›’·Žœǯȱ Ȃ’––ž—˜‘’œ˜Œ‘’–’Žȱǻ ǼȱŽœȱ’–™·›Š’ŸŽ–Ž—ȱž’•’œ·Žȱ™˜ž›ȱ˜›’Ž—Ž›ȱ•Žȱ’Š—˜œ’Œǯȱ —ȱ œȂŠŠŒ‘Žȱ Ž—ȱ ™Š›’Œž•’Ž›ȱ ¥ȱ ’Ž—’’Ž›ȱ •Šȱ ™›·œŽ—ŒŽȱ Žȱ –¢˜·—’—Žǰȱ ž—ȱ –Š›šžŽž›ȱ œ™·Œ’’šžŽȱ žȱ –žœŒ•Žȱ œšžŽ•Ž’šžŽȱ ’—’œ™Ž—œŠ‹•Žȱ ¥ȱ •ȂŠž‘Ž—’’ŒŠ’˜—ȱ Ȃž—ȱ ǯȱ —ȱ ž’•’œŽȱ •Šȱ –¢˜·—’—Žȱ Ž—ȱ Šœœ˜Œ’Š’˜—ȱ ŠŸŽŒȱ •Šȱ Žœ–’—Žǰȱ ŒŽŽȱ Ž›—’¸›Žȱ ·Š—ȱ ™›ŽœšžŽȱ ˜ž“˜ž›œȱ™˜œ’’ŸŽȱǻ˜•Ž—ŠŠ›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŗşŞśDzȱ ž–Š›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖŖDzȱŽ¡•Ž›ȱŽȱŠ•ǯǰȱŘŖŖŜǼǯȱ ȱ. ȱ. ŗŗȱ ȱ.

(35)  ȱȬȱŠ›’Žȱ ȱ. ȱ Ȭȱ •Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Šȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Žœȱ ȱ Ž—ȱ ’·›Ž—œȱ ¢™Žœȱ Žȱ œ˜žœȬ¢™Žœȱ Šȱ ··ȱ •Šȱ œ˜ž›ŒŽȱ Žȱ ·‹ŠœȱŒ˜—œ’·›Š‹•ŽœǰȱŒŠ›ȱ’•ȱŽ¡’œŽȱŽȱ—˜–‹›Žž¡ȱŸŠ›’Š—œȱ–˜›™‘˜•˜’šžŽœǯȱŽȱŠ‹•ŽŠžȱ ŗȱ ›·œž–Žȱ •Žœȱ ™›’—Œ’™Š•Žœȱ ·Ÿ˜•ž’˜—œȱ Žȱ ŒŽŽȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ǯȱ Žȱ ™›Ž–’Ž›ȱ œ¢œ¸–Žȱ Žȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱœŠ—Š›ȱŠȱ··ȱ·•Š‹˜›·ȱ™Š›ȱ ˜›—ȱŽȱ—Ž›•’—ŽȱŽ—ȱŗşśŞǰȱœž›ȱž—Žȱœ·›’ŽȱŽȱřşȱ ŒŠœȱ ǻ ˜›—ȱ Š—ȱ —Ž›•’—Žǰȱ ŗşśŞǼǯȱ œœŽ—’Ž••Ž–Ž—ȱ ‹Šœ·ȱ œž›ȱ •Šȱ –˜›™‘˜•˜’Žǰȱ ’•ȱ ›ŽŒ˜——Š’œœŠ’ȱ •ȂŽ¡’œŽ—ŒŽȱ Žȱ Śȱ ›Š—œȱ ›˜ž™Žœȱ Žȱ ȱDZȱ •Žœȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žœȱ Š•Ÿ·˜•Š’›Žœȱ ǻǼǰȱ •Žœȱ ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žœȱ Ž–‹›¢˜——Š’›Žœȱ ǻǼǰȱ •Žœȱ ȱ Žȱ ¢™Žȱ‹˜›¢˜ÊŽœȱŽȱ•Žœȱ›‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Žœȱ™•·˜–˜›™‘Žœǯȱ ȱ Žȱ —˜–‹›ŽžœŽœȱ Šž›Žœȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—œȱ ˜—ȱ Ž—œž’Žȱ ··ȱ ™›˜™˜œ·Žœǰȱ ˜—ȱ •Šȱ Œ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ Œ¢˜Ȭ‘’œ˜•˜’šžŽȱ Žȱ Š•–Ž›ȱ Ž—ȱ ŗşŝŞǰȱ ŒŽ••Žȱ Žȱ •Šȱ ˜Œ’··ȱ —Ž›—Š’˜—Š•Žȱ ȇ—Œ˜•˜’Žȱ ·’Š›’šžŽȱ ǻ Ǽȱ Ž—ȱ ŗşŞşȱ ǻŠ’••Šžȱ Žȱ Š•ǯǰȱ ŗşŞşǼǰȱ Žȱ ŒŽ••Žȱ žȱ Š’˜—Š•ȱ Š—ŒŽ›ȱ —œ’žŽȱ ǻ ǼȱŽ—ȱ ŗşşŖȱ ǻŠ›‘Š–ǰȱ ŘŖŖŗǼǯȱ ȂŽœȱ Ž—ȱ ŗşşśȱ šžŽȱ œŽ›Šȱ ·•Š‹˜›·Žȱ ™˜ž›ȱ •Žœȱȱ™·’Š›’šžŽœȱ•Ȃ —Ž›—Š’˜—Š•ȱ•Šœœ’’ŒŠ’˜—ȱ˜ȱ‘Š‹˜–¢˜œŠ›Œ˜–Šȱǻ Ǽǰȱšž’ȱœŽ›Šȱ •Š›Ž–Ž—ȱ Š˜™·Žȱ ™Š›ȱ •Šȱ Œ˜––ž—Šž·ȱ –·’ŒŠ•Žȱ ǻŽ ˜—ǰȱ

Références

Documents relatifs

(c) Compared neuronal responses to tastants with approximately the same osmolarity show that responses are lower for non specific substances like glucose (GLU) and

Evaluation of the capability of the PCV2 genome to encode miRNAs: lack of viral miRNA expression in an experimental infection... MicroRNAs (miRNAs) are a new class of small

We compare the use of the classic estimator for the sample mean and SCM to the FP estimator for the clustering of the Indian Pines scene using the Hotelling’s T 2 statistic (4) and

We build a generalized money demand micro-founded model which allows a change in the relative liquidity degree of the euro against the Romanian leu.. The long-run

By simple definition of what it is, an anomaly may consist of either outliers or small-size clusters, depending on the aggregation level of flows in Y (cf Table I). We use EA on top

SHIPS and Structure were the most accurate methods when applied to simulated datasets both in terms of estimating the correct number of clusters K and assigning individuals

Remarkably osa-miR827a, a rice miRNA homolog to ath- miR827, had escaped identification by high-throughput sequencing in rice [10,11]. A simple hypothesis is that some conserved

In other words, if one considers, as in RMZL12, that the source of tidal dissipation is restricted to the core, it seems obvious that one has to relate the tidal dissipation in the