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Mechanisms underlying differential expression of interleukin-8 in breast cancer cells.

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Academic year: 2021

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HAL Id: inserm-00143639

https://www.hal.inserm.fr/inserm-00143639

Submitted on 27 Apr 2007

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Mechanisms underlying differential expression of

interleukin-8 in breast cancer cells.

Ariane Freund, Valérie Jolivel, Sébastien Durand, Nathalie Kersual, Dany

Chalbos, Carine Chavey, Françoise Vignon, Gwendal Lazennec

To cite this version:

Ariane Freund, Valérie Jolivel, Sébastien Durand, Nathalie Kersual, Dany Chalbos, et al.. Mechanisms underlying differential expression of interleukin-8 in breast cancer cells.. Oncogene, Nature Publishing Group, 2004, 23 (36), pp.6105-14. �10.1038/sj.onc.1207815�. �inserm-00143639�

(2)

IL8 ng/ml/mil lion Cell s/ 48h

0

200

400

600

800

1000

1200

NT IL1 α IL1 β TNF α

MDA-MB-231

Fig. 1

NT IL1 α IL1 β TNF α

MCF-7

0

40

80

120

160

200

IL8 ng/ml/mil lion Cell s/ 48h

(3)

A

D

B

Fig. 2

MDA-MB-2

3

1

MCF-7

IL-8

rS9

0 20 40 60 80 100 MDA-MB-231 MCF-7 IL-8 tr a n s c ri p tion r a te

xp2

xp2-IL8 xp2-IL8 AS

MCF-7

MDA-MB-231

IL8 RNA l e v e ls

0

5000

10000

15000

20000

25000

Xp 2-IL-8 / Xp2 rat io 0 100 200 300 400 500 600 700 MDA-MB-231 MDA-MB-436 CAMA-1 MCF-7 100 200 300 400 0 MDA-MB-231 MDA-MB-436 IL 8 n g /ml/ m illi o n Ce ll s /4 8 h CAMA-1 MCF-7

C

0 20 40 60 80 100 MDA-MB-231 MCF-7 R e la ti v e L u c if e rase Ac ti v it y

(4)

-27

2

-98

-50

04

0

0

0

8000

12000

1

6000

20000

Relative LUC

Activity

MDA-MB-231

MCF-7

-1

481

AP-1 C/EB P NF-κB LUC

Fig. 3

(5)

LUC -1481 AP-1 C/EBP NF-κB MDA-MB-231 MCF-7 0 4000 8000 12000 16000

Relative LUC Activity

MCF-7

MDA-MB-231

+

+

1 2 3

+

+

1 2 3

+

+

1 2 3

AP-1

C/EBP

NF-κB

-1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB -1481 AP-1 C/EBP NF-κB

X

X

X

X

X

X

X

X

X

X

X

X

Fig. 4

A

B

LUC LUC LUC LUC LUC LUC LUC

MCF-7

MDA-MB-2

3

1

HDAC-1

(6)

Fig. 5

C/EBP

δ

C/EBP

β

NF-κB

C/EBP

C/EBP

α

-MDA-MB-231

C

Ab

Comp

A

B

c-Jun

Fra-1

Fra-2

C/EBP

AP-1

c-fos

-MDA-MB-231

C

Ab

Comp

C

1

2

3

4

5

6

7

8

p65

c-Rel

p52

AP-1

NF-κB

p50

-MDA-MB-231

C

Ab

Comp

RelB

9

D

C/EBP

β

C/EBP

α

p50

p65

Fra-1

Fra-2

c-Jun

Actin

M C F -7 M D A -M D -23 1

(7)

0

5000

10000

15000

20000

25000

C

JDP-1

JDP-2 Tam67

Relative LUC

Activity

MDA-MB-231

MCF-7

AP1-TK-CAT

MDA-MB-231

MCF-7

0

20

40

60

80

100

Relative CAT Activity

Fig. 6

A

(8)

MCF-7

MDA-MB-231

Relative LUC Activity

NFκB-LUC 0 4000 8000 12000 16000 20000

Fig. 7

A

B

MDA-MB-231

MCF-7

0

5000

10000

15000

20000

25000

Ad5

Ad-IκB

Re la tiv e LU C A c tiv it y

C

0 4000 8000 12000 16000 xp2-IL-8 NFκB-LUC Relative LUC activ it y control E2 ER ER + E2 0 20 40 60 80 100 120 AP1-TK-CAT Relative CAT act iv ity

(9)

0

50

100

150

200

250

300

Ad5

Ad-IκB

IL8 ng/ml/mil lion Cell s/ 48h

Fig. 8

0

50

100

150

200

250

C

GFP Fra-1 Fra-2 c-Jun

IL8 ng/ml/mil lion Cell s/ 48h

Ad5

Ad-IκB

0

20

40

60

80

100

120

% of control

C

A

B

c-Jun

Fra-1

actin

Fra-2

actin

C Fra-1 c-Jun C Fra-2

0

5000

10000

15000

20000

25000

30000

35000

40000

45000

Fra-1 + Fra-2 + c-Jun

p50 + p65

C/EBPα + C/EBPβ

-

-

+

- + - + +

-

-

-

+ - + + +

-

+

-

- + + - +

Relative LUC Activity

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