HAL Id: tel-01148105
https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01148105
Submitted on 4 May 2015
HAL is a multi-disciplinary open access archive for the deposit and dissemination of sci- entific research documents, whether they are pub- lished or not. The documents may come from teaching and research institutions in France or abroad, or from public or private research centers.
L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destinée au dépôt et à la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, émanant des établissements d’enseignement et de recherche français ou étrangers, des laboratoires publics ou privés.
Exploration du réseau d’interactions impliqué dans la maintenance génomique de l’Archaea hyperthermophile
Pyrococcus abyssi
Pierre-François Pluchon
To cite this version:
Pierre-François Pluchon. Exploration du réseau d’interactions impliqué dans la maintenance génomique de l’Archaea hyperthermophile Pyrococcus abyssi. Biologie moléculaire. Université de Bretagne occidentale - Brest, 2012. Français. �NNT : 2012BRES0070�. �tel-01148105�
THÈSE / UNIVERSITÉ DE BRETAGNE OCCIDENTALE
sous le sceau de l’Université européenne de Bretagne pour obtenir le titre de DOCTEUR DE L’UNIVERSITÉ DE BRETAGNE OCCIDENTALE
Mention : Biologie Moléculaire & Cellulaire École Doctorale: EDSM
présentée par
Pierre-François Pluchon
Préparée au Laboratoire de Microbiologie des Environnements Extrêmes - UMR6197
Exploration du réseau d’interactions impliqué dans la maintenance génomique de l'Archaea hyperthermophile Pyrococcus abyssi
Thèse soutenue le 18 décembre 2012 devant le jury composé de :
Docteur Hannu MYLLYKALLIO
Laboratoire d’Optique et Biosciences. Ecole Polytechnique.
Rapporteur.
Docteur Laurent TERRADOT
Biologie structurale des complexes macromoléculaires bactériens, IBCP. Rapporteur
Professeur Mohammed JEBBAR
Laboratoire de Microbiologie des Environnements Extrêmes, IUEM. Examinateur.
Professeur Viannet PICHERAU
Laboratoire des Sciences de l’Environnement Marin, IUEM. Examinateur.
Docteur Didier FLAMENT
IFREMER, Laboratoire de Microbiologie des Environnements Extrêmes. Directeur de thèse.
! " # $ % & & '
' ( ) ' ) ) * ' + ( ( & $
$ , $
! ! " #
$ % &
' % & (
) * + (
, -
) * % -
. / *
" 0,+1
1! * / * + 2
$ 3 * + 411 5 / 11 )2
1! (
+ 2 ! (
26+
7 %
' 8
7 8
)+ 9 ,, (
+ % (
) * + -
) %
) :" + +:)
) :" :)
) 4' ' ) '')5
$ ) 8
$ ) 9 % (
8 + 9 % : ; % 4+9:;5 $
) % % * + $
% ! $
% ! $
" " & $
) * $$
2 22,+ $8
. $8
% % $8
2 % $8
6 % ## $8
< % * $(
% 3 # $
$ < & $-
22,+ % & 8
2 * 8
$ ) 88
$ 2 # = 88
$ ' # * ## (
$ 2 * " (
$ ' # * ## " (
$ $ ' * ($
$ 8 ! (
$ ( 7
$ 2 # & % & (
$ - ! % & * -(
$ 2 *
$ ) * )2 >)+ 2
$ )2 * # *
$ )2 * #
8 ) : % * %
8 2 &
8 + :" ) 8
8 ) " -
( 6 $
' ' 8
6 2 ! 8
2 * " 8
6 % % 8
2 # = 8
$ 2 # * ## " & 8
8 1 8$
( , # # & 8$
6 ! % & 88
- % 8(
1 8(
7 % / ! % & > & )+ -
7 % / ! % & ! -
7 % / ) ! # ?
7 % / % @ 9 %
7 % $ / 9!
7 % 8/ ! #
7 % (/ 2 ! A& % & $
7 % / 6 : !
7 % -/ ' * '6'
7 % / 2 " 3 *
7 % / 6 " 6'0 : !
7 % / 1 * % 11 )2 $
7 % / 1 * + 2 ! % ) 8- " * + -
7 % / + ! 2! ! 3 +
7 % $/ 1 B % C
7 % 8/ 2 26+ : !
7 % (/ 1 " > % <
7 % / ' % # % $
7 % - / ' # % *.D ? D ? 8
7 % / 7
7 % / % E + ! -
7 % / ) .8> ! % '0'<
7 % / 2 +:)
7 % / :" )
7 % $ / '') ? ! $
7 % 8/ % & 1 (
7 % ( / ' 1 ?
7 % / 2 % ? $
$
7 % - / ! $
7 % / 1 22,+ $$
7 % / ' * % $(
7 % / ' " $
7 % / 22,+ % * + ? : ! 8
7 % / 22,+ " % * + ? 8
7 % $ / 22,+ ? 8
7 % 8 / 22,+ < D D 8
7 % ( / 22,+ % & 2 ! ; ## " 8$
7 % / 1 % " 8(
7 % - / :" # = 8-
7 % / ' (
7 % / :## * " 2 ! (
7 % / 2 # * ## " * " 26+ (
7 % / :## " 2 (
7 % / 6 * " % '1 (8
7 % $ / + * & # * (
7 % 8 / 1 * # '1 (-
7 % ( / 2 # * # % #
7 % / 1 ' * 2>'1 26+ 8
7 % - / 2 % " -
7 % $ / 6 # --
7 % $ / 0 " ##
7 % $ / : #
7 % $ / :## )2 *
7 % $ / :## )2
7 % $$/ E )2 )+ !
7 % $8/ ) #
7 % $(/ +:)
8
7 % $ /2 8 3 F
7 % $- / ) " $
7 % 8 / G * $
7 % 8 / ' ! E + $
7 % 8 / E )+ ! $8
7 % 8 / 1 '6' H2 $(
7 % 8 / ' * $
7 % 8$ / 1 8
7 % 88 / ) & ! " % ?lift. 8
< / 2 % & % )2 : ! $
< / 7 # ## # * + 2 !
< / 2 % 26+ ?
< / 2 '') # ? : ! $
< $ / 0 % ' 40 % 5 8
< 8 / 2 # = " E 2>'1 8-
< ( / 2 % # * "
< / 2 26+ # 2>'1 $
< - / ) 2>'1 # (
< / ) * % B C / $
+ / "!) + &
)+ / ) &
<2 / <
:) / ) :"
+<2 / "! + < 2
1 / 6
(
: < / ! & &
9 / 9!
90<I < # 9 ? 0
, , / , # G
,2<0 / , ! >J> >%
/ >
G6 / G 6
'') / )
'1 / 1 '
+:) / ) :" +
+9:;/ + 9 % : ; %
.)6 / 6 " ) *. %
.)7 / 5
/
2 1 / 2 ## 1
26) / 2 ! 6 )
2:0/ 2 ! ! 0 !
2,2 / 26+ , % 2
22,+/ ) E >
)9 9)/ ) 9 %
12) / ) 2 & 1 #
1)/ 1 % # )
11 / 2 3 * +
<6)/ ) 6 3 <
GK / G
:6.GK:)<: :1 )69 :
% " 2 ) L
# " & ! ! & & %
! % % 6 #
" ## % " &
: -(( % M 7 " & * )+ 4 )+ 5
& * # " % % ! % &
: ! 4M 7 " -((5 & * )+ 81 "
& & " # N ! & > ##
! 3 * & 6 4 5 :
% * % N #
/ : ! 4M 7 " -((5 : -- 6 M
# /
: D ! 4M L -- 5 ! % 3 O
% O #
42 -I ; ! 5 ! % # % ! N
# N 4B G 6 C G6 5
O * % 4 # 5
* # * ! % & %% %
% : D !
*
# * % # %
! % "
## * * & 4 9
0 I P 9 O 5 * % & & Q %
! & O *
% & 4 > 7 5 4 0. %
/ ( O 5 , " % # /
6 : ! % #
I < % L 47 % 5
- !"!# $ " " % " &' "! ( ) )&"# &*! * * *!$ "' * * +& *,
4; ! 5
- !"!# $ & !* " " " " &' "! ( ( +& " ' & &,
* ! $( - -- % 4 >
7 5
6: G : )69 :
%
% $ R : # N
& % # % 4
2 S -5 %
B C 4+% T % 5 # *
# 6 ? % +':> # 3 * "! &
## # " : !
& " 4 3 # 5 ##
* " %
> 4' 9 ---5 ? *
. % &
% % % !
# & " 40 . D 5 %
# 3 A& 4L M $5 %
A& " # ! %
B # C %
! & % % B C 4L
M $I ' D P 5 * * % : !
% # % ! % & 47 % 5 'N U 3 U %
& # ? 4B 9 ? 0 < # C 90<5 4L ' D
5 & 90< %
%% V * " * N " & " 6 !
* % # # !
## % 4 > 5
90<
# * % " !
* 4 > 5
. ! & # # " ( * #! " * ( * * *#/+ * "0 +&# "" * ' 1 * ' & &,
4 > 0 5
G # & &
% ! * +> ! & 6
! % ! !
? # > &
! " % 1> ! 4L LS % -- I % 6 5
: ! % ! > &
% ! > ## & ##
" & ! ! & 3 41 ---5
O 3 4 ' ! 5
,.<.2:1
&
# " & & 2 # & &
% # # 4 % -- 5
% & " & ! & " N , " < "
! > & % &
9 * * "!%
& & * % " N #
3 47 % 5 ' % " " N
& % % #
" "
% 49 + 5
! & 3 W6
46 85 ! 4 5 " W6 40
# D -5 G 4 5
W 3 % 4 3
W65 4L # ! 5
3 # 4 9X 5 4 D D -( 5
3 9 - 4) ' -- 5
' # ! # 4
5 " % 3 " 3 # 3 "
40 ; 5 47 % $5
2 & &++ # + ! &# 3 # (!" + "&# " ( * &" *+ * &(& #!*,
4 # + * # &( !* *#&"' ,
6 " " ! % (6 ,
! "
% 3 * + & 40 ; 5
% # % & % 3
# & ? % 2 4 $ '2 3 > $ 5
6 ?
" ! ! 4 T % 5 : @
O & *3 W6 3 $ % 2 B C
69 4T % -5
6 ## " N # & * & &
% " N % " N "
6 & " N
* % " ! 49 5 #
" " ## % " &
! # " "
* 3 & 9 $ W6
3 % 4> W65
:1 :6.1P1<:':1 9P ).<9:)' GH 2).7.+ 1
: -(( & % % % ; 6 % E:& 3 8
# # & E "
* Y * # ## 3 % #
" 46 ! -(-5 % %
! " & 2 # & ,
! ! & & " # % ?
& 49 D 7 - 5 6 # %
## * & * # 3 " % W6
47 % 85 ! " # %
4 W6 3 W65 # " & 4 " #
5 4, Z 8 -- 5 * #
3 % & # *
5 * * ' * ( # +& * 0 "( *
6 ! 4[G ! # 5 % % & 3 * % #
6 & * % & ,
" * % : ! G & O
! * ! & 6 > #
% * * % * "! "!
% & ! # " " N
* # O & * " ? # "
% & 4 \ W65 & * * % !
! , " %
# & # 6
) 2 2 & *G #
* 46 1 -5 6* * # ! "
# & * *
$ !"#$#$$% &! ' '. : : : ' ,+<:+ +6: 0:+.',]G:
: ! ## 3 * < 0:$
* ! 3 # # O *.
2 # & 40 69 ) .++,:) -- 5 > % !
> % # % & &
$
8( W6 3 & 4-8W65
% * & 3 4 '2 5
W6 # & 3
^ % = 3 " # % 1 &
% &
* * 9 6. &
9 1 & * # ! 40 # ! ) 5
N & 4: ) ! -- 5
% 0:$ & 0 -- * % 46
5 % & %
! 47 % (5 & 4 (U 065 (8$
& * 4 0<$5 & &
(8 4 / 5 %
3 3 & G " %
* % # 3 ! & 40 M % 5
% ( % # " #
* + 3 G %
& * + ? %
: ! & # "
6 " + *&7$ !"!# $ ,
% I ) % 2 ! 0 D +) 42 X > $5 4 /@@___> > # @5 /
& 3 ! % 4,# \ + 0 ! 5
* % 4 $5
" 4'! !D I ' % 5 %
2 ! 3 "
? 40 % ) I 9 D 7 $I
8
9 D (I ' >6 + (I ) 9 D (I 2 K
I 6 ) -I 6 I ? 0 ? I 6 ?
% I 0 % ) 5 : & !
% ! & & * + 4 -- 5
& % * + ` 3 * N & %
42 K 5 %% * " * ! % %
" N ##
(
- 8 9
% * #
* % % * %
% & * % &
& * # % &
* ! % & %
* + * & O %
-8 - : ! # & * #
" * +
% ! * + * & N %
# & * +
% " ! 49 5 * N
* + & *3 " * +
3 @
4 +! % -( I -- 5 6 &
% 3 -8W6 & # & ?
42 K 5 " ? 9 3
? ! 40 % 6 5 6 %% &
! " N ## %
6 % ! * % %
& 3 # #
! # : ! ! % & 2
* + ?
* % & # & # & * 3 O * %
*9 % &
?
; > Q &
* + ;* " ## & #
>3> * + #
% & ?
):2 ,6 <,.+ : * +
: -$ ' _ ' 7 D 1 & * + &
# Y " 3 ! *
4' 1 -$ 5 ! * + !
& 4+ D T 5 * + ! & * +
* + % ! & " ! &
4) ! > 2 ? 5 1 !
! > & % &
I * * % 3
: ! # %
# % ( * *
"
: + & & * " ( * ! * + * &'#! "* '& # * # ' & &,
5 ' * + * % 3 # % *.D ? D 5 2 &
3 &
6 ? 3 $ a
47 % 5 % * % * + !
? % : !
6 # ! * " *
4L M $5
- ,+,<, <,.+
* % * * * ##
% % G # . 2 4. % % 2 5
# & * % *! * * +
# & 3 & * + " ? # *
3 * + & 3
* + . &
* % * +
):6.++ ,11 +6: : *.),0,+: : ):2 ,6 <,.+
6 ? *! & * % 4. 65 6 % ><
6 # Q O 3 * %
: ! & 3 " * % / & )1
4 ) 1 & 5 & " * %
4. % ) 6 "5 .)6 8 & . >8 4 % %
" >85
6 ? * %
" % & &
% 42 b
5 % . 2 # % 4G
1 --(5 G % % & : ! 8 .
# O 3 * + 2 ! * # 8@
" * % # # " 3 * +
6 ? 8@. & * &
# & 3 & 6 4' % 7 5 6 %
* & >< " & 4 5 6
& .) 4. % ) % "5 .)
% 8@
4 1 I 1 % % 5 , ,, &
# <2 c 4 <2 _ 5 &
,,, 4B _ % " C M95 & *
3 * + 8@ * +
& & 3 * + 4 6 (I 0 1 _
(5 6 * + & &
* 6 ? +)6> . .
4 & 1 (5
& * + 3 * % *! #
> " % % #
& * % # # 3 *
.GK:)<G): : .G : 9: ,6: / *9: ,6 1: ):2 ,6 <,K:
# & * + #
# * ! & * + %
* + 3
& * : ! %% & ?!
* % * ! ! 4+<2 5 " * +
# 42 2 5
* % % "
41 0 5 ! % * +
: + $*d * <2 +> 4
1 _ -5 * : ! " 4'6'5
6* " " " % 4' >(5 &
& ! * % '6' ! # Q G "
& * '6' 8 ( + Ed $E I 3
* + <2 + " ' ' $
* 6 8 % ' >( 4 <! I 7 %
5
, & " '6' # 3 % : ! '6'
*d$* <2 <2 +
% * + 4L L I L M $5
& % '6' Y *
% & " '6' " &
* # & " "
% # 4L M $5 +>
3 e 47 5 4# % 5 6 & 3
# * 3 * + % 3 " 4J> 5
& ? & 3 * 4 !
' 0 (5 : 6> <2 c
* 6 3 4 ! 85 ,
" # / J> J\f\J 6> M9 1
& % * %% V % 4; D 6 %
85 & '6'
% " * '6' 41 D D L -5 47 % -5
; !'&" *+ * ** * <&'# ) #! ! '&* ( ,
5 ' * " & '6' % * $* 5 '
* + " " '6' 65 ' 4g % h5
% 1 D D -
* 8@. '6' ?
41 0 _ D I L _ 1 $5
* 3 * % 8@ 6
'6' 3 * % * 3 8@ 41 ; % 5 *
'6' ? +)6> 4 & 1
(5
* * # 3 * % *
& * "
>
: 6.'2 :H: 0,+1
" 0,+1 * " & #
, ? 4< D ! L 5 "
& # 3 * & % '6'
" 0,+1 : ! 1 $ 2 # 2 # 2 # 40,+1 !
O B % > > > C % # $> > > ## " 5 6
%% %
" ? * # * % " 0,+1
" 0,+1$ 0,+1 : & 1 $ 2 #
2 # 2 # G 0,+1 '6'
% = 3 % B P 9! C 4P 95 0,+1$ >
# * 0,+1 3 * " 4' D ! 85
1 0,+1 & & / 1 0,+1 % '6'
## * * 4' D !
85 : * '6' * O "
0,+1 4P 7 O D 5 %% " 0,+1 #
V %
= > #! " * # ' + ? * @ < " # &# "
5 1 8@ '6' 0,+1 2 )2 5 , *
6 ? : ! * '6' " 0,+1 3 6 $ 6 " 6'0
# " & % * : ! 47 %
5 4' D L 5 6 ? # ) ; 0 + 40,+1
+ 5 > " 0,+1 ? ( ( 4 1 %
5 6 * % # $ ? *
0 + " 0,+1 4 2 5 " 6'0 ? : !
& # %
+ ? 8 '& # # ' & &
, & * # & O & > 3 # %
6'0 * " 6'0 %
* * / * ## *
* + * #
* # " " & %
* N * & * N
1P+<9:1: : * '.)6: / * + 2),' 1:
! 3 + ! *
# % & 4B C5 6 3 * !
% 2 : ! # % & &
* !
0 4' # " 5 , * % *
/ +> # " T cO V * + G
)+ ! & ! :
6> & 3 6 ? ! *
> $ 4 ! & % 5 * +
! f # " > + ! 4 ? L 5
& 8 4 % # $ 5
8 # " 4 9 D (5
! & & 8 % * " ! &
4& ! )+ 5 : ! %
! # H 4 >1 " 2 % $5 6 ? : !
6 + ! )+ 4' % + 5 +
% I + ! 4 & I
L I >1 " 5 "! ! # 4 7 7
5 ! 4B ! ? C
2 <549 0 5 6 & %% * +
* + * 3 O
% 0 # % : &
% )+ * " 4: % >
9 D % M 5 . N % & 1 0 !
)+ 4T ) % 5
* + % '6' 0 4' D ! 85 6
O ? V % * +
!
$ :1 2).<:,+:1 : , ,1.+ * + 1,'2 : ),+/ 11 :< )2
11 ? )2 4) 2 5 ? : !
* +
# & * + 11 3
* + 11 * +
3 # " : #
& 11 )2 N . % @ . % > %
4B . ># C5 & 3 * + . # # J
4B # > J> C5 J> # ## * f 42 ! D D
i7 ! Z$ -5 & . #
11 )2 %% 3 * + *. >#
*
6 ? 11 * D . ># 47 % 5 11
" N ) & 3 " *
* . ># 11 &
" & % & ! & % 3
* + 41 L ? 5 )2 : ! & 3
( D )2 ( . # )2 . >#
M9 )2 . ># 47 % 5 )2 : ! %
& * + 4< 5 47 %
L 8I T 8I 2 D % -I 9 5 )2 : !
% % * * )+ ! % 41 D D 7
5
$ - ' !+& ( < &" *&# " ( * #! " * # > ,
. # . . # # a " !
& & > #! " * ( & +& "# "&"' !" + $ "# & **&"# &) ' > '& # ,
Protéine partenaire Site d'interaction sur RPA Site d'interaction sur le partenaire Méthode
Cytidine Deaminase RPA32 Indéterminé e
Uracile-DNA glycosylase RPA32163–217 29–75, N-terminus cd
Rad52 RPA70169–326 221–280 ac
RPA32224–271 b
SV40 T antigen RPA70181–327 Origin binding domain 131–249 ab
RPA32C c
XPA RPA70183–296 20–46 be
RPA32C a
p53 RPA70N1–120 38–58 ace
ATRIP RPA70N 1–107, other? e
FACT RPA70N Pob3237–477 ade
Rad51 RPA70181–291 1–93 ac
Werner syndrome helicase RPA70168–308 N-terminal acidic region, C-terminus abd Bloom syndrome helicase RPA70168–308 N-terminal acidic region, C-terminus abd
Papillomavirus E1 RPA70181–291 Indeterminé ab
Parvovirus NS1 RPA70, RPA32 Indeterminé b
Pol-prim RPA701–327 Primase p48/58 ab
RPA32/14?
RF-C RPA70 p140, p40, p28 b
Rad9 RPA70, RPA32 Indeterminé a
Rad17 RPA70, RPA32/14 Indeterminé ae
p53BP1 RPA70, RPA32 Indeterminé a
Nucleolin RPA14 645–707 ae
BRCA2 Indeterminé N-terminus ae
XPG Indeterminé Indeterminé ae
XPF–ERCC1 Indeterminé Indeterminé ae
Mre11–Rad50–Nbs1 Indeterminé Indeterminé e
' / 2 # E ## I : ,1 I )'+I P 9I 47 % L 85,
8
6 ? # % 11 : %
: ! % )2 & * % % 11
6 # ? 4 . # %
" 6> 5 & & # " * +
. # 11 6 )2
: ! 4L M _ 5 % 3 * +
# ? : ! * 46 j[ 1 ? -- 5 4L !
1 D -- 5 6 % & )2 : !
% )2 4' )2 \ 5
* 4) ' ! I ) $I ) ' L !
$5 ! ' )2 ## 3 * + 4 )
$5 * " *. >7 T 7 % 6H 6H 6H 9 ? )2
% 4) ' L ! $5 4L ! 1 D -- 5 42 %
5 6 ? )2 ! * + !
4) ' ! 5
6 ? 3 * + # 4 65 %
6 % 4& N
41D _! ' + 5 ) 6 N
" ) & # 11
" 6 " % * + %% 6
* + 41D _! ' + 5 )2 &
## 2# )2 * % )
4L , 5
: " ? )2 : ! 11 6
? & * . # 6>
# " 6> * & 3 * + 4L M _ 5 ,
& * * N & &
? 6 M & 11 #
# & * + 46
M $5 6 %% 11 6 %
* +
# 11 )2 3 # * + & 3 #
B C 4 & 5 # & "
& * + " 11
# #
( 1P+<9:1: G ),+ 6.'2 :':+< ,):
! ## # I +
! ' * + ! " # &
3 % ! 3 * + ; >
+ ! # 26+ )7>6
+ 2. P':) 1:1
+ ! % * O & "!
* * +
? * # * ?!
% O % !
O " !
+ ! ! # * * " *.9
+<2 * < !
4 + c +<2 kl + c c 2 5 & # ! & # " &
4% '% c5 # 3 #
+ ! % 3
% 4B # % C5 4B C5 4B C5 !
( % # 6 : H P 4 % L 54 5 6
% ! /
> / ! * 4 3 5
> # / :
! # 4L 5 # *
# *d$* " &
> * ##
> " * " * + /
6 ! # 42 85/
> * " *d$* ! m 4B # % C5 #
> * $*d * ! , *: 4B D C5
> * $* "! ! 4 )2 ! 5 ? ! J
> <2 & ? ! n
+ ! 4 + ,5 # ? 4 -$ 5
O * $ ! I 2 , 2 ,, 2 ,,, & " # 6
2 ,K 2 K & + ! # P G +
! * * +
% + ! #
& & - *# # " "'# " # 0 (! #! ( * ( 00! "# * 0&+ * (< > +! &* *,
7 + 2 ! 7 7
2 , ) > )
: D ! 2 n <
2 o )
2 p ) 4 5
q$3 q8
2 ,, )
2 , ) \ ) F
2 ,,
: D ! 2 r )
2 m )
2 s <
2 f ,
q$3 q8
2 ,,, ) q$3 q8
2 ) >) F q$3 q8
A
: D ! 2 J )2 t )
2 ^ )
2 u )
< )
2 H FF ) F
q 3 q$
B
2 ,K <2 K <
<
<
2 P <
: D ! 2 v <
2 w <
2 x <
2 ):K <
q 3 q
* + ! 2 ,,, 6 " %
?! 2 ,,, 6 ? : ! ! 2 f 2 r 2 m #
! 42 v 2 w 2 x 2 ):K 5 3 # P * +
! m % ! & * + ! r
! 47 D P I 0 % % $5
% # ! P H # !
2 ! 4< 5 :
# % 3 & 3 & 4B C5 !
* + : &
-
& ! 6 & * % 4 S D 2
5 6 ? : ! 2 ! 2 !
49 D 7 $5
2. P':) 1:
* % ! 3 !
% < ) 8- ! 6> " +>
41 7 5 47 % 5 & * ?!
& # 49y ' % 5
. # '# ( < > +! &* ( &'#! & 5; " ' + ? &) ' < ,
B # % C B C B C % "
% + % * 7 D
' ! * ! * + 3 * +
)+ ' : 49 D 7 $5 !
% 26+ 2,2> " # % 4) 9 D (5
* 26+ 3 ! %
* + )+ 49 D 7 $5
! z
! * N % 47 %% 2 5
* > 4g > h5 40 %% 7 %%
---5 6 N * * * ! # *
* ! " % 4 -- I M %
I ) ) -5 & ! N % * %
* " % # 4
5 4) ) -5 !
* + % 40 % ) 5 47 % 5
2 +! &* ( > ' '' * & ** ! @ " ( ",
4 5 +W2 / 7 < 40 % ) 5
! 6 % " " %
! ,, ,,, N &
" 4 :" ) :)5 41 ; ! 5 :% * + 2 ! ,
& 2 > " > 0 * N !
# * % * + ! # P
B ! _ C 40 y? 1 ? 5
. % % & ! #
* % # #
& ! 3 * + * % * ?! 41 7 5
# 2 ! ! " 26)
2. P':) 1:
! * 4 2 5 & 292 & *
? ! : ! f m r 4 L -- 5 %
4 2 5 & * ! 41 ' 5 % 2
# ? : ! L <
% * 2 ! ## *d$*
" & 4 # %5 4< % 1 5 !
40 % ) 5 "
% *z *. 6
46 5 ' 2
& & * & ! )+ +
49 D 7 $5 : 26+ ! ! & * )+
+
% 2 & ! !
& ! % ! 49 D 7
$5 * * )+ 2
" + ! % & 26+
? : ! 4) 9 D (5 G ! * % 2
+ 3 2
2. P':) 1:1 P
! # P ! "
% " + ! # P #
? 4L L --8I & ,_ I 0 y? 1 ? 5 6
! & + % 6 ? 6
" # 2 ! > #
## * ! " * & 2 40 y? 1 ? 5 :
* + % ! ! #
% 47 % $5 6 ! #
6 ? % *
% 0/6 </ 41 D # D! 7 5
! # P * # ? : ! 4 & ,_ I 0 y? 1 ?
5
26+ ' :1<). : ):2 ,6 <,.+
6 ? : ! ! 3
# * B % C & * # %
% * ?! & # * * +
! *! %
!
6 ? * J> & # * + #
% ! 4K L 5 " % & # * ?!
% <2
6 ? : ! * 2 # % 6 + % 426+ 5 & V
4K L 5 # % *
& 26+ J> * % & 47 % $5 26+
4B 2 # % 6 + % C5 # " %
& / ' ! 4' ! 7 ? -( 5 #
> % ? ## ! ! & ,
26+ ! N
6 4 6 - 5 # 1 ! & *
! , * % N 4' _ - 5
26+ B _ ! C # :
*N # * # % " # 3 * +
26+ % B C 4K
L I ' 2# (5
4 # '# ' *#& " ( * C * ( " ' &+ D ( * # * ( +& " * ( ) )&"#
% 3 26+ 26+ J *
% 26+ ? 6
% 426+ 5 & : ! * % & *
( ( " % 26+ 426+ 5 26+ 4L ,
5 26+ " , 6 4,
6 5 26+ & & " , 6 3 * "
* 3 # B % C 26+ 3 * + 47 % $5
, 6 & 26+ # 2,2 4B 26+
% 2 C 2,2> "5 & 2,2\ " B ]"" "" C Y B C
& ! 4 , '5 B C ! % &
47 P5 B " C N ! 6 #
+ ! )7>6 7 > * + % 4' >6 j[ + (5 )+ 9
+ 1 ? 46 ? % 5 6 % 26+
# " # &
& 26+ & " # 26+
/ * + ! * + % * 7
& # % *.D ? D ? 4 5
& & . > #! " * "# & **&"# &) ' > ' 1 * ' & &,
* K L ' (
Protéine cliente Effets de l'interaction avec PCNA Fonction
DNA polymerase B (Pol B) Stimulation de l'activité polymérase Elongation de la réplication DNA polymerase D (Pol D) Stimulation de l'activité polymérase Elongation de la replication Replication factor C (RF-C) Chargement de PCNA sur l'ADN Initiation de la replication
DNA ligase Stimulation de l’activité ligase OFP
Flap endonuclease (Fen-1) Stimulation de l’activité nucléase OFP
RNase HII Régulation de l’activité OFP/Réparation
DNA polymerase Y1 (Pol Y1) Stimulation de l'activité polymérase Réparation
Radiation-sensitive mutant 2 (RAD2) Réparation
Uracil DNA glycosylase (UDG) Réparation
XPF Stimulation de l’activité nucléase Réparation
26+ : ! % % " # 47 % 85
" 4+:)5 4) 9 D 5
4'')5 4G ! --85 % " 4 :)5 4' L
' 5 26+ % + ! : ! J
t & 3 # H 4L L I ' % K 5
5 >& # "& * ( > '& # ,
% 2,2> " # 4' 2# (E,
7 6<:G) : 69 )0:':+< G 6 '2
*N # & * N %
* + G # * % B >
C 6 ? * p\ " & # 6 ? : ! 26+
% * + )7>6 4) 7 65 " \ *
% # % (
6 # '# # ( + "* "" ( ' + ? ' &+ %' &+ &( ( &'#! & 2,
6 3 * O 3 4B O C5 * ! +@ )+ % %
# ___ %4 $?5 L ' D
% )7>6 # ? )7>6
26+ : ! &
# & * # " %
@: ! # 49 D ) ## 5 6 ? )7>6 "
4% )7>6 )7>6 15 2 # & " )7>6
? : ## ? )7>6 #
% > & 42 7 5 & ? )7>6
% > & 3
" " % > & 46 , 5 G
% <2> 26+ )7>6 # %
$ : (/ ( ' & + "# ( ' &+ & * " 0&'# ( ' & + "#,
4L ' D 5
# " 26+ > )7>6 % # 26+
* & & % 26+ 3 * + )7>6 # ##
* + 26+ * <2 * * <2 )7>6 26+
" & 3 % * ! ! * <2
# 26+ * O )7>6 * + ! N % !
6 ? % 26+ )7>6 * ! !
* <2 & 26+ % * + )7>6 46 ,
---5 6 % * " & # * >
26+ " 26+ : ! 4' ! , 5 '
% 26+ * + )7>6 % * + ! 4)
9 D (5 26+ % * * + ! +
)7>6 49 D ) ## 5
% 26+ + ! * +
! % # * +
! +@ )+ # % # 4B # C5
N % * + % 6
# .D ? D
4B .D ? D 7 % 2 % C .725 ! %
$* # 4B # C5 * +
% & " 6 ? : !
?! 26+
8 ' <G) <,.+
# # & * +
*.72 )+ 9 7 > : !
# % O * + %
< # % *.D ? D
4 5 47 % -5 , & *.D ? D
26+ ' ! )+
% 1 " I ! 7 > * + % 26+ 4 >
5 # " # & & # "
! , & ##
* 26+ & % " %%
& 26+ # " # & 3 Y
26+ ? " % a
"
; (/ ( & +&# &# " ( * 0 & + "#* (< F&1&F ' 1 * ' & &,
5 2 4 5 7 4; 5 % 4 % 5 3 26+ > 4 # ; # % # 5 2
! * + 26+ % 7 > 5 & " # % *.D ? D !
65 7 * + % 4B D C5 & 6 O & *3 *
# % *.D ? D 4 5 % D ! % :5 % * "
* * % 4 5
7 2 :+ .+G6 : 1:
7 > $*> & z # & * + $*
! * # 4B D C5 * + 47 % -65
26+ 7 % ? : ! 2,2> ">, 6 4' >
6 + (5 * 7:+> 3 26+ % #
4< 9 D 5 : " 26+ 7:+>
# ## 4+ D + D % _ 5
& 7 4' L _ D ---I ' 5 3
3 * % % # 7 >
% N & & % + 9
* ! " GK 4' >6 +
(5
( )+ 1: 9 ,,
G " % N & ?
) 9,, 6 * % & ?
) 9 : ! & 3 & * + :
z & * + 46 6 -5
26+ 4 D ) O 5 )+ 9 ? #
% * + % & % "
* + * %
* + 49 5
% 3 )+ 9 ? )+ 9 ,, : 2,2> " 4' >
6 j[ + (5 # ! +@ )+ 4 ?
0 ? 5 # * % 7 > #
)+ 9,, 49 D 5 6 & %%
# % *.D ? D * " " )+ 9,,
? 6 % & &
% '' ? * * * ##
% " GK 4' >6 + (5 %
'' + & ! & & + 6
% & # * )+ 9,,
& ? : ! V % & )+ 9,, ? 3 O
& O
+ ,0 1:
+ % * + " #
4 ! 1 5 %
* + % ! #
$*2 *.9 & # % *.D ? D 6 ?! ! %
# ! 4M D ! I < D K O ! D
85 * + % 3 '2 <2 + c
# * ?! z + * '2 #
$* * + # + ! 4 +5 $* + O 3 &
% * ! "! # + %
## * # Q 3
G % ? # %
-= ' * ( ! '&# ",
5 : ! 5 65
* " % & ?
* & N % &
# ! &
2 " # 3 O # *
2 : !
3 *a ?
& ! # &
! &
% F N %
+ & % N # *
-
3 3 % * % " !
& ## ! %
):2 ) <,.+ : * +
%
% * + E + 3
* % * + * # & * % & ! &
% 47 % 5
- * &"( * ) * ( ! & &# " ( G # # * ( !* "* &** ' !*
< % ! * + , " (
* + " % 4 > #
% D! 5 & * ! * +
4 " 5 "
4 % "
% I +9:;5 & * * + ! 3 #
% & ##
% & ! %
# & 6* * ! % &
* * * +
# % N # & < %
! / %
" , # ? : !
# & & ?
: ! 6 ! & % * + ?
O ? * %
% * # ! : ! :
" * # %
):2 ) <,.+ 2 ) ):K:)1,.+ G .'' 0:
% * # &
* + % #
* + # 4 D -8 5 62 ! & !
! ! > ! #
O N ! G 62 ,, ?
% ' , 4L D 0 5 G "
% .8> D! % # % D! * + 3
! % 6 D! #
* 0< .0< '0'< 4:6/ 8 5 *
% '0'< # % * .8> D! % D! #
O 42 %% I 2 % K 5 2
D! 3 D!
& G * * + D! #
4 .0<5 % ## 3 D! 42 % K 5
-- ! & &# " ( * !* ( * 5%+ # &" " & & #! " 8
):2 ) <,.+ 2 ) :H6,1,.+ : +G6 :.<, : +:)
" 4+:)5 !
% % % !
, # ? : ! +:) " # %
% * ! + ! *
? * Y +:) &
% & H % ! 6 D ! :
! " % * +
6 ? +:) % " G 6 6 " @
% * " # % * + % 6 ? : !
+:) " Y ? & 4)
9 D 5 :% " # +:) # / 0 0 ) 400)5
< 6 ) 4<6)5 47 ' I 9 _ 1 D 5 ,
## % 00) * *
* + % & % *
< & <6) % !
* )+ ! , %% & # +:)
: ! & % G 6 # ?
* # % 4L M $5 O
! * " * % ! +:) :
% +:) : ! # %
4) M 5 47 % 5 . % H27 7 4H205
H2 H2 6 " % & ? : ! "
* : ! 4<7,,95 O * " "
* " * +:) # & " % &
% 4H2 H265 ? : ! % 6
%% * " * # % 11 )2
" # % '
" )2 +)6> 3 "
" GK 4 K " ( ' 6 ! $5 " 26+ &
+:) 4) M 5
6 ? 6 1 11 z +
> * + & % 46 M
$5 , %% & 11 3 * + * +
% & ##
+:)
* % 00) %% * " ? *
<6) ## * ! * <6) * )+ 2 ! 4)+ 25 &
% % 6 &
## 4) + (5 :% %
<6) ! 4'# 61 @61 5 * #
? * 4 ? 0S ? (5 , & * " N ## 60)
* " * " * <6)
2 *! 3 O & * " * " *
? ! 6 %
+:) ! ! & %% & 9
# +:) !
6 ! # * & ' M 3 " "
% +:) &
H2 H2 * %
* # $* # H27 " * % %%
! & 11 & )2 ? 6
* + 1 *# 47 % 5 4) I 6 M $I
+ _ ' !>) $I ) M $I ) M $I ) # ' D
8I 9 ) I ) # I ) 6 I M -I 9
6 %% I ) M I ) # ) I ) M 5
-. > #! " * ( ' & & # ( *# # "
H " &"( I # -= =E
):2 ) <,.+ 2 ) :H6,1,.+ : 1: :)
! " 4 :)5 % * #
# % & & * "! * D!
! ! 4L ' D 5 6 # &
? % # & % &
:) & % " %
2 4 & ! & 5 * %
$* 2 , " " I
B 1 % + ) C 41+> :)5I B % 2 C 4 2> :)5 "
O 1+> :) : ! * ! J &
% & " % $* )2 % = 3 )2 * " $*
% 3 * " * .9 * + % 2> :) ! O
% # # % * +
& 7 > # % O # % * + % :)
: ! # %
-2 &* ?' * " & ,
5 ' # :) : ! 4L ' D 5 5 ' :) 41 ; ! 5
" & ?! % &
? 6 #
> + % ! ! z 0>G * + #
* * > ! # G'2 6
?! z * % & 4 25 6 2 V
$* 2 * " * + !
% * + ! "
? & $* 4 )25 * )2 !
! * + % " " O 41 ; !
5 6 %% & :) : !
):2 ) <,.+ :1 ':1 22 ),:':+<1 4',1' <69 ):2 ,) '')5
! & & * 3
+ !
G ! # ? : !
## '') ? : ! # % $
-4 ' 1 * &'#! * # * '& # *,
5 ' % 5 '') '') & * ' 1 3 + G
' ' 1 * 6 ? * *
! # & * * ! > #
! ' 9 % % D & * * G
11 # & 4: , K,,, H ) ;5 * + ! ,, ! 3 &
* * + % 65 '') : ! '') : ! # !
, & " ' 1 ' 9 ## ! 4 # 5
6* ' & % * * # ' * *:" !
, %
'') ' 1 ' ? : ! ' 1
<2 # 3 * + 4 ! 7 5 '
# # % <2 @D #
" % * 4 % ' ! --(I ' 6 ! ' $5 6 ?
$
'') # ' 1 ' # & '') / *
' 9 4' L ? 5 47 % $ 5 6 ? " 3
83 ( & 6 # & & % ' 1 '
4' ) --(5 : ! % ' 1 '
# * ! '') " 41 # 9 I ' D_
6 (5 47 % $ 5 % : ! ' 9 * #
& & 2 > #! " * ( # 0 "'# "* ' 1 * &'#! * # * '& # *
> #! " "'# " + * '& # * "'# "
'19 \'198 4' 1f5 ) >
) 3
2 ' \' 8
' 9 , E
E ! >
p\m 6 " 6 % )76 " 6 % 26+ % % E "
, % ' 1 N
3 # , % ' 1 '
) '')
% # % ' \' 8
2 3 E " 3 % %
2 !
9 ,, 6 % 3 E ' 1 '
. E + 3 E "
:" , :" H :" {\${ E + :H., 4) 5 :" E +
) ; :" ${\ { E + { " m :" E +
:" K,, { " { % % E:" ,
+ ,,, 2 ! # + m 2 ! #
11 2 3 E " !
E + )2 2 3 E " ! E +
+ % % + % %
6 "
7
2 3
>
J>6 26+
% + ,,,
' 1 '19 \'19 4' 1J5
' 6 " '
' 9 \2'1 4!2'1 5 4' f5
' 9 \' 9 4 2'1 5 4' J5
' 9 \' 9 4' p5
6 ? " 8 % 14'19 >85 9 % 4' 9 > 5
+ - $ +../0 ## % O V
> # * % 4: ! 6 -- 5
' ! * % 4+ D % _ ---5
'') ?
8
? : ! * 26+ %% & '')
N 3 4; L --8I G ! --85
& & 4 8/" * ' & & ' (&"#* ( * + * ( * #! " * #, H8 &" -==2E,
O * % ' %
? * # 4< $5 48 &" 5 &
% '') %% % % '
# H2 4< 5 % !
# ? ' 1 ' & * ## 4 ) %% 5
%% # & % & ? : *
% ? : ! 4' ) --(5
* " 3 * '')
& ! # & % % #
'') +:) ? % 40 % I ) %% 5 I
$ ):2 ) <,.+ 2):1 G+: 6 11G): .G : ),+
* + 4B 1 D C 1 5 " & &
% # % & 2 * % % !
1 " O "
> % 4B + 9 % : ; % C +9:;5 % 4)95 4B 9 %
) C 9)5 47 % 5 46 < ! 5 ! % %
! % * % & 46 < ! 5
( -5 ++& * ) $ &"# " # ) * ( ! & &# "
46 5
$ ):6.' ,+ ,1.+ 9.'. .0G:
% * % * # " " * + :
# 3 % % & & % & %
1
" )9 & 1 *
?! & * % * + " % " *
6 " 4B > C5 &
# * O 9 ! ! 4B 9 ! ; C 9;5 9; 3 * +
! % * + 9; ?!
9;> & % * + %
% & ! 9)
& & ' ) $ )
: ! 9O 9 + # & " %% * "
# 1
$ ):1:6<,.+ :1 :H<):',<:1
9) & # * " * *
6 ? ! " ) 6 ) ] ) ;
4+ ) ! -5 6 "
41 % % 5 6 % " ' \ ) $ 4')5 ?
: ! 4 E ; D 5 6 ?
* 9 46 7 5 +
46 7 5 * 9 % " ') 4]
6 5 4T % M 5 # %
(
-6 (/ ( !* '# " ( * ' 1 * ' & &,
" ') " " $* * 4 5 # * 9 @+ 4 5
! 9 @+ 46 5 ) 4:E
< % & 3 O % !
' ) $ 4')5 & " ') & & #
" : ! " ')
*>$* " * * 3 *
)9 6 %% * # & ## ' ) $
% % 6 7 I
6 7 5 % > ? 1 9
<2> * + " * $* +
# # 3 #
$E> E " * + 46 7 I 6
-
7 I ' ? 2# ## 5 6* &
$* * + 49 D 2 5 % ! 9 + *
# % " 11 *! 11
N # # ) 3 * % 11
# * > 4' ) 6 -5 6
? ! N % ) ! * % 4' )
6 -5 41 % T 5 * % % *
11 )2 6 ? ( 4) #
9 5 41 % T 5
$ : 7, ':+< +G6 :.2).<:,]G: / )
# ) ! ) $ % ) )
V ) # * # & &
* )
) $ : ! : % 3 * + +>
# & ) 6> ) ?
* + & 4 -5 ) ?
) $ ? ) $ ?
41 1 D -- 5 % % )
49 ! -5 # # ) ) +< !
* % ) 40 !
9 ! 85 # % ! & * G %
% # ? 41 $ 5 ## " ! H
4' ) 6 -5 1 $ # # N
& % % % 4' ) 6 -5
$ ',0) <,.+ :1 ) +69:1
6 ? % ) & " 9; ! * %
4M --85 * % # ) * # ? ! ?
* 9 >N & % ' 9
% 9O 4B 9 ! ! O % C5
4 5 6 ? " 9; # 9O 4B 9 ! !
O C5 # ## 9O 9; % # )
4 ! 5 9O % ! & 26+ 2,2> " 4L 1 D
---5 6 * 9O 4 L D 5 N
& % 9O 3 # N
& * )9 # % *
$
& 6
? " ') >3>
% 4 1 -5 * ? ( (
% ++ 12 &
! % & ? : ! 47 O D , 5 #
" ') 3 O O ! % ?
-: > #! " * # ) ( ! & &# " & ' + "& * " + ' 1 * ' & &,
! " ) $ \' \9 \+ , % " *
& ) & 11 * * %
& 3 # * O 9 ! ! % O ! 9 9O 9O
% # " # 26+ 7 * + % # % * + 4M 5
8 +.+ 9.'. .0.G1 :+ ;.,+,+0 4+9:;5
+9:; O %
* % " 1 " "
L + % % ? : ! % ? 41
0 D (5 % L % * # ? 3
* %% & * " ? & * %
3 O
):0G <,.+ : <.2. .0,: : * +
* + Y & & * +
" * +
$
4L 6 5 * ) 0! # &
# # + " 4) |}~ % ? I
2 % K -5 O & 3 V
% % * " % 2
# ? 4M 5 !
* + * ! ! *: !
# % * + & : *
? # %
# 1 ( 4M 5 4B ! _ % ## ! C5
# ? & & : ! 47 6 # ---I
% 5 * ## 3 * + % ! @ > ! 6
N * * * +
6 * % * % %
& ; g * h
3 & < O > & * ? %
& * " ## #
& & % & 6
? ! &
3 a % !
! & # O % !
" ! &
$
. 8 B ,
E % %
# % #
# > > )+ ! &
# * % & &
# % %
Y * # * 3
% 41 -5 * %
# * + & * " * # 3
! * 3 * % % * " #
,. .0,: :1 1P1<:':1
2 # 3 * % % % 3
* * & 3 *
: 8$ 6 B , 3 E " C &
B C # ## B " C V
& E E V 6 V
# Q & ! & % &
N & % & B C %
N & ! & & 6
" % ! 4+ 5 , %
" ! % # & ; K +
% ! , # -$ &
% D N ! & 4 " 0
! % & & * * &
47 % -5 4+ " ' 5
$
-; * *#/+ ' &
5 K + & 3 * # # , 4g ,h5 & 3 #
% " * 6 &
* # , & & , 6 V
% N . #
# < , * + % & @ 4 )+ 5
* + 4 5 6 % 4 )+ 5 5 ': ,# 4+ " '
5
, & 4B , C5 47 % -5 3 #
% K + " * + M
6 D ) 4M 6 D -$ 5 % & & Q %
% 41 % + D -((5 4K 55 "
* # B , C : &
% ! * % 40 0
5 : 4 Y % 5 %
#
& % * % ! & 6 % # D
% & &
% ! & 3 % 4 B > _ C5
O * % % # #
% # # 4M % , -5 : * !
! & B \ C ! * * # %
& 3 " : ## #
N * % ! %
% * & *B # C
% * % # : #
* " % ! * & # "
& % # * * % 4 % _ % 5 * % 4
$
5 N * ! 47 M % 5 % !
O * & & * 4+ % % -5
% 4 6 5 * % 47 M % 5
" 4 5 % % !
3 * % "
"
% ! * "
; % V # ! &
* * % ! *
:1 2).<:,+:1 6.'2 :H:1 :< :1 6.'2 :H:1 2).<:,]G:1
* % N #
3 %
& # G *
# * & " !
* & % & 1 * &
# *
# %
% # % & &
# # & # * # " % I
& & *
# * " # *
% * ## ! &
% & ! 3
% " & " & 6
O * %
* & 3 * "
2 * > # * & # &
* % * > #
N 3 # * !
2 # " % ## "
3 # G ?! > # #
& " % " "
" & &
* % & * , ## % % #
a # # * % % * ## # &
% " & #
$$
# % # "
N * %
):1: G *,+<:) 6<,.+1 2).<:,+: > 2).<:,+: 422,+5
* " # " a .
* * ! & a
" O & % %
4B % C5 * \ 4B 2 > 2 , + _ D C 22,+5
a 4B C5 4B % C5 G % &
& # -- & 4 ## 3
5 % % &
% 3 % ! &
22,+ 4G ? 0
5 " 22,+ ? 40 5 49
0 5 4; % ' 5 47 % 5 E % !
4 2 % > ? $5
40 ) 5 $ 4 % 5 47 % (5 E
4) K D $5 41 ? M $55 , % 3 %
%
.= # '# ( >> # ** "# & #! ( * #! " * ( ,
$8
5 22,+ $ a * ## ! & %
4 % I I % # I O 5 5 a
4 # 1 5 65 % a # * % * 4; %
' 5
: # % * 22,+ * #
* % * ! & 4 D ) 5 41 j• 2
5 " * ! # &
* # " " #
& " * # * %
2).2),:<:1 :1 22,+
2 ## * & & > % # # % a D
24D5 " a 4B C5 ## %
6 4B % ## C5 47 % 5 * #
*
.),:+< <,.+ G ):1: G
< * " ! " I > . & *
& * " a * & & *
" & ! & & * 3 ! *
3 * % = 3
* 22,+ >
:0): ,1<), G<,.+ :1 :0):1
& * a % 4 5 D & &
" a G + a %
! XDlk +@ 4 Xl ! 5 % 24D5 & * a
" D
2 <9 :+0<9
" a 4B > % C5
& * " " a 4B % C 12 5
! 4B % > % C 2 5 O V , ## Q %
%
6 G1<:),+0 6.:77,6,:+<
" a 3 & 3 6 &
% 3 6 6 N & # ## %
$(
4B % ## C5 6 k @D 4D > 5 D a 4M
1 % ? -- 5 ## % ! X6l % a 3 #
G # 64D5 & # ## % !
a D
. * * ! !+ "#& * (< " & ,
I % B D C 1 B C 6 % 6 ## B 6 C
<.2. .0,: *G+ ):1: G
& O* % ! " / "
4B _ D C5 " 4B ># C5 " & 4B
_ D C5
):1: GH : <.,):1
" 47 % 5 : >) ! 4:)5 4: -8 5 %
a 2 & & a "
N , " % & *! " a
% # ## % * a
% 64D5 z % ? # D
4# % 5 :% * 2 % &
" 4B _ C5
):1: GH 16 :>7)::
" a ! &
% 2 47 % 5 *
% # & * a % 4B C5 % a
& * a &
& % "
$
4B ># C5 ># --- 4
---5 % * ! % , " >#
" B C * 2 % # & "
46 % 5 46 9 5
):1: GH 9,:) )69,]G:1
" & " % ># ##
4 . 5 47 % 65 " & 64D5
> % & ?
.- (/ * ( !* & ?,
5 ) I % 5 ) 1 # %
% % 65 ) & I
## % 4 . 5
: <.2. .0,: 7.+6<,.+
% * 22,+ # * % ! & %
% & 4 D ) I 1 Q 2 5 * 22,+
3 4 ) % ! 85 49 5 4; % ' 5 ,
%% & 22,+ ># & B C # %
22,+ 4' 1 5 % 4B ># C5 %
$-
22,+ & " & 4B # C5
4 ; % 5 # " & 49
T % 85
6 % & % 22,+ # #
* % 49 ! $5 6 %% & * ># *
# * " * % & *
% ! & #
49 _ 9 # ---5 & * #
% ! & # "
% & 4 -- 5 26+ & #
" Y & % & !
# # Y
* % a 6 & N O
% G ? # # % ## %
% & # " " % & 40
+ _ I 9 9 5
# * * 22,+ % * %
* ! & ! & " O
# 4 ) % ! (5 49 5 4 ) % ! (5 41 1 !
5 * ! " % "
* * 3 * % " ! &
4 % % 5 41 j[ ' ! $5 4 85 4 9 85
4 D ) 5
$ <:69+,]G:1
" # * * > 3 %
! 4P _ 9! P 95 # * ## 3 4 2>
'15 P 9 # % : ! &
# " 3 * + 4 % 5 *
4 % 5 2 * " H P "
% & # # ? H
# % 4 % % >% 5 P
# * H P * % *
# # * " % P 9 * 3
&
* " 3 " # " #
8
* 2>'1 O # * * # " & 6 &
* ## 3 & 4B % C5
& 9,1 49 5 01< 40 1 < # 5 ' 2 4' % 2 5 & &
" * N # & "
" &
" * 2>'1 Q % & #
" & 3 # *
" & & * & 2>'1
N # . % * &
# * ## & # * ## 4< 2>'15
& %% . #
" # * N * ## 6 &
% * " % " 3
# & * # % # &
##
22,+ : ' ,+<:+ +6: 0:+.',]G:
% & 4 < % $I 9 . O
5 ! & % %
6 ? : ! # 22,+ % % & O #
& * &
3 % & 4) 1 5
* % & O 3 ?
: ! G " ? % # %
8 .. >> ( & ! "* & ( ++& * ( < ' 1 * '& # *,
4 0 5
.2 >> ( * #! " * ( & ! "* & ? ( ++& * ( < ' 1 * &'#! *,
6 " 9 7 6 6 7 9 ) P : 22,+ !
% * + ? 49 % -5
8
" O % " *
% & ? ,, # % $ 4' ? L 5 8 4 1 %
5 P 9
* # * + 26)
* ( (
< 2>'1
.4 >> ( & ! '&# " ' 1
P 9 4' ? L 5
.5 >> ( & ! '&# " ( , F (&F& "* *,
< 2>'1 4 1 % 5
8
# 4<L $ 5 "
0,+1 & # *
% " 0,+1 4 2 5 6 0 + 4B 0 + 5
" 0,+1 \ '6' * "
* ! % & * *
O " & #
8
2 > <
!
: ! * ! % A& % & Y
! # : ! * !
& # #
: ! 6 & " %
3
9! " N
W6 % * + " N .
9 " 3
% 6 %% * " ? 9
" N ## * ## ! * " 9
3 % # %
& %
" % 3 ? : ! %
* # 3 %% * "
# % # & % & *
# % & : ## *
* + ? & & /
? *# %#% " 0 "'# "" J $ * * "# * #! " * + $ ! * (&"* & ' ""& **&"' ( ( ++& J
? *# %#% " +!'&" *+ & # "&# 0 & J
9 *# K ( ' + ? 3 &(4= J
9 * * "# * #! " * " ' & ( & ! &# " # ( ' & ( * +!'&" *+ * ( +& "# "&"'
!" + $ J
2 3 & " # * ## ;
## " B ' % & ? * !
/ ! & # C
" # * ## 3 !
* # % 26+ " '
) $ 47 % ( O 5 O & O* *
* O # * &
% &
8$
.6 >> ( & +& "# "&"' !" + $ ( *! & L, 00 #& ? " -==:,
2 # O* # * >
* & ' O 6?O? D 46+)1 G') ( -5 & *
&
* + ? 40 5 O* #
# B = C
# * ## 3 ! * # "
& & % & 22,+
% & * # &
? G "
! : !
* # " % & ? !
* % "
* + ?! * + N % &
& ?! " % 4 + !
# % 5 € " 3
% & ? : !
88 4
$ 2). G6<,.+ :< 2G),7,6 <,.+ :1 2).<:,+:1 22 <1
% # ## " * #
& * ! '1 % *
; & * "
" & 3 * ! * % &
* & O* 2 O
B ' ' C
+ O # # 3 * "
* = 2
&
G # % & * N
## * & ##
# & 4B < % C5 6 & !
& 3 * " +> & &
8 9 * 0 >1> # 6 9,1>< % 01<>< %
*N ## 3 # & # O*
' ),+:>:H2):11 O
' 6 7
40 9 5 4 " 5
$ * B C
# " &
" 47 % 5 3 # % & * # "
6 3 " > = " 2 > _
* "
8(
.: ' !+& !"! & ( # ' ? ! + "#& ,
5 2 # 5 2 " 65
2 * 2>'1 % & & ## "
" 2>'1 * " # " Y
* " % # #
! ;* ! # &
# " & R% * $ D 4
# , % 5 % & # &
# # % 1 1>2 0: 47 % -5 Y & #
z # & ! O & *3 &
# = : % N & O* # " #
µ% % & # = 6
# 3 * # " # 3
* " * B C " O 3
= # ## *
K % > " &
# # # ; * 3 ## # 3 * %
8
= * & * % &
* % * !
& * # # % & &
6 O & * 3 & &
N # & % & %
% # Q % * " # "
# 6 & # ##
O 3 U
= # # /
+ % #
. % * &
# N & H27 H2
> " % $ 8 ( 8(
$8 8-$ 88 -$8 ( - 8
% ' ),+:>:H2):1140 9 5 %
88 42 K 5 $ 8$ ( 4' >6 j[
+ (5 8 4) L (5 8 $ 4 9 D (5
8 8 8$
= ! 8 6 0
1 1 66 % ?! * : ## 6 0 1 1 66 > %
?! # % & & * #
* ## 2>'1
< 8 " #
# % -